不同免疫程序下猪瘟、高致病性猪蓝耳病和口蹄疫免疫效果分析

张明敬　李　峰　单玉平　孙　田（连云港市畜牧兽医站，江苏连云港222001）

猪病防控Swine Disease Prevention and Control

不同免疫程序下猪瘟、高致病性猪蓝耳病和口蹄疫免疫效果分析

张明敬李峰单玉平孙田
（连云港市畜牧兽医站，江苏连云港222001）

摘要：本文通过6组不同免疫程序下对猪瘟（HC）、高致病性猪蓝耳病（HPRRS）和口蹄疫（FMD）免疫效果进行跟踪监测，分析每一组免疫程序下各疫病的免疫抗体水平，发现HC的免疫抗体水平受其他疫苗的免疫程序影响较小；HPRRS的提前单独免疫可能促进猪瘟抗体的产生，HPRRS的免疫抗体水平受其他疫苗的免疫程序影响较小；口蹄疫合成肽疫苗的抗体水平在HPRRS提前单独免疫后，下降明显，两者之间是否存在相关，还需要进一步试验佐证。

关键词：猪瘟；高致病性猪蓝耳病；口蹄疫；免疫程序；免疫效果

猪瘟（Swine Fever, Hog Cholera, HC）、高致病性猪蓝耳病（High Pathogenicity Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome, HPRRS）、和口蹄疫（Foot and Mouth Disease, FMD）是目前危害养猪生产的主要传染病，最有效的预防方法就是免疫注射。世界动物卫生组织（OIE）将HC、FMD列为A类家畜传染病，将HPRRS列为B类传染病，同时将这三种疫病列为世界范围内重要传染病研究行列[1,2]。本试验通过6组不同免疫程序下对HC、HPRRS 和FMD免疫效果进行跟踪监测，分析每一组免疫程序下各疫病的免疫抗体水平，旨在确定更符合连云港地区猪群的免疫程序。现报告如下。

1　材料和方法

1.1试验动物

连云港市某自繁自养规模猪场提供的母猪及仔猪。

1.2疫苗

猪瘟疫苗（以下简称HC）、高致病性猪蓝耳病疫苗（以下简称HPRRS）、口蹄疫合成肽疫苗（以下简称VP1苗）及猪O型口蹄疫灭活浓缩疫苗(以下简称206苗)均使用的是政府招标统购苗。

1.3检测试剂和判定

猪瘟抗体ELISA试剂盒（批号：T4413040）和猪繁殖与呼吸障碍综合征抗体ELISA试剂盒（批号：T4404071）购自韩国安捷公司、猪口蹄疫病毒VP1结构蛋白抗体酶联免疫吸附试验诊断试剂盒（批号：201403004）购自上海优耐特生物公司以及口蹄疫O型液相阻断ELISA抗体检测试剂盒（批号：2014060301）购自中国农业科学院兰州兽医研究所，试验操作和结果判定按说明书要求进行。

1.4分组方法及免疫程序

本试验共分为6组进行，分别为A、B、C、D、E和F组，每组12头仔猪（注：免疫过程中有个别应激死亡，所以实际试验数据每组不满12头），每组的免疫程序均有所不同，试验分组及免疫程序详见表1。

表1　试验分组及免疫程序

1.5样品采集及检测方法

仔猪一免前采血，检测血清中HC、HPRRS及FMD母源抗体水平；之后在60、70、102和135日龄分别采血，检测血清中HC、HPRRS、FMD的抗体水平。检测方法及步骤按试剂盒说明书进行操作和分析。

2　结果与分析

2.1HC苗的免疫效果

图1为6组免疫程序下不同采血时间猪瘟抗体的检测结果。从图中可以看出，一免前HC的抗体水平除B组外，其他5组的HC抗体合格率都在70%以上，说明仔猪在胎儿期间已经获得了母源抗体。仔猪60日龄（即HC二免后14天）时，6个试验组的HC抗体群体合格率均达到了很高水平，之后A组的HC抗体水平持续下降到较低的水平，可能该组的猪群受到了HC病毒的侵袭，由于仔猪本身的抗体水平较高，HC病毒只是中和了猪群本身的一部分抗体而并未对猪群致病；B组的HC高抗体水平维持到102日龄（即二免后56天）开始下降，随后抗体水平又出现上升现象，可能该猪群中存在HC病毒的一过性感染；C、D、E、F组的HC抗体均在很长一段时间维持在一个较高的水平，完全符合加强免疫后，抗体在14～21天迅速上升至很高的水平并维持很长一段的时间的规律，因此本试验中的C、D、E、F组的猪瘟免疫程序能较好地抵抗HC病毒的侵袭，保护猪群。与A组相比，C组是HPRRS提前免疫组，C组的HC的抗体水平在二免后的24天、55天和89天均高于A组，这说明HPRRS的提前免疫有利于HC的免疫效果。

图1　HC苗免疫抗体结果

2.2HPRRS苗的免疫效果

从图2中可以看出，免疫前HPRRS的抗体水平都较低，群体抗体合格率均在40%以下，本次试验仔猪免疫前的采样日龄是15天，文献报道HPRRS的母源抗体可以维持到断奶前后，也就是28天左右，说明仔猪在胎儿期间没有获得足够的母源抗体，有的甚至没有获得母源抗体。到60日龄时，即HPRRS免疫后的30天，6个试验组的HPRRS群体合格率均达到了很高水平，除A组外，其他5组的群体抗体合格率都在80%以上，直到135日龄时猪血清中的抗体水平仍较高，群体合格率均达到100%。本次试验所使用的是HPRRS弱毒疫苗，因此可以看出只需使用HPRRS弱毒疫苗对猪群进行一次免疫，就能使猪群得到很好的保护，而不受其他免疫程序的影响，这也符合金光明[3]等的研究，其研究表明仔猪进行HPRRS弱毒苗免疫后的第110天采用同源强毒感染，动物可得到完全保护，而且对强毒感染的保护甚至是终生的。

2.3VP1苗的免疫效果

从图3中可以看出，免疫前VP1的抗体水平都较高，群体抗体合格率都在70%以上，说明仔猪在胎儿期间已经获得了很好的VP1母源抗体。A、B及C组对口蹄疫的免疫，未采用VP1苗，两次免疫都采用206苗，结果显示，二免后A、B及C组VP1抗体水平持续下降。D、E及F组对口蹄疫的免疫，首免采用206苗，二免采用VP1苗，结果显示二免后此3组VP1的抗体都维持在较高的水平。根据免疫学原理：206疫苗是O型口蹄疫的全病毒灭活疫苗，经206疫苗免疫后产生的是全病毒抗体，同时因为是灭活疫苗，所以免疫后产生抗体的时候较长，且必需经过二免才能达到理想的免疫抗体水平。而VP1疫苗是口蹄疫病毒结构蛋白上的一个多肽片段，经VP1疫苗免疫后所产生的是病毒结构蛋白抗体，由于VP1是表达蛋白，且蛋白抗原小而单一，纯度高，免疫进入动物体内后不需要像病毒那样需要复杂的识别和提呈过程，所以能很快产生针对病毒结构蛋白的抗体。笔者曾经做过206苗和VP1苗免疫后的免疫抗体水平对比试验，发现猪的VP1苗在一免后14天就能产生较高水平的抗体，并且高抗体水平能维持很长一段时间，而猪的206苗二免后抗体群体合格率都很难达到80%，这次的试验结果也与之前相符。同时对比A和C两组免疫程序与结果发现，206苗同样的免疫剂量与免疫日龄，C组的抗体下降较A组更快些，这可能与HPRRS的免疫先后有关。

图2　HPRRS苗免疫抗体结果

图3　VP1苗免疫抗体结果

图4　206苗免疫抗体结果

2.4206苗的免疫效果

从图4中可以看出，一免前猪O型口蹄疫抗体都处在极低的水平，调查发现生产该猪群的母猪之前的免疫程序中所使用的均为口蹄疫VP1疫苗，所以血清中没有检测到针对206苗的母源抗体的存在。A、B、C、F四组的O型口蹄疫抗体在60日龄（即二免后14天）均有不同程度的提高。而二免使用VP1苗的D、E两组的O型口蹄疫抗体滴度均很低，群体抗体合格率均不合格。其中A组的猪O型口蹄疫抗体水平在二免后24天开始下降；B组的猪O型口蹄疫抗体水平维持在一个较高的水平，直至135日龄（即二免后89天）；C组的O型口蹄疫抗体水平呈现起伏状态，60日龄（即二免14天）时，抗体水平得到提高，70日龄时迅速下降，102日龄时抗体水平再次上升，但群体的合格率始终没有达到70%，疫病风险始终存在，猜测当HPRRS先于206苗免疫时，会影响206苗的初次免疫效果。此外，与A组相比，B组分别在一免和二免时增加了1 mL 206苗的免疫剂量，结果显示B组在二免后不同时间点的抗体水平均高于A组，这表明增加206苗的免疫剂量与提高猪O型口蹄疫的免疫效果可能存在正相关关系。

3　讨论

从本次试验的结果中可以看出，HC免疫后抗体水平受其他疫苗的免疫程序影响较小，只要肉猪在养殖期间进行两次免疫，就能刺激机体产生较高水平的抗体，保护肉猪免受HC病毒的感染而引起生产性能的下降，同时，如果对肉猪进行HPRRS的提前单独免疫可能对猪瘟抗体的产生具有促进作用。HPRRS免疫后抗体水平受其他疫苗的免疫程序影响较小，只要对猪群进行一次弱毒苗的免疫，就能刺激机体产生较高水平的抗体，保护其在养殖期免受HPPRS病毒的感染，但同时我们也发现，HPRRS的母源抗体水平持续时间并不像以前文献报道的那么长，而目前大部分养殖场推行的免疫程序是在仔猪断奶前后（28天左右）进行初免，因此存在HPRRS抗体的免疫空白期，在此期间如果仔猪受到HPRRS病毒的感染，则会对整个猪群的生产性能造成较大影响，因此，最好将HPRRS的免疫时间稍微向前调整。

同时，由于HPRRS是免疫抑制性疾病，在HPRRS提前单独免疫后VP1抗体水平下降较其他组明显；将HPRRS作为首免疫苗，206苗作为后免疫苗，猪群O型口蹄疫抗体水平呈现起伏状态，群体的合格率始终低于70%，说明HPRRS苗与206苗免疫的先后顺序影响206苗的免疫效果；不能满足我国现行的重要动物疫病的防疫要求。在此基础上，在一免和二免时分别将206苗的免疫剂量由1 mL增加至2 mL，有助于获得更高的免疫抗体水平。华树明[4]研究表明：O型FMD、HC和HPRRS疫苗同时分点注射后，FMD抗体效价合格率不高，免疫效果不佳；HC抗体效价合格率较高，免疫效果较好。虽然我们的试验不是同时分点注射的，但就试验结果来说与上述研究存在一定的相似性。

综上所述，为了获得最好的组合免疫效果，应合理缩短HPRRS的免疫空白期。建议在实际免疫的时候，在保持HC免疫时间点不变的情况下，将HPRRS疫苗的免疫时间点稍微向前调整，同时在接下来的免疫程序中增加206疫苗的免疫剂量，有助于肉猪获得更为有效的免疫抗体，从而保证肉猪在养殖期间的健康，以降低养殖风险，增加养殖效益。

参考文献

[1]殷震,刘景华.动物病毒学[M].北京:科学出版社, 1997:652-664.

[2]蔡宝祥.家畜传染病学[M].第4版.北京:中国农业出版社, 2001.

[3]金光明,杨倩.猪繁殖与呼吸综合征免疫学研究[J].安徽农业科学, 2003, 31(1): 114-116.

[4]华树明.高致病性猪蓝耳病疫苗与口蹄疫、猪瘟疫苗同时分点注射对口蹄疫、猪瘟抗体效价的影响试验[J].浙江畜牧兽医, 2008(4):6-7.

中图分类号：S828

文献标识码：B

文章编号：1673-4645(2015)03-0044-04

收稿日期：2015-01-04