罗氏Cobas e 602电化学发光分析仪检测CA19-9方法学评价

胡亚远 张春秀福建省漳州正兴医院检验科，福建漳州 363000

罗氏Cobas e 602电化学发光分析仪检测CA19-9方法学评价

胡亚远 张春秀
福建省漳州正兴医院检验科，福建漳州 363000

[摘要]目的 探讨糖链抗原19-9（CA19-9）采用罗氏Cobas e 602电化学发光分析仪检测方法学评价。方法 采用罗氏Cobas e 602电化学发光分析仪，在分析测量范围、准确度、精密度上对CA19-9检测，实施方法学评价。 结果 TM1批内精密度监测结果显示，与说明书中的变异系数（CV）＜2.3%较为相似，TM2批内精密度监测结果显示，与说明书中的CV＜1.8%相似。TM1、TM2对CA19-9测定得出的批间精密度均在CA＜2.6%，＜1.9%内，表明仪器稳定性和精密度居更高水平。检验中心室间质评物检测CA19-9的结果对比靶值，偏倚范围为-9.48%～1.77%，表明仪器检测有较高准确度。从6个试验样本检测CA19-9和已知样品检测结果获取直线方程，R2=0.9988，Y=1.007X-0.493，在规定b值0.97～1.03，R2≥0.95内，二者呈较好的线性相关。 结论 在CA19-9检测中，应用罗氏cobas e 602电化学发光分析仪，在分析测量范围、准确度、精密度等方法学检测指标上，与评价标准和验证符合，可为临床检测工作提供准确的参考依据。

[关键词]罗氏Cobas e 602；电化学发光分析仪；CA19-9；方法学评价

近年来，我国社会经济发展成就卓越，带动了医疗科技的进步，临床实验室检验技术也随之不断提高，应用罗氏Cobas e 602对CA1909检测，掌握罗氏Cobas e 602分析测定范围、准确度、精密度，可为临床疾病的诊治提供有力参考依据[1-3]，本次研究就此展开探讨，现报道如下。

1　资料与方法

1.1一般资料

选用电化学发光分析仪罗氏Cobas e 602型，包括配套校准品和试剂，以肿瘤质控品（罗氏公司生产）作质控品。TM1和TM2由罗氏公司生产，准确度评价依据EP15-A2文件所制定标准（Clinical and Laboratory Standards Institute，https://www.ihs.com/ products/clsi-standards.html）；测量范围依据CLSI 的EP-6A文件评价。根据的EP15-A2文件指南进行试验操作，选用罗氏公司生产的TM1（低水平，批号为165880）和TM2（高水平，批号为165881）2个水平的质控品，每天室内质控在控后对TM1和TM2重复测定4次，连续5d。计算批内不精密度和批间精密度，并与厂家声明的批内不精密度和批间精密度比较。

1.2方法

（1）评价精密度：依据EP-5A文件，完成重复性批内、批间试验，应用低水平TM1和高水平TM2质控品。首先，实施批内精密度检测：对2个浓度TM1和TM2质控品重复测定，各20次，对两组变异系数（CV）、均值（x）标准差（s）分别计算。再次，完成批间精密度试验，每日对2个浓度TM1、TM2的质控品测定1次，共20d，对两组CV、均值与平均差分别计算，得出CV值。（2）评价准确度：依据EP15-A2文件评价准确度，应用2013年卫生部临检中心发放的第2次室间质评物检测，包括肿瘤标志物的5个样本。将检测结果对比质评物靶值，对相对偏倚（%）计算，评估有无在许可范围。（3）评价测量范围（AMR）：对CA19-9低、高值的血清各留取一份，所获得血清的样本浓度与仪器测量线性范围相似和接近。将低、高浓度样本按5：0，4：1，3：2，2：3，1：4，0：5的不同比例混合（n=6），实验重复3次。数据采用直线回归统计处理，均值设置为Y轴，分析物浓度设置为X轴，Y=bx+a，若b值在0.97 ～ 1.03，R2≥0.95，则可为真实的测量分析范围，作临床参考依据。

1.3统计学处理

实验中涉及数据均在SPSS13.0中输入，组间计量数据采用（±s）表示，计量资料采用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1TM1批内精密度监测

TM1批内精密度监测结果显示，与说明书中的CV＜2.3%较为相似，TM2批内精密度监测结果显示，与说明书中的CV＜1.8%相似。TM1、TM2对CA19-9测定得出的批间精密度均在1.9%＜CV ＜2.6%，表明仪器稳定性和精密度居更高水平。见表1。

表1　本次实验中批内、批间精密度变化（±s，n=6）

表1　本次实验中批内、批间精密度变化（±s，n=6）

CA19-9批间　精密度　批内　精密度浓度　（U/mL)CV（%）±s（U/mL)CV（%）TM1　18.3±0.45　2.43±0.03　18.6±0.42　2.18±0.12 TM2　80.8±1.42　1.75±0.04　82.4± 1.28　1.54±0.14 t　102．774　33.313　116.006　8.501 P 0.000　0.000　0.000　0.000

2.2评价准确度

检验中心室间质评物检测CA19-9的结果对比靶值，偏倚范围为-9.48～1.77%，较中心规定±25%呈较低显示，与厂家要求＜10%符合，仪器检测准确度居较高水平。见表2。

表2　本次实验中仪器检测准确度变化

2.3测量范围评价

检测结果获取的直线方程中，R2=0.998 8，Y=1.007X-0.493，在规定b值0.97 ～ 1.03，R2≥0.95内，二者呈较好的线性相关，可作为真实实施分析测量时的范围，供临床参考。

3　讨论

依据ISO 15189对目前临床实验室质量要求，实验室在新的检验方法建立前，或对所有检验方法使用时，均需评价其基本性能，确保检验系统可对临床应用满意，确保可靠性，方法学评价内容在操作过程中通常包括可报告的针对性范围、具体准确度、精密度，其中准确度和精密度的测定为最主要的验证指标[4-6]。

在评价精密度中，参考EP-5A文件方法实施重复性批内、批间试验，精密度质控品达厂家要求，而精密度由厂家给定的数值较CISI性能要求低，精密度经质控品检测，可满足CISI性能要求[7-10]。因自人体来源的样本成分较为复杂，存在较多干扰因素，临床工作准确度评价时极大程度上影响了检验结果准确性[11-13]。故采用EP15-A2方法对准确度评价，准确度符合要求[14-15]。

在试验中，依据EP-6A文件完成AMR评价，将高值和低值CA19-9样本按5∶0比例；4∶1比例；3∶2比例；1∶4比例；0∶5比例予以混合，对线性试验样获取，共6个，计算平均值，数据应用直线回归统计方法处理。从6个试验样本检测CA19-9和已知样品检测结果获取直线方程，R2=0.998 8，Y=1.007X-0.493，在规定b值0.97 ～ 1.03，R2≥0.95内，二者呈较好的线性相关，可作为真实实施分析测量时的范围，供临床参考。CA19-9由Koprowski在1979年首先从大肠癌组织分离中检出，是临床上目前应用最多、最有价值的肿瘤相关抗原之一，正常支气管上皮细胞、腺泡中心细胞、胰腺导管及子宫内膜均可有CA19-9分布和表达，但血清浓度多在37KU/L。在消化道恶性肿瘤发生时，尤其是胰腺癌，检测血清CA19-9，可呈显著升高表现，为最具价值的诊断胰腺癌的肿瘤标志物。近年来，随着对CA19-9研究的深入，进一步认识了其临床价值，可用于指导治疗。Nishida等统计血清CA19-9呈2倍升高的所需时间，与胰腺癌患者肿瘤体积和生存期变化联系分析，结果示所需时间与患者临床生存期有较大相关性，此时期越短，越有较短的生存期，血清CA19-9升高2倍时间需患者肿瘤体积增长2倍时间呈正相关，即肿瘤体积在CA19-9上升越快时，增长越高。对CA19-9研究，可用于胰腺癌患者疗效和预后评估，有理想的监测血清CA19-9价值。

综上，在CA19-9检测中，应用罗氏cobas e 602电化学发光分析仪，在分析测量范围、准确度、精密度等方法学检测指标上，与评价标准和验证符合，可为临床检测工作提供准确的参考依据。

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[中图分类号]R197.39

[文献标识码]B

[文章编号]2095-0616（2015）23-132-03

收稿日期：（2015-08-20）

Methodology evaluation of roche cobas e 602 ECL analyzer detected CA19-9

HU Yayuan ZHANG Chunxiu
Department of Laboratory,Zhengxing Hospital,Zhangzhou 363000,China

[Abstract]Objective To investigate methodology evaluation of Roche Cobas e 602 ECL analyzer detected by Carbohydrate antigen 19-9 (CA19-9). Methods The study implement methodology evaluation by using ECL Roche Cobas e 602 analyzer to measure range,accuracy,precision on CA19-9 tested. Results The results show that the variation coefficient (CV) of the＜2.3% is similar to that of the instruction manual (TM1).TM2 batch precision monitoring results show that the CV＜1.8% is similar to the instruction manual(TM2).Inter-assay precision TM1,TM2 of CA19-9 were measured in the specification CA＜2.6%,＜1.9%.The results suggest that the instrument has high stability and precision.Contrast target value(bias range) of inspection Center EQA in CA19-9 test was -9.48%-1.77%. The results suggest detection equipment have high Accuracy.From the six test samples tested CA19-9 to obtain a linear equation: R2=0.998 8,Y=1.007X-0.493,b at a predetermined value 0.97-1.03,within R2≥0.95,all data have good linear correlation. Conclusion In CA19-9 detection by using Roche cobas e 602 application ECL analyzer,the analytical measurement range,accuracy,precision,and so on methodological detection index,and verify compliance with the evaluation criteria,can be provided for clinical testing work accurate reference. [Key words] Roche Cobas e 602;ECL analyzer;CA19-9;Methodology evaluation