章春宇庄程刘晓茵
(1长春市健康教育中心,吉林 长春 130021;2长春市朝阳区卫生局卫生监督所;3长春医学高等专科学校,130031)
微波辅助提取半枝莲多糖工艺优化
章春宇1,3庄程2刘晓茵3
(1长春市健康教育中心,吉林 长春 130021;2长春市朝阳区卫生局卫生监督所;3长春医学高等专科学校,130031)
目的:研究微波辅助提取半枝莲多糖的最佳工艺条件。方法:以半枝莲多糖的提取率和多糖含量为指标,采用正交试验筛选最佳微波提取工艺。结果:微波辅助提取的最佳工艺条件为:微波提取时间6 m i n,微波功率700 W,料液比1∶15(g/m L)。结论:本实验优选的工艺准确、方便、快捷,可用于半枝莲多糖的提取。
半枝莲;多糖;微波提取;工艺优化
半枝莲(Scutellaria barbata D.D on.)为唇形科植物半枝莲的干燥全草,味辛、苦,性寒,归肺、肝、肾经,具有清热解毒、化瘀利尿的功效[1]。半枝莲主产于江苏、浙江、福建、广西和广东等地,现代药理研究表明半枝莲具有抗癌、免疫调节等作用,半枝莲的主要有效成分为黄酮类、多糖和挥发性物质[2]。本研究采用微波辅助提取半枝莲多糖,在单因素实验基础上,设计正交试验优化了半枝莲粗多糖的提取工艺,旨在为半枝莲多糖的深度开发及应用提供理论依据。
1.1 仪器
T1901双光束紫外可见分光光度计(北京普西通用仪器责任有限公司),电子天平BS224S(赛多利斯科学仪器北京有限公司)。
1.2 试药
半枝莲(购于长春市药材公司),标准品:无水葡萄糖(飞宇生物科技有限公司,含量大于98%,批号:FY 18720206)。苯酚、浓硫酸、乙醇等均为分析纯。
2.1 半枝莲样品液的制备
称取适量半枝莲,粉碎过筛后制成半枝莲颗粒,脱脂后依据微波提取方法正交试验设计方案到得供试样品液,见图1。
图1 半枝莲样品液制备流程
2.2 提取条件因素水平设定
经预试验研究发现,对半枝莲多糖提取影响较大的因素有提取时间(A)、功率(B)、料液比(C),因此选择这3个因素做为考察因素,每个因素选取3个水平,按L9(33)正交表安排试验,每个试验均平行两份,正交因素水平见表1。
表1 半枝莲提取正交试验因素水平
2.3 半枝莲多糖的测定方法[3]
半枝莲多糖的测定以葡萄糖为标准品,采用硫酸-苯酚比色法。
2.3.1 标准样品溶液的配制精密称取0.014 8 g干燥至恒重的无水葡萄糖,加入 100 m L容量瓶中,用水溶解至刻度,使成148.1 μg/m L即得。
2.3.2 标准曲线的制备分别精密吸取上述标准样品溶液 0.2,0.4,0.6,0.8,1.0 m L至 10 m L容量瓶中,然后依次加入1.8,1.6,1.4,1.2,1.0 m L蒸馏水,再各加1.0 m L 6%苯酚试剂,混匀,精密加入5 m L浓硫酸,振摇后放置 5 m i n,置沸水浴中加热15 m i n,立即转入冷水浴中冷却至室温,以蒸馏水为空白,在490 nm波长处测定吸收度,即得标准曲线,以浓度C对吸收度A回归方程:
A=1.087 6C+ 0.005 6,
r=0.999 2。
2.3.3 半枝莲多糖样品溶液的测定取1 m L半枝莲样品溶液,经过与2.3.2相同操作,带入标准曲线,测得多糖含量。
根据表1进行正交试验,获得正交试验结果,见表2;方差分析结果,见表3。
表2 半枝莲提取正交试验
由表2的极差可知,各因素对半枝莲多糖得率影响大小顺序为A(时间)>C(料液比)>B(微波功率)。表3的方差分析表明,提取时间、微波功率和料液比均对多糖得率具有显著影响,从试验结果来看,半枝莲多糖微波提取的最佳工艺条件为A1B3C1,即:时间6 m i n,功率700 W,料液比1∶15 g/m L。
表3 半枝莲提取方差分析表
本文采用L9(33)的正交试验对半枝莲多糖的提取工艺进行了优化筛选,以多糖的含量为考察指标,用苯酚-硫酸法对半枝莲多糖进行含量测定,确定了最佳制备工艺,整个提取工艺操作简便,为半枝莲多糖的进一步开发利用,提供了理论基础和依据。
[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京:中国医药科技出版社,2010:109-110.
[2] 张秀娟,杨姗姗.半枝莲多糖体内抗肿瘤及其免疫调节作用的实验研究[J].亚太传统医药,2008,4(2):54-56.
[3] 纪耀华,纪跃芝,马爱民,等.微波法提取大黄多糖最佳工艺优化研究[J].中药材,2009,32(8):1291-1293.
Optimization of Microwave-Assisted Extraction of Polysaccharides from Scutellaria Barbata
Zhang Chunyu1,3,Zhuang Cheng2,Li u X i aoyi n3(1 H eal t h Educat i on Inst i t ut e of Changchun Ci t y,Ji l i n Changchun 130021,Chi na;2 H eal t h Supervi si on Inst i t ut e of Chaoyang H eal t h Bureau of Changchun Ci t y;3 Changchun M edi cinal Col l ege,130031)
Objective:To st udy t he opt i m al process of m i crow ave-assi st ed ext ract i on of pol ysacchari des from Scutellaria barbata.Methods:The ext ract i on rat e of pol ysacchari des from Scutellaria barbata and t he pol ysacchari de cont ent w ere used as t he i ndexes and t he ort hogonal t est w as carri ed out t o eval uat e t he m i crow ave-assi st ed ext ract i on process.Results:The condi t i ons of opt i m al m i crow ave-assi st ed ext ract i on t echnol ogy w ere as fol l ow s,t he ext ract i on t i m e w as 6 m i ns,t he m i crow ave pow er w as 700 W and t he rat i o of m at eri al t o l i qui d w as 1∶15(g/m L).Conclusion:The opt i m i zed process w as accurat e,si m pl e and rapi d,and i t can be used for t he ext ract i on of pol ysacchari des from Scutellaria barbata.
Scutellaria Barbata;Pol ysacchari des;M i crow ave Ext ract i on;Process O pt i m i zat i on
10.3969/j.i ssn.1672-5433.2015.04.008
2014-12-29)
吉林省教育厅“十一五”科学技术研究项目(〔2013〕546)
章春宇,女,副主任药师。研究方向:药品质量标准。通讯作者E-m ai l:526416900@qq.com