晁鹏丽,姚艺辉,余晓露
(厦门大学附属中山医院,福建 厦门 361004)
肠球菌是人、动物肠道的正常菌群、异位寄生可致尿路感染、呼吸道感染、伤口感染、心内膜炎、脑膜炎和败血症等。近20年来,肠球菌已成为院内感染的重要病原菌之一,由于其对很多抗菌药物固有耐药和获得性耐药,致使肠球菌感染在治疗时选择药物的范围比较窄,因此对肠球菌进行监测,及时公布有关肠球菌感染及耐药性变化的资料,对指导临床治疗具有十分重要的意义。本文对我院临床分离鉴定的175株肠球菌进行分析,其中以屎肠球菌和粪肠球菌感染为主,并对屎肠球菌和粪肠球菌的药敏结果进行回顾性分析,现报告如下。
1.1 菌株来源 收集于2013年8月1日至2014年7月31日临床分离的175株肠球菌,其中屎肠球菌95株和粪肠球菌56株。标本类型包括血液、尿液、痰液、伤口分泌物、引流液、胆汁、眼内容物等。药敏质控菌株:金黄色葡萄球菌(ATCC25913)购自卫生部临检中心、屎肠球菌(ATCC51299)及粪肠球菌(ATCC29212)由杭州天和试剂微生物有限公司提供。
1.2 仪器与试剂 革兰阳性菌鉴定卡、GPS药敏卡和VITEK-32全自动微生物分析系统(法国生物梅里埃公司);氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、呋喃妥因、红霉素、四环素、左旋氧氟沙星、亚胺培南、万古霉素、替考拉宁、青霉素G、莫西沙星、奎奴普丁/达福普汀、环丙沙星药敏纸片(北京天坛生物制药检定所);培养基 (郑州安图生物工程股份有限公司)。
1.3 菌株的鉴定及药敏试验 菌株鉴定按《全国临床检验操作规程》(第3版)[1]进行分离、培养,根据菌落的形态、革兰染色特点,采用VITEK 32全自动微生物分析系统和革兰阳性菌鉴定卡鉴定细菌,用K-B纸片扩散法进行药敏试验,按CLIS[2]标准判断药敏试验结果。
1.4 统计学方法 采用耐药分析软件WHONET5.5软件对药敏结果进行统计分析;率的比较采用SPSS13.0软件进行χ2检验统计分析,P<0.05表示差异有统计学意义。
2.1 肠球菌菌株检出及分布情况 共分离175株肠球菌属,其中屎肠球菌95株、粪肠球菌56株。屎肠球菌和粪肠球菌的标本来源以尿液、引流液和伤口分泌物为主,见表1。
表1 肠球菌属临床标本分布构成情况(%)
2.2 耐药性分析 95株屎肠球菌和56株粪肠球菌对15种抗菌药物表现出不同度的耐药,其中屎肠球菌和粪肠球菌对红霉素的耐药率较高(≥76.9%),对呋喃妥因、万古霉素、替考拉宁的耐药率较低(≤23.4%)。屎肠球菌对氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、亚胺培南、青霉素G、环丙沙星耐药率较高(≥80%),而粪肠球菌对环丙沙星相应耐药率较低(≤37.3)。屎肠球菌总体耐药率较高,对亚胺培南、氨苄西林/舒巴坦、氨苄西林、环丙沙星、青霉素G及呋喃妥因的耐药率明显高于粪肠球菌,差异具有统计学意义 (P<0.05);对红霉素、万古霉素和替考拉宁的耐药率,二者差异无统计学意义(P>0.05),见表2。
表2 95株屎肠球菌和56株粪肠球菌对15种抗菌药物的耐药率比较(%)
肠球菌是条件致病菌,多见于免疫功能低下或重症者,其中屎肠球菌和粪肠球菌与人的疾病最密切。调查结果显示,本地区临床分离肠球菌属屎肠球菌略高于粪肠球菌,与国内报道[3,4]类似。从临床样本的分布结果看,屎肠球菌和粪肠球菌均以尿液、胆汁、引流液、伤口分泌物为主。
本结果中粪肠球菌、屎肠球菌总耐药率在60.0%~90.0%的抗菌药物红霉素,在30.0%~60.0%的抗菌药物有四环素、莫西沙星、环丙沙星,耐药率<30.0%的抗菌药物有呋喃妥因、替考拉宁、万古霉素。肠球菌属总体耐药率较高的原因,主要是由于肠球菌属对多种抗菌药物具有天然和获得性耐药的特性。该菌属一方面可通过产生小分子量低亲和力的青霉素结合蛋白(PBPs),另一方面还可通过质粒介导产生β-内酰胺酶、腺嘌呤转移酶等机制从而对青霉素、庆大霉素耐药。当前β-内酰胺类抗菌药物的大量应用所产生的选择性压力也是导致肠球菌属耐药的另一重要原因[5]。
本结果显示,屎肠球菌和粪肠球菌的耐药性存在明显差异,屎肠球菌的耐药率比粪肠球菌严峻,提示在临床治疗肠球菌感染时,应根据菌种的不同来选择抗菌药物,以便更有效的控制感染。屎肠球菌和粪肠球菌对呋喃妥因、万古霉素、替考拉宁敏感率较高,尤其是粪肠球菌在本次调查中未发现耐药菌株。屎肠球菌对万古霉素的耐药率为2.2%,尽管本结果中未发现对万古霉素耐药的粪肠球菌,但单绿虎等曾有报道[6]。据报道万古霉素耐药肠球菌也会对青霉素G、呋喃妥因、氨苄西林等常用抗菌药的耐药性增强[7],给临床治疗选药带来困难。调查结果还显示屎肠球菌对氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、呋喃妥因、左旋氧氟沙星、亚胺培南、青霉素G、莫西沙星、环丙沙星的耐药率不同程度高于粪肠球菌,只有四环素和奎奴普丁/达福普汀相反,耐药情况与杨青等的报道[8]不尽相同。为延缓耐万古霉素葡萄球菌和肠球菌属的出现和增长速度,临床应限用万古霉素。替考拉宁对肠球菌属的作用良好,对耐万古霉素的Van B、Van C、Van D肠球菌属仍敏感,必要时可作为万古霉素的替代药。
对耐万古霉素肠球菌的感染,目前尚无理想的治疗方法[9,10],因此,为延缓耐万古霉素肠球菌属的出现和增长速度,临床应限用万古霉素,并严防院内感染[11]。
[1]叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程[M].第3版.南京:东南大学出版社,2006:770-774.
[2]CLSI M100-S22.Performance standards for antimicrobial susceptibility testing,twenty-second informational supplement[S].Clinical and Laboratory Standards Institute,2012.
[3]廖国林,刘建,李芳,等.肠球菌属医院感染分布及耐药性分析[J].中华医院感染杂志,2009,19(13):1735-1736.
[4]马瑜珊,张任飞,潘淑,等.230株肠球菌的临床分布及耐药性分析[J].实验与检验医学,2014,32(2):193-200.
[5]路晓钦,黎莉华,周丽,等.医院肠球菌属分布特征及耐药性变迁[J].中华医院感染学杂志,2007,17(12):1569-1572.
[6]单绿虎,毛彩萍,徐笑红.粪肠球菌的药敏分析[J].实验与检验医学,2010,28(3):235-236.
[7]Cetinkaya Y,Falk P,Mayhall CG.Vancomycin-resistant enterococci[J].Clin Microbiol Rev,2000,13(4):686-707.
[8]杨青,俞云松,倪语星,等.2007年中国CHINET肠球菌属耐药性监测[J].中国感染与化疗杂志,2009,9(3):175-179.
[9]Joels CS,Matthews BD,Sigmon LB,et al.Clinical characteristics and out comes of surgical patients with vancomycin-resistant enter ococcal infections[J].Am Surgeon,2003,S9(6):514-519.
[10]潘素新,孟爱然.肠球菌属医院感染调查分析[J].中华医院感染学杂志,2008,18(2):259-261.
[11]Richards MJ,Edwards JR,Culver DH,et al.Nosocomial infections in combined medical surgical intensive care units in the U-nited States[J].Infect Control Hosp Epidemiol,2000,21(8):510-515.