龙城和迪法克鹌鹑血清尿酸生理值范围探讨

王雨，林志健，张冰，聂安政，周月，朱春胜，牛红娟，王雪洁

（北京中医药大学中药学院，北京 100029)

研究报告

龙城和迪法克鹌鹑血清尿酸生理值范围探讨

王雨，林志健，张冰*，聂安政，周月，朱春胜，牛红娟，王雪洁

（北京中医药大学中药学院，北京 100029)

目的探讨不同品系、性别鹌鹑血清尿酸值生理值范围。方法收集本实验室前期11批不同品系、性别鹌鹑的血清尿酸值，动态观察其血清尿酸的含量变化，利用医学参考值的方法对收集到数据进行统计分析。结果雄性迪法克鹌鹑血清尿酸的平均值为（221.06±79.59)μmol/L，血清尿酸水平参考值范围为（87.32～382.34)μmol/L；雌性迪法克鹌鹑血清尿酸的平均值为（189.85±68.58)μmol/L，血清尿酸水平参考值范围为（72.72～369.73)μmol/L；雄性龙城鹌鹑血清尿酸的平均值为（217.22±72.91)μmol/L，血清尿酸水平参考值范围为（82.92～360.24)μmol/L，雌性龙城鹌鹑血清尿酸的平均值为（197.27±66.84)μmol/L，血清尿酸水平参考值范围为（95.36～348.73)μmol/L。通过对不同品系雄雌鹌鹑血清尿酸值的比较，发现雌性鹌鹑的血清尿酸值均低于雄性鹌鹑，差异有显著性（P＜0.01)；通过对不同品系雌雄鹌鹑各日龄组的比较，发现不同品系雌雄鹌鹑各日龄组间的血清尿酸值差异无显著性。结论明确了不同品系、性别鹌鹑血清尿酸水平变化范围。

鹌鹑；尿酸；生理值

尿酸作为一种还原性物质参与人体内的氧化还原过程，正常范围内的尿酸具有抗氧化、抗DNA损伤等生理功能，一旦超出其正常范围可能导致高尿酸血症，特别是近年来，随着现代生活水平的不断提高，人们生活习惯、饮食结构的改变，糖、脂、蛋白质的大量摄入，高尿酸血症的患病率不断升高，并有年轻化的趋势[1］，有研究显示高尿酸血症与肥胖、高血压、高脂血症、冠状动脉粥样硬化性心脏病、胰岛素抵抗的发生密切相关，已成为识别代谢综合征的早期标志[2］。因此，为了对高尿酸血症进行进一步研究，一个合理稳定的动物模型及模型动物尿酸指标参考值的建立至关重要。近五十多年来，鹌鹑作为新型实验模型被用于各疾病领域，因其与人类相似的嘌呤核苷酸代谢途径，有报道将鹌鹑作为塑造高尿酸血症首选动物模型[3、4］。然而，目前国内外对于鹌鹑尿酸生理值范围鲜有报道，本文主要报道不同品系、性别鹌鹑的血清尿酸值，并对数据进行比较分析得出其参考值范围，以期为实验研究提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物

迪法克鹌鹑、龙城鹌鹑共11批，其中雄性迪法克鹌鹑42只，雌性迪法克鹌鹑22只；雄性龙城鹌鹑73只，雌性龙城鹌鹑43只，均为6～14周龄，均购自北京种禽公司德岭鹌鹑厂。收集本实验室前期测得的这11批6～14周龄不同品系、性别鹌鹑的血清尿酸值共1160例，各值均源于实验对照组数据，其中雄性迪法克鹌鹑287例，雌性迪法克鹌鹑180例，雄性龙城鹌鹑408例，雌性龙城鹌鹑285例。

1.1.2 检测试剂盒与仪器

Sunrise酶标仪，瑞士Teacan公司；尿酸检测试剂盒（尿酸酶比色法)，批号:141181，均购自中生北控生物科技股份有限公司。

1.2 饲养环境条件

各批实验均于北京中医药大学动物室进行，自由摄食，实验室温（24±1)℃，湿度40% ～70%，鹌鹑育成料由北京种禽公司德岭鹌鹑厂提供，配方:玉米52%，豆粕25%，骨粉与微量元素各6%，石粉5%，棉籽壳和麸皮各3%。

1.3 方法

1.3.1 血液采集方法

实验动物均禁食不禁水12 h，颈静脉取血，3000 r/min离心10 min，分离血清后进行生化指标检验。

1.3.2 统计方法

数据在SAS 9.2软件中统计，所有数据经正态分布和方差齐性检验，符合正态分布且方差齐的使用医学参考值法，不符合正态分布或不满足方差齐性检验使用百分位数法[16］，以此确定正常值范围。两组数据的比较根据各组正态及方差齐与否选择双尾t检验或是非参数检验，P＜0.05具有统计学意义。多组数据比较根据各组正态及方差齐与否选择ANOVA分析或非参数检验，P＜0.05具有统计学意义。

2 结果

2.1 两品系雌雄鹌鹑不同日龄体重统计结果

据表1可见，两品系雌雄鹌鹑体重呈持续稳定增长，相同日龄下龙城雌雄鹌鹑体重均低于迪法克雌雄鹌鹑。

2.2 同一品系雌雄鹌鹑血清尿酸值结果分析

结果显示，雌性龙城鹌鹑的血清尿酸值低于雄性龙城鹌鹑，差异有显著性（P＜0.01)。雌性迪法克鹌鹑的血清尿酸值低于雄性迪法克鹌鹑，差异有显著性（P＜0.01)。同时，雄性龙城鹌鹑和雄性迪法克鹌鹑血清尿酸值差异无显著性（P＞0.05)，雌性龙城鹌鹑和雌性迪法克鹌鹑血清尿酸值差异无显著性（P＞0.05)。见表2。

表1 两品系雌雄鹌鹑不同日龄体重统计结果（±s，g)Tab.1 The body weight ofmale and female quails on different days

表1 两品系雌雄鹌鹑不同日龄体重统计结果（±s，g)Tab.1 The body weight ofmale and female quails on different days

注:相同日龄同性别不同品系比较*P＜0.05，**P＜0.01。Note.Comparison between different strains of the same day-age and gender，*P＜0.05，**P＜0.01.

日龄 ♂♀Age（days)龙城Longcheng 42 148.99±9.84 131.99±8.87**157.4±20.11 137.86±10.71 49 152.62±11.5 132.88±9.13**174.59±23.37 149.25±14.05 56 165.26±13.59 142.52±10.5**195.38±20.67 172.25±17.57 63 173.24±20.64 144.50±9.94**212.04±18.35 186.81±15.03 70 169.34±10.87 144.26±10**209.17±20.64 190.72±15.62 77 171.49±11.18 145.61±9.76**214.89±19.69 192.1±16.38 84 174.99±11.94 147.02±10**217.2±19.75 190.13±14.21 91 172.51±12.25 145.80±10.26**213.82±20.07 188.61±15.52迪法克Difake龙城Longcheng迪法克Difake

2.4 两品系雌雄鹌鹑不同日龄组血清尿酸统计分析

由表3可见经ANOVA分析或非参数检验，迪法克雌雄鹌鹑和龙城雌雄鹌鹑各日龄组间血清尿酸值差异均无显著性（P＞0.05)。

表2 两品系雌雄鹌鹑血清尿酸统计结果（±s，μmol/L)Tab.2 The serum uric acid inmale and female quails

表2 两品系雌雄鹌鹑血清尿酸统计结果（±s，μmol/L)Tab.2 The serum uric acid inmale and female quails

注:雌雄性别比较*P＜0.05**P＜0.01。Note.Comparison betweenmale and female quails，*P＜0.05**P＜0.01.

品系Strains参考范围Reference range龙城Longcheng 雄性 217.22±72.91 82.92～360.24雌性 197.27±66.84**95.36～348.73迪法克Difake 雄性 221.06±79.59 87.32～382.34雌性 189.85±68.58**72.72～369.73性别Genders尿酸Uric acid

表3 两品系雌雄鹌鹑不同日龄组血清尿酸统计结果（±s，μmol/L)Tab.3 The serum uric acid in male and female quails in the age of different days

表3 两品系雌雄鹌鹑不同日龄组血清尿酸统计结果（±s，μmol/L)Tab.3 The serum uric acid in male and female quails in the age of different days

日龄 ♂♀Age（days)龙城Longcheng 42 259.15±93.65 213.32±77.16 184.11±64.83 193.10±64.60 49 237.08±103.39 221.70±79.52 199.45±67.94 220.21±86.87 56 217.20±82.37 204.04±68.92 210.13±80.90 189.55±61.83 63 214.67±76.32 206.13±70.41 224.21±81.49 209.06±70.65 70 220.33±64.60 225.19±70.34 184.95±70.97 184.58±58.97 77 198.66±67.43 215.73±71.83 172.46±67.25 205.48±65.49 84 203.51±81.11 243.89±80.34 156.36±46.39 196.43±57.90 91 198.34±52.08 220.90±55.15 177.45±69.82 170.02±44.82迪法克Difake龙城Longcheng迪法克Difake

3 讨论

高尿酸血症动物模型主要有大鼠、小鼠及禽类动物如鸡和鹌鹑，不同动物造模各有特点。啮齿类动物大鼠、小鼠广泛用于高尿酸血症动物模型，但其体内含有尿酸酶，尿酸酶可将尿酸转化为更易溶于水的尿囊素排出体外，这与人类的代谢途径相差较大，造模较困难，并且模型维持时间较短。自1992年即有研究者利用基因工程技术破坏尿酸酶基因，获得尿酸酶缺乏的突变小鼠，虽然尿酸水平极显著升高，但价格昂贵，操作复杂，对肾脏损伤严重，死亡率高。亦有注射外源性尿酸的相关造模报道，均维持时间较短。禽类动物体内不含尿酸酶，与人类的嘌呤核苷酸代谢途径相似度较高，大部分以尿酸的形式从尿中排出，仅有很少一部分（约为1/20)被分解为尿囊素、氨等，故可将禽类动物应用于高尿酸血症模型的建立[5］。鹌鹑，属鸟纲（Aves)，鸡形目（Callformes)，雉科（Phasianidae)，鹑（Coturnix)，其学名为Coturnix japonica，是鸡形目中较小的一种家禽，结合饲养以及实验操作的可行性可作为高尿酸血症较理想的动物模型。在实验研究中，对血液生化指标进行评价时，不仅需要与空白对照组的数据进行比较，还需与其正常参考值进行比较，才能更好地进行判断，临床上对不同人群的血液生化指标进行了研究并给出了正常值的参考范围，对于常用实验动物大小鼠亦有血液生化指标参考值的报道。陈奇等[6］对啮齿类实验动物大小鼠的血尿酸值进行了研究，给出了大鼠血尿酸参考值范围为15～21 mg/dL，小鼠血尿酸参考值范围为17～28 mg/dL，而对于禽类动物的血尿酸值参考范围鲜有报道，迄今只有两篇文献对鹌鹑的血尿酸的测定进行了研究[7、8］，因此，鹌鹑血尿酸正常参考值的探讨对于高尿酸血症的研究具有十分重要的意义。

本实验室前期对鹌鹑的饲养环境与条件给出了规范标准，室温为（24±1)℃，湿度为40% ～70%，每天给予12 h的光照，饲料均为北京种禽公司德岭鹌鹑厂提供的鹌鹑育成料，从而保证实验鹌鹑稳定的正常生活状态。本实验室前期亦对不同造模剂及其不同剂量诱导鹌鹑高尿酸血症进行了系统的观察，发现15 g/（kg·d)酵母食饵诱导的鹌鹑高尿酸血症模型具有血尿酸异常出现时间较早，模型稳定、重复性好，实验操作方便，肝肾功能无明显损害、与人类饮食结构改变相类似等特点，可以作为尿酸紊乱的较理想的实验对象[9-11］。目前常用于实验动物的鹌鹑的品系有朝鲜龙城鹌鹑及法国迪法克鹌鹑，本实验室亦对不同品系、不同性别的鹌鹑及其造模特征进行了大量的研究，发现雄性迪法克鹌鹑在喂饲15 g/（kg·d)酵母食饵7 d后其血清尿酸水平显著升高，并可持续升高至第32天[12］，雌性迪法克鹌鹑在喂饲15 g/（kg·d)酵母食饵7 d后其血清尿酸水平显著升高，并可持续升高至第28天[13］。

流行病学研究显示成年男性的血尿酸水平显著高于闭经前女性的血尿酸水平[14］，这与本研究结果中雄性迪法克鹌鹑血尿酸值显著高于雌性迪法克鹌鹑相似，Hosoyamada等[15］研究证实雌激素可通过调节尿酸转运蛋白促进尿酸排泄，故本研究结果可能与雌激素存在一定关系，其具体机理需要进一步探讨。本研究结果亦显示两种品系雌雄鹌鹑不同日龄组间的血清尿酸值差异无显著性，且各组血清尿酸值波动较稳定，这亦提示鹌鹑可作为高尿酸血症合理稳定的动物模型。本文初步建立不同品系、性别鹌鹑的尿酸参考值范围，可为鹌鹑应用于实验动物提供一定的参考，丰富其生物信息库，从而满足临床医学和药理研究的需要。

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Normal range of serum uric acid in quails of different strains and genders

WANG Yu，LIN Zhi-jian，ZHANG Bing*，NIE An-zheng，ZHOU Yue，ZHU Chun-sheng，NIU Hong-juan，WANG Xue-jie
（Beijing University of Chinese Medicine，Beijing 100029，China)

ObjectiveTo explore the normal range of serum uric acid in quails.M ethodThe data were collected from male and female quails of different strains in 11 experiments，and analyzed by the way ofmedical reference value.ResultThemean value of serum uric acid ofmale Difake strain quails was（221.06±79.59)μmol/L，and the normal range was（87.32 to 382.34)μmol/L.Themean value of serum uric acid of female Difake strain quails was（189.85± 68.58)μmol/L，and the normal range was（72.72 to 369.73)μmol/L.The mean value of serum uric acid of male Longcheng strain quailswas（217.22±72.91)μmol/L，and the normal range was（82.92 to 360.24)μmol/L.Themean value of serum uric acid of female Longcheng strain quails was（197.27±66.84)μmol/L，and the normal range was（95.36 to 348.73)μmol/L.The serum uric acid value of female quails was significantly lower than that ofmale quails. There was no significant difference in the value of serum uric acid between female and male quails from each day-age groups.ConclusionsThis study has established the normal ranges for serum uric acid in quails of different strains and genders.

Quail；Uric acid；Normal range

Q95-33

A

1005-4847（2015)06-0582-04

10.3969/j.issn.1005-4847.2015.06.007

2015-09-16

国家自然科学基金资助课题（81403152)；教育部高等学校博士学科点专项科研基金（20130013120001，20120013130002)；北京中医药大学青年教师专项自主课题（2013-QNJSZX008)；北京中医药大学科研创新团队（2011-CXTD-014)。

王雨（1991-)，女，硕士研究生，研究方向:中药防治代谢性疾病研究，E-mail:wangyuxh@163.com。

张冰（1959-)，女，教授/主任医师，博士生导师，研究方向:中药防治代谢性疾病研究，E-mail:zhangbing6@263.net。