复方苦参腔内灌注治疗对恶性胸腔积液患者胸水中VEGF、MMP含量的影响

张振安，安 静，张风林，袁亚军

(唐山市人民医院唐山市肿瘤医院呼吸科，河北 唐山 063000)

复方苦参腔内灌注治疗对恶性胸腔积液患者胸水中VEGF、MMP含量的影响

张振安，安 静，张风林，袁亚军

(唐山市人民医院唐山市肿瘤医院呼吸科，河北 唐山 063000)

目的 探讨复方苦参腔内灌注治疗对恶性胸腔积液患者胸水中VEGF、MMP含量的影响。方法选择在本院接受住院治疗的恶性胸腔积液患者作为研究对象，随机分为接受常规胸腔内化疗的对照组及接受复方苦参腔内灌注治疗的观察组，比较两组患者的治疗后胸水VEGF、MMP含量及T细胞亚群分布差异。结果(1)观察组患者接受治疗后的VEGFA、VEGFB、VEGFC水平均显著低于对照组患者(P＜0.05)；(2)观察组患者接受治疗后的胸水MMP-2及MMP-9含量均显著低于对照组患者(P＜0.05)；(3)观察组患者接受治疗后的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平均明显高于对照组患者(P＜0.05)。结论复方苦参腔内灌注治疗可以明显降低患者胸水VEGF、MMP含量，优化机体免疫功能。

恶性胸腔积液；复方苦参；VEGF；MMP

恶性肿瘤晚期多可出现恶性胸腔积液，患者可在短期内出现呼吸困难、血液循环障碍灯胸腔大量积液表现，严重影响正常生活。胸腔穿刺抽吸积液是减少恶性胸水患者胸腔积液量、缓解呼吸症状的有效方式，在胸水明显减少后胸腔内注入化疗药物可以抑制病情、减缓胸水产生速度，改善患者的生存质量[1]。复方苦参为一类具有抑制肿瘤细胞增殖转移的中成药物，其毒副作用小，且可增强患者免疫功能，是与化疗药物联用于胸腔注射的理想药物[2]。本文旨在探讨复方苦参腔内灌注治疗对恶性胸腔积液患者胸水中血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶(MMP)含量的影响。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择于2013年6月至2014年6月间在本院住院治疗的恶性胸腔积液患者76例作为研究对象，原发肿瘤均经病理组织学及细胞学检查证实，B超现实胸腔中大量积液且于其中找到癌细胞，排除低蛋白血症、心力衰竭等其他引发胸腔积液因素。所有患者及其家属在了解研究过程后均签署知情同意书。按照随机数表法将所有入组患者分为接受常规化疗的对照组和在常规治疗基础上加入复方苦参腔内灌注治疗的观察组，每组各38例。观察组患者中男性21例，女性17例，年龄48～83岁，平均(67.12±8.04)岁，全身状况卡氏评分61～83分，平均(70.72±5.83)分，原发肿瘤中肺癌23例，乳腺癌6例，卵巢癌5例，其他4例；对照组患者中男性20例，女性18例，年龄47～82岁，平均(66.53±7.12)岁，全身状况卡氏评分62～82分，平均(70.41±5.65)分，原发肿瘤中肺癌21例，乳腺癌7例，卵巢癌5例，其他5例。两组患者的基线资料差异无统计学意义，P＞0.05，具有可比性。

1.2 治疗方法 经B超定位后进行胸腔穿刺置入中心静脉导管，间断负压引流抽吸积液，至B超复查证实为少量积液后，对照组给予胸腔注射卡铂400 mg+地塞米松5 mg+生理盐水30 ml，嘱患者缓慢变换体位，以利于药物分布。观察组患者额外胸腔注射复方苦参注射液30 ml。以上治疗每周进行一次，以4次为一个疗程，连续治疗两个疗程以上。

1.3 观察指标

1.3.1 VEGF水平 接受不同治疗方案前1 d及治疗后1 d抽取患者胸水5 ml，采用酶联免疫吸附法检测胸水中的血管内皮生长因子A(VEGFA)、血管内皮生长因子B(VEGFB)、血管内皮生长因子C(VEGFC)水平，测定时严格按照试剂盒说明进行操作。

1.3.2 MMP水平 接受不同治疗方案前后抽取患者胸水5 ml，采用酶联免疫吸附法检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)含量，测定时严格按照试剂盒说明进行操作。

1.3.3 淋巴细胞亚群 接受不同治疗方案前后抽取患者外周静脉血5 ml，采用ELISA法测定T细胞亚群分布情况，具体包括CD4+、CD8+、CD4+/CD8+。

1.4 统计学方法 采用SPSS18.0软件对上述数据进行统计学分析，计量资料以均数±标准差(±s)表示，组间比较采用t检验、计数资料采用χ2检验，经P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 VEGF水平比较 治疗前两组患者的外周血VEGF水平比较差异均无统计学意义(P＞0.05)，观察组患者接受治疗后的VEGFA、VEGFB、VEGFC水平均显著低于对照组，差异均有统计学意义(P＜0.05)，见表1。

表1 两组患者接受不同治疗方案前后的VEGF水平比较(±s，pg/ml)

表1 两组患者接受不同治疗方案前后的VEGF水平比较(±s，pg/ml)

组别治疗前治疗后观察组对照组t值P值VEGFA 291.09±46.32 287.13±45.09 0.573＞0.05 VEGFB 351.67±61.09 353.21±63.35 0.438＞0.05 VEGFC 221.57±38.32 213.44±37.65 0.653＞0.05 VEGFA 86.76±11.12 223.43±31.17 6.482＜0.05 VEGFB 123.23±18.44 314.68±51.33 5.375＜0.05 VEGFC 74.65±9.23 187.78±23.36 7.523＜0.05

2.2 MMP水平比较 治疗前两组患者的胸水MMP水平比较差异均无统计学意义(P＞0.05)，观察组患者接受治疗后的胸水MMP-2及MMP-9含量均显著低于对照组，差异均有统计学意义(P＜0.05)，见表2。

2.3 T细胞亚群分布比较 治疗前两组患者的T细胞亚群分布差异均无统计学意义(P＞0.05)，观察组患者接受治疗后的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平均明显高于对照组，差异均有统计学意义(P＜0.05)，见表3。

表2 两组患者接受不同治疗前后的MMP水平比较(±s，mg/L)

表2 两组患者接受不同治疗前后的MMP水平比较(±s，mg/L)

观察组对照组t值P值281.27±31.82 279.14±30.26 0.374＞0.05 198.23±23.19 201.37±29.38 0.734＞0.05 116.27±11.04 218.63±19.37 6.492＜0.05 102.72±12.45 163.11±28.43 5.291＜0.05

表3 两组患者接受不同治疗前后的T细胞亚群分布情况比较(±s)

表3 两组患者接受不同治疗前后的T细胞亚群分布情况比较(±s)

组别治疗前治疗后观察组对照组t值P值CD3+(%) 50.04±2.17 49.45±2.65 0.342＞0.05 CD4+(%) 41.18±3.66 41.54±4.43 0.264＞0.05 CD4+/CD8+1.73±0.23 1.68±0.15 0.546＞0.05 CD3+(%) 54.54±4.47 48.13±2.56 4.243＜0.05 CD4+(%) 43.43±4.23 38.09±3.76 5.135＜0.05 CD4+/CD8+2.24±0.33 1.71±0.19 4.535＜0.05

3 讨论

恶性胸腔积液是恶性肿瘤晚期常见并发症，原发病灶以肺癌、乳腺癌及恶性淋巴瘤多见。恶性胸腔积液产生迅速，患者可伴有呼吸困难及低蛋白血症，严重者出现肺不张及感染，对患者的生活质量亦造成巨大冲击。中大量恶性胸腔积液患者最为明显的临床症状是呼吸困难，穿刺抽吸胸腔积液是改善患者呼吸症状最为直接与有效的方式。目前临床多推荐在抽取胸腔积液后，腔内关注化疗药物以控制积液产生速度、缓解临床症状，尽可能延长患者有质量的生存时间[3-4]。

胸腔反复注射化疗药物虽然可以取得确切疗效，但是单纯重复局部应用化疗药物，对于一般状况较好的患者治疗强度偏弱，不利于疗效的巩固。复方苦参注射液是一种主要成分为苦参碱、氧化苦参碱的纯中药制剂，其可抑制肿瘤细胞的DNA合成、抑制相关酶活性、阻断肿瘤细胞的正常周期、诱导肿瘤细胞凋亡，同时苦参碱具有止血止痛、增强机体免疫能力的作用，且目前临床尚未报道其具有明显毒副作用[5-6]。故复方苦参注射液有望配伍化疗药进行胸腔内注射，巩固甚至扩大治疗效果，改善患者的全身状态。

VEGF是目前已知的促血管新生能力最明确的细胞因子，包括VEGFA、VEGFB、VEGFC等多种亚型，通过结合相应受体激活信号通路，进而促进血管内皮细胞增殖迁移以生成新血管[7]。新生血管是恶性肿瘤生存及增殖的基础，恶性肿瘤患者血清及体液中的VEGF含量大幅上升，且其水平与肿瘤分期密切相关[8]。本次研究中我们检测了治疗前后患者胸水中的VEGF含量，结果显示治疗前患者胸水中的VEGF含量大幅高于正常水平，但两组间差异无统计学意义(P＞0.05)，治疗后两组患者的VEGF各亚型水平均有所降低，其中观察组患者的VEGF亚型水平显著低于对照组患者(P＜0.05)。由此可见复方苦参胸腔灌注可以显著降低患者的VEGF含量，减弱肿瘤血管新生。

在肿瘤细胞向血管迁移及侵入的过程中，基底膜及细胞外基质降解是关键步骤，在该过程中肿瘤细胞分泌的基质金属蛋白酶MMP-2和MMP-9起到重要作用[9]。MMP-2和MMP-9可降解粘连蛋白，并在此基础上催化具有活性的可溶性片段，参与到肿瘤细胞的增殖迁移中去。目前有研究[10]显示，MMP-2及MMP-9阳性患者的无瘤生存期及5年生存率均显著低于阴性患者。在上述研究中，我们同样检测了治疗前后患者胸水中的MMP水平，结果显示治疗前两组患者的胸水MMP-2、MMP-9含量高于正常人，但组间差异无统计学意义(P＞0.05)，接受治疗后两组患者的MMP-2、MMP-9含量均降低，但是观察组患者降幅更大，与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05)。由此可见，复方苦参胸腔灌注可以显著降低患者的胸水MMP含量，降低肿瘤细胞迁移能力，对于抑制患者病情进展具有积极作用。

在制约肿瘤细胞活性的同时，增强患者自身免疫功能是缓解患者病情的重要途径[11]。本研究中，我们观察了两组患者治疗前后T淋巴细胞分布情况，结果显示治疗前两组间差异无统计学意义(P＞0.05)，治疗后观察组患者接受治疗后的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平均明显高于对照组患者(P＜0.05)。CD3+淋巴细胞代表全T淋巴细胞、CD4+淋巴细胞代表辅助性T淋巴细胞，CD8+代表抑制性T淋巴细胞[12]，CD3+、CD4+、CD4+/ CD8+水平的上升标志着患者细胞免疫功能增强，说明胸腔内注射复方苦参有助于患者免疫功能的提升，对于其整体病情的控制具有积极的意义。

综上所述，复方苦参腔内灌注治疗可以明显降低患者胸水VEGF、MMP含量，优化机体免疫功能，值得临床上推广应用。

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Effect of compound matrine intracavity perfusion on VEGF,MMP levels in hydrothorax in patients of malignant pleural effusion.

ZHANG Zhen-an,AN Jing,ZHANG Feng-lin,YUAN Ya-jun.
Department of Respiratory Medicine,Tangshan People's Hospital,Tangshan Cancer Hospital,Tangshan 063000,Hebei,CHINA

ObjectiveTo analyze the effect of compound matrine intracavity perfusion on vascular endothelial growth factor(VEGF),matrix metalloproteinase(MMP)levels in hydrothorax in patients of malignant pleural effusion.MethodsPatients with malignant pleural effusion in our hospital were selected as research objects,which were randomly divided into control group with conventional intrathoracic chemotherapy and observation group with compound matrine intracavity perfusion.VEGF,MMP levels and T cell subgroup distribution were compared between the two groups after treatment.Results(1)VEGFA,VEGFB,VEGFC levels after treatment in observation group were significantly lower than those in the control group(P＜0.05).(2)The levels of MMP-2 and MMP-9 after treatment in observation group were significantly lower than those in control group(P＜0.05).(3)The levels of CD3+,CD4+,CD4+/CD8+after treatment in observation group were significantly higher than those in control group(P＜0.05).ConclusionCompound matrine intracavity perfusion could significantly decrease VEGF,MMP content in hydrothorax in patients of malignant pleural effusion,and optimize body's immune function.

Malignant pleural effusion;Compound matrine;Vascular endothelial growth factor(VEGF);Matrix metalloproteinase(MMP)

R655

A

1003—6350（2015）02—0166—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2015.02.0059

2014-07-21)

河北省中医药学会资助项目(编号：20132106)

张振安。E-mail：dr_zhangjian@163.com