RP-HPLC 法测定壮西六味丸中胡椒碱的含量

董志同 李 妍

(1.内蒙古大唐药业有限公司，内蒙古，呼和浩特 010010;2.内蒙古自治区食品药品检验所，内蒙古，呼和浩特 010020)

本方来源于18 世纪蒙医伊希巴拉珠尔著《甘露四部》，1998年在《卫生部药品标准》蒙药分册(1998年版)中收载为“壮西六味丸”，为现行有效标准［1］。该标准项下规定了性状项和制剂的通项检查，为了提高质量控制标准，经过对收集的7 批壮西六味丸中胡椒碱的定量分析，可控制其质量，为壮西六味丸的质量评价提供可靠的方法。

1 仪器与试剂试药

日本岛津LC -20AT 型高效液相色谱仪(带SPD -M20A 型二极管阵列检测器)和LC-10ATvp 型高效液相色谱仪(带SPD-10Avp 型紫外检测器)，Sartorius ME5 型电子天平，Mettler AE-100 电子天平，JD200 -2 型电子天平;AS 5150A 超声清洗仪。

胡椒碱对照品：中国药品生物制品检定所提供(批号：0775 -200203)。甲醇为色谱纯，其他均为分析纯试剂，水为高纯水。

2 方 法

2.1 色谱条件的选择：色谱柱：岛津C18 (250 ×4.6mm 5μm)色谱柱;流动相乙腈-水(25：75);检测波长340nm;柱温30℃;流速1.0mL/min;进样量10μL。

2.2 对照品溶液的制备：精密称取无水乙醇对照品适量，置棕色量瓶中，加无水乙醇制成每1mL 含20μg 的溶液，摇匀，即得。

2.3 供试品溶液制备方法：取本品适量，研细，取约1g，精密称定，置50mL 棕色量瓶中，加无水乙醇40mL，超声处理(功率500W，频率80kHz)30min，放冷，用无水乙醇至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液10mL，至25mL 棕色量瓶中，加无水乙醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，即得。

2.4 线性考察：按“2.2”项下，分别精密吸取浓度为21.58μg/mL 的对照品溶液2μL、5μL、10μL、20μL、30μL 注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定，以峰面积对进样量进行回归分析，结果胡椒碱在50.62ng ～759.3ng 范围内分别呈良好的线性关系。回归方程分别为：

2.5 重复性试验：取同一批号供试品6 份，分别按上述供试品溶液的制备方法和色谱条件进行测定，进样量各10μL，计算RSD 为1.8%。

2.6 稳定性试验：取同一供试品溶液分别于0h、2h、4h、8h、12h、24h 进行测定，计算RSD 为0.26%。

2.7 回收率实验：取同一批号供试品6 份，置具塞锥形瓶中，按“2.3”项下分别加入对照品溶液，同法测定，结果见表1。

表1 胡椒碱加样回收试验

3 样品测定方法

分别收集阜新蒙药有限责任公司样品1 批，库伦蒙药厂样品3 批，乌兰浩特中蒙制药有限公司样品3 批，按上述色谱条件，测定胡椒碱的峰面积。结果7 批样品的含量(mg/g)分别为2.39、2.50、2.75、1.54、3.25、3.34、3.28。

4 讨 论

《中国药典》2010年版一部荜茇项下采用超声提取，方法比较完善，故参照药典选择无水乙醇超声提取［2］。

以无水乙醇作为提取溶剂分别考察超声20、30、40、60min 后含量的变化，发现30min 后结果相差不大，故选择以无水乙醇超声30min 作为提取方法。

本试验的方法工作曲线线性关系好，结果的准确度和精密度均能满足要求，分析方法简便、快速、重复性好，对提高壮西六味丸质量标准的控制水平很有价值。

［1］国家药典委员会.卫生部药品标准蒙药分册［S］.1997.

［2］国家药典委员会.中国药典［S］.一部.北京：中国医药科技出版社，2010：219.