藿香正气双相胶囊质量标准研究

★ 张小红 钱星文 杨世林 (1.广东省食品药品职业技术学校 广州51066;.东方药林药业有限公司 广州51066;.中药固体制剂制造技术国家工程研究中心 南昌0006)

藿香正气双相胶囊是由部颁标准第十一册中的藿香正气胶囊改进而来，由广藿香、紫苏叶、半夏、厚朴(姜制)等组成。本方具有散风寒、畅气机、和脾胃之功效，临床用于胃肠型感冒，急性胃肠炎、中暑、呕吐、急慢性肾炎、霍乱吐泻，水土不服，小儿食伤等。本工艺将富含挥发油成分的广藿香、紫苏叶等药材，提取挥发油制成软胶囊，其他提取部分制成微丸，同装于硬胶囊中。因制剂中含有液态和固态二部分，所以制剂名称定为藿香正气双相胶囊。它可以有效地保存处方中的挥发性成分，使制剂稳定、安全、有效。本文对藿香正气双相胶囊进行质量标准进行研究，为保证藿香正气双相胶囊的质量进行控制，保障药品的安全稳定。

1 材料

METTLERAE 2400电子天平(瑞士);超声波清洗器(上海必能信超声有限公司);GMAG型薄层扫描仪(导津);Agilent 1100高效液相色谱仪(美国安捷伦)。

藿香正气双相胶囊及阴性对照胶囊(批号:20040301、20040302、20040303，江西本草天工科技有限责任公司);广藿香油对照品(鉴别用，批号:0832-9902)、紫苏对照药材(批号:120914-200307)、和厚朴酚对照品(含测用，批号:0730-9204)、厚朴酚对照品(含测用，批号:110729-200309)，均由中国药品生物制品检定所提供;硅胶G板、GF254板(层析用，青岛海洋化工厂);乙腈、甲醇为色谱纯，其余试剂为分析纯。

2 方法与结果

2.1 薄层鉴别

2.1.1 广藿香 取本品软胶囊25粒，置250mL圆底烧瓶中，加水50mL，连接挥发油测定器，自测定器上端加水至刻度，再加石油醚(60℃～90℃)0.5mL，连接回流冷凝管，加热至沸，并保持微沸45min，放冷，分取石油醚层，定容至0.5mL，作为供试品溶液。取缺广藿香药材处方制备的阴性样品25粒，按供试品溶液的制备方法制备阴性对照溶液。取广藿香油对照品适量，加石油醚(60℃～90℃)溶解制成每1mL含20μL的对照品溶液。

吸取上述制备的供试品溶液、阴性溶液及对照品溶液各3μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚-醋酸乙酯-冰醋酸(98∶5∶0.2)为展开剂，展开，而后取出，晾干，喷以5%三氯化铁乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰。结果在薄层色谱图中，供试品在与对照品色谱相应的位置上，具有相同颜色的斑点，而阴性无干扰。

2.1.2 紫苏叶 取本品中软胶囊50粒，置250mL圆底烧瓶中，加水50mL，连接挥发油测定器，自测定器上端加水至刻度，再加石油醚(60℃～90℃)0.5 mL，连接回流冷凝管，加热至沸，并保持微沸45min，放冷，分取石油醚层，定容至0.5mL，作为供试品溶液。取缺紫苏叶处方制备的阴性对照样品25粒，按上述样品制备方法制备阴性对照溶液。另取紫苏叶对照药材0.7g，按紫苏叶供试品溶液的制备方法进行制备，得紫苏叶对照药材溶液。

吸取上述供试品溶液、阴性对照溶液和紫苏油对照药材溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚-醋酸乙酯(19∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，展距15cm，喷以2，4-二硝基苯肼试液。结果显示在供试品溶液色谱带上，在与对照药材图谱相应位置上，具有相同颜色的斑点，而阴性无显示。

2.2 厚朴酚与和厚朴酚的含量测定

2.2.1 色谱条件 高效液相色谱仪(Agilent 1100型，DAD检测器)，色谱柱为Hypersil ODS-C18柱(250mm×4.6mm，5μm);流动相:甲醇:水(65:35);流速:1.0mL/min;柱温:25℃;检测波长:294nm。

2.2.2 供试品溶液的制备 取25粒藿香正气双相胶囊，取内容物微丸适量，研细，精密称定1.0g，倒入锥形瓶中，精密吸取50mL甲醇加入，称定重量，超声处理30min，冷却，再称定重量，加甲醇补足减失的重量，摇匀，离心，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，取续滤液，即得。

2.2.3 对照品溶液的制备 精密称取厚朴酚、和厚朴酚对照品适量，置于容量瓶中，加甲醇制成每1mL含厚朴酚0.208mg、和厚朴酚0.112mg的对照品溶液，摇匀，即得。

2.2.4 阴性对照溶液的制备 取缺厚朴药材的处方，按照制备工艺制备阴性成品，按供试品溶液的制备方法制得阴性对照溶液。按HPLC方法中确定的色谱条件进行测定，结果阴性对照未见干扰。供试品色谱与对照品色谱相应的保留时间位置上，有相应的色谱峰，表明厚朴酚、和厚朴酚的峰与其它峰能较好的分离，见图1-3。

图1 对照品溶液

图2 样品溶液

图3 阴性溶液

2.2.5 线性关系考察 精密吸取上述制备的厚朴酚与和厚朴酚混合对照品溶液1，2，3，4，5，6，7μL进行进样，厚朴酚与和厚朴酚的进样量为横坐标，以峰面积为纵坐标，进行线性回归，制备标准曲线。结果厚朴酚对照品在0.208～1.456μg范围内线性关系良好，回归方程Y=1 619.2X+1.94(r=0.999 8);和厚朴酚对照品在0.112～0.784μg范围内线性关系良好，回归方程Y=1 555.3X+9.16(r=0.999 9)。

2.2.6 重复性试验 取同一批号的藿香正气双相胶囊(批号:20040301)微丸适量，研细，取1.0g，精密称定，共六份，按供试品溶液的制备方法进行操作，并按色谱条件进行含量测定，经计算厚朴酚与和厚朴酚峰面积的RSD分别为0.63%和1.51%，结果表明本方法的重复性良好。

2.2.7 精密度试验 精密吸取混合对照品溶液，按色谱条件，连续进样6次，每次进样5μL，经计算厚朴酚与和厚朴酚的峰面积RSD分别为0.58%和0.85%。结果表明仪器精密度良好。

2.2.8 稳定性试验 取供试品溶液，分别于0、3、6、9、12、15、18h时取样，每次进样10μL，按液相色谱条件进行测定，结果厚朴酚与和厚朴酚的峰面积RSD分别为0.89%和1.28%，表明两者在18h内稳定。

表1 厚朴酚加样回收试验

表2 和厚朴酚加样回收试验

2.2.9 加样回收率试验 取中试样品(批号20040301)内容物中的微丸适量，研细，精密称定，共称取6份，分别置50mL的容量瓶中，加入一定量的厚朴酚与和厚朴酚对照品，其它按照供试品溶液的制备项下进行操作，制备加样回收样品溶液，进样，每次10μL，结果厚朴酚、和厚朴酚的平均回收率分别为99.76%，100.06%，RSD分别为0.73%，2.1%，表明该方法较为稳定可靠，见表1～2。

2.2.10 样品测定 取藿香正气双相胶囊中试产品三批，按“供试品溶液的制备”方法制备样品，按色谱条件下的方法测定样品中厚朴酚与和厚朴酚的含量，结果见表3。

表3 样品中厚朴酚、和厚朴酚含量测定结果(n=3)mg/粒

3 讨论

3.1 本文对广藿香油薄层条件进行了研究 条件

①硅胶G薄层板，展开剂:石油醚(30℃～60℃)-醋酸乙酯-冰醋酸(98∶5∶0.2)，显色剂:5%三氯化铁乙醇溶液;条件②硅胶G薄层板，展开剂:石油醚(60℃～90℃)-乙酸乙酯-甲酸(85∶15∶2)，显色剂:5%香草醛硫酸溶液。

结果发现①能较好地分离广藿香油，且阴性无干扰。条件②分离效果不好，斑点发散。所以选择条件①为光藿香的薄层鉴别条件。

3.2 本文对紫苏油薄层条件进行了研究 条件①以对照药材为参照，薄层板:硅胶G，展开剂:石油醚(60℃～90℃)-醋酸乙酯(19∶1)，显色剂:2，4-二硝基苯肼试液。试验结果发现此条件所得到的薄层图斑点发散，且阴性略有干扰。

条件②以对照品为参照，薄层板:硅胶G，展开剂:石油醚(60℃～90℃)-醋酸乙酯(19∶1)，显色剂:2，4-二硝基苯肼试液。试验结果发现此条件所得到的薄层图斑点清晰，且阴性无干扰。

3.3 液相条件 本文确定的HPLC方法同时测定藿香正气双相胶囊中厚朴酚与和厚朴酚的含量，该方法方便快捷、灵敏准确、重复性好，能有效的控制藿香正气双相胶囊的质量。