芷归片对复方地芬诺酯便秘模型小鼠的治疗作用研究

祝飞美 李俊龙 倪小清 詹雁 阮佳 徐超群 刘小康△

(1.四川大学华西基础医学与法医学院药理教研室，四川 成都 610041；2.四川省中医药科学院，四川 成都 610041)

芷归片对复方地芬诺酯便秘模型小鼠的治疗作用研究

祝飞美1李俊龙1倪小清1詹雁2阮佳2徐超群2刘小康1△

(1.四川大学华西基础医学与法医学院药理教研室，四川 成都 610041；2.四川省中医药科学院，四川 成都 610041)

目的：研究芷归片对复方地芬诺酯(DC)便秘模型小鼠的治疗作用。方法：昆明种小鼠雌雄各半按体重随机分为阴性对照组、模型组、阳性对照麻仁丸(6g·kg-1)组、芷归片低、中、高(1.8、3.6、7.2 g·kg-1)分别相当于生药量13.392、26.784、53.568 g·kg-1)剂量组，观察芷归片对复方地芬诺酯(DC)便秘模型小鼠小肠碳墨推进率、首次黑便排出时间和6 h排出黑便颗粒数的影响。结果：芷归片高剂量组可明显缩短小鼠首次排便时间(P<0.05)，增加6 h排便颗粒数(P<0.05)，并且能增加小肠碳墨推进率(P<0.05)。结论：芷归片能够有效的改善便秘症状，提高患者的生活质量。

芷归片；复方地芬诺酯；首次排便时间；排黑便数；小肠推进率

便秘是一种综合性临床疾病，而不是单独一种疾病，在消化内科疾病中较为常见，发病率高，各年龄段人群均会发生，其中女性对于男性，老年多于青壮年。其临床症状主要表现在排便次数减少、粪便量减少、粪便干结、排便费力等。通常以排便频率减少为主，一般每2-3天或更长时间排便一次或每周<3次即为便秘，如超过6个月即为慢性便秘[1]。便据调查显示北京、上海、广州、西安、成都、沈阳6个地区8252名60岁以上老年人的便秘发生率为11.5%，且发病率随年龄上升而增加[2]。它不仅影响患者的生理功能，还会影响患者的生活质量。由于便秘的复杂性，早期以及合理的治疗，对改善患者生活质量有显著提升。

芷归片依据中医对便秘的辨证论治，以传统方剂二灵散为基础，且辅以决明子形成新处方。处方中当归为君药，味甘、辛、微苦，香郁行散，可升可降，具有补血，活血，调经止痛，润肠通便的功效[3]。白芷为臣药，其辛，温，白芷能松弛平滑肌，其水提物、醚提物和白芷香豆素，均具有对抗乙酰胆碱，松弛家兔肠管痉挛性收缩的作用，对大便受情绪影响者疗效明显[4]。决明子所含的有效成分具有调节免疫、抑菌、抗癌、降血压、调节血脂及明目通便等作用[5]。为了验证芷归片是否具有通便功能，本研究以小鼠为试验对象，通过建立复方地芬诺酯(DC)便秘模型，观察芷归片对小鼠排便功能的影响。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 药物与试剂

芷归片(批号：20017)，由四川省中医药研究院提供。麻仁丸胶囊(批号：31105)，湖北诺得胜制药有限公司。复方地芬诺酯片(批号：20130912)，常州康普药业有限公司。墨汁的制备：阿拉伯树胶100 g，加水800 ml，煮沸至溶液透明，加入活性碳50 g煮沸三次，待溶液凉后加水定容至1000 ml，4℃保存，用前摇匀使用[6]。

1.1.2 动物

昆明种小鼠120只，体重18-22 g，雌雄各半。由成都达硕人类疾病模型动物输送中心提供，动物生产许可证号SCXK(川)2013-24。

1.2 方法

1.2.1 动物分组及给药

将60只昆明种小鼠按体重随机分成6组，分别为阴性对照组、模型组、阳性对照麻仁丸组、芷归片低、中、高剂量组(1.8、3.6、7.2 g·kg-1)，相当于生药量13.392、26.784、53.568 g·kg-1，每组10只，雌雄各半，给药量为人体临床用量对于小鼠等效剂量的5、10、20倍。阴性对照组给予10 mg·kg-1淀粉，阳性对照麻仁丸组给予6 g·kg-1麻仁丸。连续给药7 d，期间自由饮食。

1.2.2 复方地芬诺酯(DC)便秘模型的建立[7]

末次给药结束，各实验组小鼠禁食不禁水16 h，阴性对照组给予蒸馏水和淀粉的混悬液10 mg·kg-1，其余每组给予复方地芬诺酯片10 mg·kg-1灌胃。30 min后造成便秘模型。

1.2.3 芷归片对便秘小鼠排便的影响

造模30 min后，各实验组给予含相应受试物的墨汁灌胃，模型组和阴性对照组给予相应体积的墨汁灌胃，灌胃体积为0.2 ml·10g-1体重。给药后立即将小鼠单独放入干净的鼠笼内，并正常提供饲料和饮水，同时开始准确计时。观察记录每只小鼠首次排出黑便的时间，并连续观察6 h，记录6 h内小鼠排黑便粒数、干重及性状。

1.2.4 芷归片对便秘小鼠肠蠕动的影响

另取60只昆明种小鼠，按照1.2.1方法进行分组。末次给药后，各实验组小鼠禁食不禁水16 h，除阴性对照组给予10 mg·kg-1淀粉外，其余各实验组给予复方地芬诺酯片10 mg·kg-1。造模30 min后，各给药组给予含相应受试物的墨汁，模型组和阴性对照组给予相应体积墨汁，灌胃体积为0.2 ml·10g-1体重。给予墨汁25 min后，脱颈处死小鼠，打开腹腔分离肠系膜，立刻剪取上端自幽门、下端至回盲部的肠管，平铺于玻璃板上，轻轻将小肠拉成直线进行测量。肠管长度为“小肠总长度”，从幽门至墨汁前沿为“墨汁推进长度”。墨汁推进率=[墨汁推进长度(cm)/小肠总长度(cm)]×100%。

1.3 统计学处理

2 结果

2.1 芷归片对便秘小鼠排便的影响

结果显示与模型组比较，芷归片中剂量和高剂量组的首次排黑便时间均有所增加，具有统计学差异(P<0.05)，且高剂量组6 h内排黑便数也有所增加(P<0.05)。提示芷归片具有促进排便的作用。见表1。

表1 芷归片对小鼠排便的影响

注：与阴性对照组比较，△P<0.01; 与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01。

2.2 芷归复合物对便秘小鼠肠蠕动的影响

模型组与阴性对照组比较，肠推进率具有统计学差异(P<0.05)，说明便秘模型建模成功。与模型组比较，阳性对照组的肠推进率增高，差异有统计学意义(P<0.05)。实验组中、高剂量组小鼠的肠推进率较于模型组，均具有统计学差异(P<0.05和P<0.01)，且随着芷归片剂量的增加，小鼠肠推进率逐渐提高。高剂量组肠推进率与麻仁丸对照组比较，两者之间无统计学差异(P>0.05)，见表2。

表2 芷归片对便秘小鼠肠蠕动的影响±SD，n=10)

注：与阴性对照组比较，△P<0.05；与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01。

3 讨论

便秘从病因上可分为器质性和功能性两类。器质性便秘主要是有肠管器质性病变，直肠、肛门病变等引起的，功能性便秘就目前而言发病原因仍不清晰，可能与滥用药物、精神因素以及生活方式有关。目前临床上通常将慢性便秘分为4型：慢传输型便秘、排便障碍型便秘、混合型便秘和正常传输型便秘[8]。而目前对于慢性便秘的治疗主要是容积性、润滑性、渗透性以及刺激性泻剂[9]。容积性和刺激性泻剂有时会导致胃肠功能紊乱、胃动力不足。此外，泻剂的长期使用会破坏肠道内的生态环境，使肠道内水分大量丢失，还会导致肠道分泌功能不足，加重便秘。缓泻药虽然是良好的通便药，但是如果长期服用，会影响脂溶性维生素以及钙、磷的吸收，或降低神经的敏感性。目前市场上使用的通便药物大部分都含有泻药类的成分，使用不慎就有可能会对患者造成二次伤害。芷归片3味药材中白芷和决明子均属于国家公布的药食同源(既是食品又是药品的物品名单)，当归属于国家公布的可用于保健食品的中药材，价格低廉、毒副作用低，安全性好。且三者的合理配伍，不但能够有效降低药材使用量，而且能够使每味药材相互协同发挥作用。

在本次实验中，通过观察芷归片对DC模型小鼠在首次排黑便时间、6 h内排黑便数以及肠内容物推进率的影响，来判断其是否对通便存在促进作用。实验结果表明，该芷归片能显著缩短首次排黑便时间、增加6 h内排黑便数，促进肠内容物推进。在改善胃肠功能方面起着明显的润肠通便作用，在防治便秘方面有着良好的应用前景。

1 陶伊莉,周黎.老年患者便秘护理[J]. 内蒙古中医药, 2013, 32(33):135-136.

2 吴光杰,田颖刚,谢明勇,等. 车前子多糖对便秘模型小鼠通便作用的研究[J]. 食品科学, 2007, 28(10):514-516.

3 张涣,王一涛.当归与川芎药理作用研究进展与比较[J]. 时珍国医国药, 2008, 19(2):293-295.

4 王梦月,贾敏如,马逾英,等. 白芷总香豆素的药理作用研究[J]. 时珍国医国药, 2005, 16(10):954-956.

5 张加雄,万丽,胡轶娟,等. 决明子提取物泻下作用研究[J]. 时珍国医国药, 2005, 16(6):467-468.

6 吴光杰,田颖刚,谢明勇,等. 车前子多糖对便秘模型小鼠通便作用的研究[J]. 2007, 28(10):514-516.

7 李业鹏,崔生辉,江涛,等. 小鼠便秘模型的建立[J]. 中国食品卫生杂志, 2000, 12(1):1-4.

8 宋建亭,孔利霞,赵士鹏. 慢传输型便秘的病因及病理生理研究进展[J]. 疑难症杂志, 2013, 12(10):812-815.

9 柏愚,邹多武. 泻药在慢性便秘治疗中的应用[J]. 临床消化病杂志, 2007, 19(3):142-143.

Effects of zhigui tablet on mice constipation induced by compound diphenoxylate

Zhu Fei-Mei1, Li Jun-Long1, Ni Xiao-Qing1, Zhan Yan2, Ruan Jia2, Xu Chao-Qun2, Liu Xiao-Kang1△

(1.Department of Pharmacology, West China School of Preclinical and Forensic Medicine, Sichuan University,Sichuan Chengdu 610041; 2.Sichuan Academy of Chinese Medicine Sciences, Sichuan Chengdu 610041)

Objective：To study the treatment effect of zhigui tablet on constipation in compound diphenoxylate induced mice. Methods: Kunming mice with half males and half females were randomly be divided into negative control group, model group and positive control group which accepted 6 g·kg-1maren pills, and the low-dose, middle-dose, high-dose of zhigui tablet groups (1.8, 3.6, 7.2 g·kg-1) which equals to 13.392, 26.784, 53.568 g·kg-1crude drugs respectively. We observed that the time of first black stool discharge as well as the dark stool points in 6h and the pushing rate of intestine. Results: Compared with the control group, high dose of Zhigui tablet significantly decreased the time of first black stool discharge, but on the contrary, increased the intestine pushing rate(P<0.05), meanwhile increased the black stool points in 6 h(P<0.05) in the constipation model mice which induced by compound diphenoxylate. Conclusions: Zhigui tablet could offer beneficical effects to constipation and improve the life quality.

Zhigui tablet; Compound diphenoxylate tablets; Time of first black stool discharge; Black stool points; Intestine pushing rate

祝飞美，女，硕士研究生，主要从事药理学研究，Email：250123999@qq.com。

△通讯作者：刘小康，男，副教授，主要从事药理学研究，Email：liuxiaokang6@163.com。

2014-12-30)