微生物的实验室培养

王茜茹

教材分析：本课题是专题二《微生物的培养与应用》的第一个专题，承前接后，旨在介绍微生物培养的基础知识。通过本专题的学习，首先应当熟知微生物的营养需求，进而掌握培养基、消毒灭菌等有关微生物培养的基础知识和方法。在此基础上，制定并完成大肠杆菌的培养与纯化实验操作。本专题的课题2和课题3都要求分离某种特定的微生物，而分离微生物是在培养过程中实现的。因此，完成该课题的学习，是开展其他两个课题的基础。

学情分析：在本课题之前，学生已经学习了专题一《传统发酵技术的应用》，并初步了解到微生物与我们生产生活息息相关，也学习了一些微生物知识。但是，由于微生物的微小，平时生活中观察不到，或被忽略，因此在学生的脑海里微生物只是一个抽象的概念，对微生物的培养技术则更是不了解。这就需要教师在课上首先提供给学生较多的直观材料、图片，多举一些生活中常见的实例，帮助其对微生物基础知识的理解与掌握。在学生掌握了微生物相关的基础知识后，再进一步学习微生物实验室培养的知识。

教学目标：

知识与能力目标：1.掌握培养基的一般成分、种类及用途;2.能够列出实验室常用的消毒和灭菌方法并加以区分;3.能够描述培养基制作的一般步骤;4.能够说出微生物分离纯化实验的一般过程，理解平板划线法与系列稀释和涂布平板法。

过程与方法目标：1.通过学习学会在生活或实验室使用不同的消毒和灭菌方法;2.通过学习能够完成培养基的配制、倒平板、平板划线、涂布平板等具体的实际操作。

情感态度与价值观目标：1.让学生关注生活中与微生物有关的应用，并形成勇于实践、严谨求实的科学态度和科学精神;2.让学生养成良好的生活习惯。

教学重难点：

重点：无菌技术的操作

难点：无菌技术的操作、微生物的接种方法

教学策略与设计说明：（1）指导学生预习。课前学生分组进行讨论，总结自己日常生活中见过或用过哪些微生物，有何特点。在课堂中相互交流、整理，尽可能多的去认识微生物;（2）利用多媒体课件展示多种多样的微生物图片，加强学生对常见微生物的了解;（3）指导学生总结微生物的结构特点和营养需求，进一步思考如何进行微生物的培养;（4）联系制作果酒的切身经验组织学生讨论应该在哪些方面做到无菌，加深学生的印象;（5）让学生通过填表格形式快速掌握消毒和灭菌的方法;（6）观看制备牛肉膏蛋白胨培养基的操作步骤的视频，让学生身临其境体验制备培养基的过程，能够精准的解决实验中问题;（7）观看视频稀释涂布平板法，让学生直观学习这种方法;（8）指导学生阅读课本内容，学会微生物的培养与分离，归纳实验中的注意事项，注重培养学生的逻辑思维。

教学过程：

第一阶段：创设问题情境，导入新课。《传统发酵技术的应用》使我们初步了解到微生物与我们生产生活息息相关，那什么是微生物？它有什么特点？什么是菌落？让学生展开讨论，展示相关图片。

第二阶段：培养基和无菌操作。培养微生物要使用培养基，总结培养基概念。通过展示图片以及老师举例讲解归纳培养基的类型及其应用。

（一）培养基的概念、类型和用途以及一般营养成分

培养微生物要满足它的哪些要求？通过分析牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成的表格，讨论培养基的必需（一般）营养成分，并明确各成分功能。

通过举例，引导学生思考并得出结论培养基还需满足微生物生长的pH、特殊营养物质和氧气等要求。

（二）无菌技术（创设情境，教师启发引导学生总结）

获得纯净培养物的关键是防止杂菌的感染，联系制作果酒的实验操作过程组织学生讨论应该在哪些方面做到无菌？

第三阶段：实验操作

（一）制备牛肉膏蛋白胨培养基（创设真实情境，学生自主学习探索。）

大肠杆菌的纯化培养采用牛肉膏蛋白胨培养基，回忆它的具体成分以及各组分作用。

学生观看制备牛肉膏蛋白胨培养基的操作步骤的视频，回答教材“讨论”：用什么办法来估计培养基的温度？锥形瓶的瓶口通过火焰的目的是什么？平板冷凝后，为什么要将平板倒置？若皿盖和皿底之间粘有培养基，则该平板能否培养微生物？为什么？

（二）纯化大肠杆菌（创设真实情境，学生自主学习探索。）

纯化大肠杆菌常用平板划线法和稀释涂布平板法。通过阅读教材，让学生掌握平板划线法的概念，同时思考讨论：为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？

观看视频学习稀释涂布平板法，強调稀释操作和涂布平板的操作，并让学生回答问题：涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行，结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何进行无菌操作？

将接种后的培养基和一个未接种的培养基，放入37℃恒温箱中培养12h～24h后，观察并记录。

第四阶段：结果与评价和课题延伸

从培养基的制作是否合格，接种操作是否符合无菌要求，是否进行了及时细致的观察与记录等方面分析实验结果。

阅读教材，了解临时保藏和长期保存两种保存菌种的方法。

教学反思：

从整体上看，本节课基本上达到了新课程标准要求的预期目标。特别是教师对教材的充分挖掘和调整，是符合本班学生实际的。教材处理的比较合理，如本课题要培养微生物那首先得弄明白什么是微生物，有了一个全面了解后才能进行微生物的培养。本节课实验操作内容，现实条件无法全部完成，单纯让学生看书又达不到效果，所以有些实验操作以视频的形式呈现，帮助学生直观学习，提高了课堂学习效率。给学生阅读分析教材的时间，自主完成学案，争取发挥学案的最大作用。而对于有些难度、需要点拨的，师生共同分析。但对本节课倒平板、平板划线等实验操作的理解出现了一些问题，因为没有操作经验，学生回答起来稍微有些吃力。整体来看基本完成了教学目标。