HPLC 法测定蒙药材铁杆蒿不同部位中绿原酸的含量

佟皎薇 李佳林

(内蒙古自治区人民医院，内蒙古 呼和浩特 010017)

本品系民族医习用药材，蒙古名哈日沙布嘎，为菊科植物铁杆蒿Artemisia sacrorum Ledeb.别名万年蒿，在民族医药及民间中应用广泛。铁杆蒿全株能入药。蒙医为杀粘虫，燥协日乌素，解痉，消肿止痛［1］;中医为清热解毒，凉血止痛。药理研究表明，具有抗肿瘤、抗氧化、保肝利胆作用［2］。绿原酸可作为药材质量控制成分之一。

1 仪器与试剂

1.1 仪器：1100 型高效液相色谱仪(美国安捷伦公司)，TJ-912 型色谱分析平台(太极计算机公司)。

1.2 试药：绿原酸对照品由中国药品生物制品检定所提供;乙腈为色谱纯;其他均为分析纯试剂;水为纯化水;铁杆蒿自采(2013年8月底内蒙古呼和浩特市大青山坝口村)。

2 实验方法与结果

2.1 色谱条件：色谱柱Kromasi -C18 (4.6mm×200mm，5μm)，流动相乙腈-3mL·L-1磷酸溶液(12 ︰88)，波长328nm，进样10μL。在此条件下样品中绿原酸与其它组分有较好的分离，见图1。

2.2 对照品溶液的制备及线性关系考察：精密称取干燥至恒质量的绿原酸对照品适量，置棕色量瓶中，甲醇溶解，配制成1mL 含0.28 mg 绿原酸溶液，作为对照品溶液。分别精密量取绿原酸对照品溶液0.25，0.5，1，2，3，4 和5mL，置于10mL 量瓶内，用甲醇稀释至刻度，按上述色谱条件进行测定。结果，在7 ～140μg·mL-1浓度范围内以峰面积(A)与对照品质量浓度(C)进行回归，其线性关系良好。回归方程：A=5452.5 +7008.4 C，r=0.999。

2.3 供试品溶液的制备：取本品根、茎、花叶与地上部位，粉碎，过100 目筛，精密称定70mg，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇10mL，称质量，超声处理50min ，放冷，称重，用甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液备用，即得。

2.4 稳定性实验：取同一份供试品溶液，分别在0，1，2，4h进样测定，以绿原酸峰面积值计算RSD =0.19%。结果表明，供试品溶液在4h 内稳定。

2.5 精密度实验及重复性实验：吸取同一批供试品溶液，在上述色谱条件下重复进样6 次，测得绿原酸峰面积RSD=0.13%。取同批药材地下部位按2.3 项下平行制备6 份样品溶液，并按2.1 项下测定，绿原酸的平均含量=0.35%，RSD=0.54%。

2.6 加样回收率实验：取同批药材地上部位已知含量的样品6 份，每份取约30mg，精密称定，依次精密加入分别加入0.1mL(每mL 含绿原酸4.20 mg)对照品溶液，挥去溶剂，按供试品溶液的制备操作，测定含量，计算回收率。绿原酸平均回收率为103.6%，RSD=3.31%。

2.7 样品测定：取铁杆蒿药材不同部位，按2.3 项下方法制备供试品溶液，按拟定的色谱条件测定绿原酸含量，结果根部0.260%，茎枝0.422%，花叶0.222%，平均含量0.301%。

3 小 结

我区是铁杆蒿主要产地，目前尚无含量测定标准。其中铁杆蒿抗氧化与保肝利胆作用与绿原酸药理作用有一定的联系，故绿原酸可以作为铁杆蒿质量评价标准之一。

［1］国家药典委员会.药品标准蒙药分册［S］.1998，38.

［2］王心喜，金光洙.中药万年蒿化学成分及药理研究进展［J］.中药材，2010，33(5)：831 -833.