无偿献血者TP-ELISA检测不合格标本分析

陈红

(九江市中心血站，江西 九 江332000)

梅毒是由梅毒螺旋体 (Treponema pallidum，TP)感染人体所引起的一种系统性、可累及人体多脏器，严重危害患者身心健康的疾病。近年来，在全球范围内发病率逐年提高，且有不断蔓延的趋势，尤其在东南亚等发展中国家发病率更高[1]。我国梅毒发病率也不断增高，已居乙类法定传染病的第三位[2，3]，全国平均每年以52.7%的增长率增长[4]。梅毒传播除了性接触外，非性接触间传播也占有重要的地位[5]。输血是梅毒传播的途径之一，保证血液安全是我们血站工作人员的职责。献血者梅毒检测重要原因之一就是作为HIV的替代检测指标防范HIV的窗口期感染[6]。为了解梅毒试剂的使用情况，我们对本站2005年7月-2014年5月献者血TP-ELISA检测不合格的标本用TP-PA试验进行确认，回顾性分析检测情况，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 标本来源 2005年7月-2014年5月九江地区无偿献血者，体检合格后采血，同时留取5±1ml样本在2~8℃冰箱保存，1600g离心 20min，48h内完成TP-ELISA检测，检测阳性标本共计1802份。

1.2 试剂与仪器 TP-ELISA检测试剂盒由英科新创科技有限公司和北京万泰生物药业股份有限公司提供，均通过中国药品生物制品检定所批批检合格；TP-PA检测试剂盒由日本富士瑞必欧株式会社提供，所有试剂均在有效期内使用；ELISA检测仪器用瑞士HAMILTON全自动加样仪STAR和全自动酶免仪FAME完成，在校验期内使用。

1.3 检测方法 用2种TP-ELISA试剂进行检测，每次检测严格按试剂说明书操作，阴阳性对照成立，室内质控在控。任何1种试剂S/CO值≥1.0为反应性,0.85≤S/CO值<1.0为灰区，任一种试剂检测为反应性或灰区的，则重取血袋导管血双试剂双孔平行复试，复试后任1种试剂任1孔呈反应性或灰区的，判为阳性；吸取TP-ELISA检测阳性标本1.5~2ml，于-20℃冰箱保存，每月集中用TPPA检测试剂进行确证，严格按照试剂说明书要求操作和判定结果。

1.4 统计学分析 应用SPSS17.0软件对数据进行统计学的分析，组间率的比较采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

见表1~3。

表1 2种ELISA试剂检测结果

表2 2种TP-ELISA试剂检测不合格标本S/CO值分布

表3 TP-PA试剂确认结果

3 讨论

《血站技术操作规程》(2012版)明确规定：献血者梅毒检测应采用2种不同生产厂家的ELISA试剂检测梅毒特异性抗体[7]。TP-ELISA具有试剂价格便宜，操作简单，敏感性和特异性较高，稳定性好，可自动化进行检测和结果分析等诸多优点[8-12]，但由于其方法学的原因，不可避免地导致TPELISA检测存在一定程度的假阳性和漏检的风险。从我们的试验数据分析可以看出，1802份TPELISA检测阳性的标本，2种试剂均阳性的，TP-PA确证阳性率高达97.78%(1496/1530)，特别是S/CO值≥3.0的(A试剂98.9%，B试剂98.2%)，与其他文献报道的95.38%(165/173)和96.22%(356/370)一致[13,14]；单试剂阳性的，TP-PA确证阳性率为25.69%(56/218)，与TP-PA吻合率低，但较其他文献报道的12.28%(7/57)高[13]，提示单试剂检测梅毒存在漏检的风险；灰区标本有42.59%(23/54)确认试验为阳性或可疑，说明灰区的设置是有必要的，可以最大限度地保证血液安全，但灰区的设置范围有待进一步探讨，以减少血液资源的不必要浪费。表1、表2的数据显示，2种试剂检测结果无统计学差异，但表1~3的数据同时也显示TP-ELISA检测单试剂或低值阳性的标本存在较高的假阳性。大多数献血者都是带着一颗爱心来献血，而且他们都比较关注自身的健康状况，血站告知献血结果不合格，剥夺了献血者再次献血的权力的同时，给献血者造成很大的精神压力。我们曾追踪11位献血者，TP-ELISA检测单试剂阳性，TP-PA检测为阴性，间隔半年以后再次抽血体检，TPELISA检测双试剂阴性，TP-PA检测仍为阴性，这说明前次的TP-ELISA检测为假阳性。造成假阳性的原因一方面可能是试剂批批之间灵敏度和特异性有差异，另一方面也可能是当时献血者体内存在某种与梅毒抗体相似的物质，造成试验假阳性。这些献血者的淘汰造成了血液资源的浪费。梅毒螺旋体抗体具有保护性，尽早治疗，可以使其体内获得高含量的抗体，可增强对梅毒螺旋体的清除能力[15]。所以笔者认为血站在2次TP-ELISA检测的基础上应加做梅毒的TP-PA确证试验，在告知献血者检测结果时应有所区别：确证试验阳性的在淘汰血液的同时淘汰献血者，同时尽快告知献血者检测结果，建议到医院检查，争取治疗的时间；确证试验阴性的，仅淘汰血液而不淘汰献血者，建立暂时屏蔽机制，建议献血者间隔一段时间后再次体检，并做好解释工作以减轻献血者的压力，最大限度地保留献血者。

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