射频消融术联合DC-CIK治疗中晚期肝细胞癌的疗效及其对患者生命质量的影响

2015-04-14 07:22刘红梅史丽丽李金瑞钟鑫平
海南医学 2015年21期
关键词:消融术肝细胞射频

刘红梅,史丽丽,李金瑞,钟鑫平

(1.中国医科大学附属第一医院普通外科,辽宁 沈阳 110001;2.武警辽宁省总队医院外科,辽宁 沈阳 110034)

射频消融术联合DC-CIK治疗中晚期肝细胞癌的疗效及其对患者生命质量的影响

刘红梅1,史丽丽2,李金瑞1,钟鑫平1

(1.中国医科大学附属第一医院普通外科,辽宁 沈阳 110001;2.武警辽宁省总队医院外科,辽宁 沈阳 110034)

目的观察超声引导下射频消融术联合树突状细胞-细胞因子诱导的杀伤细胞(DC-CIK)治疗中晚期肝细胞癌患者的临床疗效,并探讨其对患者生命质量的影响。方法选取中国医科大学普通外科2011年1月至2014年1月收治的156例诊断为中晚期肝细胞癌的患者,按照入选先后顺序随机分为观察组82例和对照组74例。两组患者均静脉输注DC-CIK免疫细胞治疗,观察组在细胞治疗的基础上行超声引导下经皮腹腔穿刺射频消融术,连续治疗6周,治疗前后用“肿瘤生命质量核心问卷(QLQ-C30)”进行评估并比较两组患者的生命质量,观察并记录治疗过程中的不良反应并评估两组患者近期及远期临床疗效。结果治疗后两组患者的QLQ-C30问卷中整体功能、特异性症状模块各个指标及整体生命质量评分均明显优于治疗前,且治疗后观察组上述指标均优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);两组患者治疗过程中均出现发热、寒战伴高热、皮疹,且差异无统计学意义(P>0.05);观察组术后出现腹痛、恶心伴呕吐、肝周血肿;治疗后观察组近期临床疗效与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),但远期临床疗效优于对照组,且生存期长于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),且中位生存期长于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论超声引导下射频消融术联合DC-CIK能提高中晚期肝细胞癌患者的远期临床疗效与生命质量且不良反应较少。

中晚期肝细胞癌;射频消融术;DC-CIK;临床疗效;生命质量

超声的引导下行射频消融术(Radiofrequency ablation,RFA)在治疗转移灶较少的中晚期肺癌、肝癌中已经取得了很好的临床疗效[1-3]。超声引导下经腹腔穿刺RFA有创面小、并发症少等优点,临床上常用于治疗病灶体积较小、转移灶较少、复发性及失去手术切除机会的肝癌患者的治疗[4]。过继免疫治疗对中晚期恶性肿瘤患者是一种安全、可行的治疗方法,采用体外培养的树突状细胞(Dendritic cell,DC)联合细胞因子诱导的杀伤细胞(Cytokine-induced killers,CIK)作为肿瘤免疫治疗的方案已经受到了广大医务工作者的重视,且在中晚期恶性肿瘤患者的治疗中已取得了较好的临床疗效且不良反应较少[5],但有关超声引导下行射频消融术联合DC-CIK治疗中晚期肝细胞癌患者的生命质量的研究还未有报道。我们选择了2011年1月至2014年1月在我院住院部采用DC-CIK过继免疫治疗方案的中晚期肝细胞患者,在治疗前后采用肿瘤生命质量核心问卷(QLQ-C30)量表对其整体功能与特异症状模块进行了评估,并记录不良反应及其近远期临床疗效。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集中国医科大学普通外科2011年1月至2014年1月(随访时间为1年)经肝脏穿刺病理组织学证实为中晚期(ⅢB~Ⅳ期)肝细胞癌,且经过CT平扫显示病灶直径≤6 cm,肝内转移灶较少的患者156例。病例纳入标准:①经病理结合诊断(典型的影像学表现以及甲胎蛋白≥500 ng/ml)为肝细胞癌患者;②患者本人及家属同意后参与且经过医院医学伦理委员会批准;③肝功能Child-pluge分级:A级;④至少可有一个可以测量的肿瘤且直径≥1 cm;⑤主要器官无严重功能衰竭;⑥中性粒细胞≥1.5×109/L、血红蛋白≥90 g/L(14 d内无输血史)、血小板≥80×109/L。病例排除标准:①Karnofsky评分在70分以下;②合并严重心脑血管疾病、糖尿病、甲亢等代谢系统级内分泌系统疾病患者;③混合细胞性肝癌;④合并其他恶性肿瘤;⑤腹部CT检查结果提示腹腔内有大量积液;⑥治疗前1个月内有外伤史及大手术史;⑦出现中枢神经系统的广泛性转移;⑧影像学(CT/MRI)检查结果显示有重要血管及其周围神经的侵蚀且因血管侵蚀而出现咳血;⑨病灶直径>6 cm。按照患者入选先后顺序随机分为观察组82例与对照组74例。两组患者治疗前在性别、年龄、病理分期与分型等方面比较差异均无统计学意义(P>0.05),具有可比性,见表1。

表1 两组患者化疗前的临床资料比较[例(%)]

1.2 方法

1.2.1 DC-CIK细胞的制备及回输方案[6]①细胞制备:经血液成分分离机采集的单个核细胞[数量为(1~2)×109]加入30ml的LGT-T551细胞培养液中,在CO2培养箱内孵育2 h,移出悬浮细胞(用于诱导T细胞),向培养瓶中加入20ml的1 000 U/ml的注射用重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子(GM-CSF)和25ml的1 000 U/ml白细胞介素-4(IL-4)诱导DC细胞,每3 d换一次细胞培养液并补充GM-CSF与IL-4,第6天加入细胞因子的同时加入15ml的1 000 U/ml重组人干扰素-γ(IFN-γ)诱导DC细胞成熟,取2×108数量的DC细胞置于100ml的0.9%氯化钠中并加入0.5%灭活自体血浆50ml,用于患者第1次细胞回输,其余DC细胞留作与T细胞混合培养诱导CIK细胞。悬浮细胞置于GT-T601培养袋中,加入含有15ml的浓度为1 000 U/ml IFN-γ的GT-T551培养基培养,24 h后加入1ml的50 ng/ml CD3单克隆抗体和10ml的1 000 U/ml白细胞介素-2(IL-2)注射液,每3 d换液一次,补充IL-2,第7天收获成熟的T细胞,取(2~3)×109放入250ml的0.9%氯化钠并加入0.5%灭活自体血浆50ml中,用于患者第2次细胞回输,其余T细胞与预留的DC细胞共同培养诱导CIK细胞,7 d后收获细胞并经静脉两次回输患者,每次回输细胞数量为(4~5)×109,台盼兰染色检测细胞活性≥90%,用流式细胞仪对采集的细胞进行细胞免疫表型分析,同时分别做细菌、真菌、病毒、支原体、衣原体、内毒素检测;②细胞回输:第1、2次回输时间分别为射频消融结束后当天上午、下午;第3、4次回输时间分别为射频消融结束后2周的上午、下午;21 d为一个周期;第1周期治疗前及6个周期治疗结束后相关指标检测对比。

1.2.2 射频消融方案 两组患者入院后立即开始进行射频消融,射频消融治疗术前平卧并口服吗啡15mg止疼,先行彩超检查,根据彩超显示的图像选取最佳穿刺点及穿刺角度(必要时配以CT),常规消毒后铺有孔巾,用利多卡因在穿刺点处局部浸润麻醉,将RFA多导电极穿刺到肿瘤部位,根据肿瘤的体积打开电极,每次消融采用90℃~100℃,持续时间根据肿瘤大小而定,一般持续10~15min,根据肿瘤体积及数量决定射频消融的次数(直径≤15 mm,消融1次即可;直径>15 mm的患者,可以反复多次进针消融,但是总次数应≤5次),退针时需要电凝止血[3]。

1.2.3 QLQ-C30内容及评估方法 QLQ-C30自评表将对患者进行生命质量评估,量表由整体功能模块及特异症状模块两部分组成,整体功能模块包括躯体、角色、情绪、认知、社会功能等5个项目组成,选取患者近两周的表现进行研究及记录发生频度,各个项目的原始数据经线性公式转换为0~100分,整理功能模块得分越高,表示生命质量越好;特异性模块包括3个症状量表,本研究选取了与本研究最相关8个条目:疲劳、恶心呕吐、疼痛、气促、睡眠障碍、食欲差、便秘、腹泻,特异性模块得分越高,代表该条目的症状越严重。两组患者的评估时间制定在治疗开始前及治疗结束后1周[7]。

1.2.4 疗效评价标准 治疗6个周期结束后评估近期临床疗效,根据6周期治疗后实体肿瘤的大小及患者的症状体征可将近期临床评价标准分为:完全缓解(CR)、部分缓解(PR)、病变稳定(SD)、病变进展(PD),CR+PR是客观有效率(ORR);CR+PR+SD是疾病控制率(DCR),连续化疗2周期后,行影像学(CT或MRI)对病灶进行测量,以评价疗效。远期临床疗效评价标准为定期随访1年,治疗结束后继续做好电话随访,每个月两次,记录患者无进展生存期(PFS)[8]。

1.3 统计学方法 应用SPSS17.0软件对数据进行统计学分析,计量资料以均数±标准差(±s)表示,计数资料组内比较采用χ2检验;计量资料不同组间比较采用独立样本采用t检验,计量资料组内治疗前后比较采用配对样本t检验,等级资料的比较采取Wilcoxon秩和检验,以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 两组肝细胞癌患者整体功能模块及生命质量评分比较 两组患者治疗前的躯体、角色、情绪、认知、社会功能与整体生命质量评分比较差异均无统计学意义(P>0.05),治疗后以上各项评价指标两组患者均较治疗前升高,且观察组升高比对照组更明显,差异均有统计学意义(P<0.05),见表2。

表2 两组患者治疗前后QLQ-C30问卷整体功能及整体生命质量评分比较(±s,分)

表2 两组患者治疗前后QLQ-C30问卷整体功能及整体生命质量评分比较(±s,分)

注:治疗后与观察组比较,aP<0.05。

组别观察组(n=82)治疗前治疗后t值P值对照组(n=74)治疗前治疗后t值P值躯体功能 角色功能 情感功能 认知功能 社会功能 整体生命质量41.34±5.48 54.7±6.76 2.321 0.001 42.76±6.65 50.32±4.32 1.124 0.005 59.65±4.66 68.79±7.43 0.461 0.012 61.56±7.52 73.46±6.48 3.326 0.006 45.21±5.65 58.31±4.54 1.658 0.021 51.45±6.65 61.54±5.56 3.231 0.008 60.34±7.65 61.54±5.56a0.870 0.006 41.32±3.43 46.52±3.54a0.873 0.000 42.43±7.13 47.32±3.24a1.213 0.004 57.58±6.43 62.62±6.54a2.231 0.009 61.31±5.43 68.42±7.43a0.325 0.003 47.65±2.54 54.65±5.32a2.326 0.009

2.2 两组肝细胞癌患者治疗后特异症状比较 两组患者治疗前疲劳、恶心呕吐、疼痛、气促、睡眠障碍、食欲差、便秘、腹泻评分差异均无统计学意义(P>0.05);两组患者治疗后疲劳、恶心呕吐、疼痛、气促、睡眠障碍、食欲差、便秘、腹泻评分均较治疗前降低(P<0.05);治疗后观察组疲劳、恶心呕吐、疼痛、气促、睡眠障碍、食欲差、便秘、腹泻评分低于对照组(P<0.05),见表3。

2.3 两组不良反应比较 两组治疗中均未发现严重过敏反应;对照组主要不良反应为发热(50例,67.57%)、高热伴寒战(16例,21.62%)、皮疹(7例,9.46%);观察组主要不良反应为发热(45例,54.88%)、高热伴寒战(15例,18.29%)、皮疹(6例,7.32%),观察组发热、高热伴寒战、皮疹等不良反应与对照组差异无统计学意义(χ2=0.020,P=0.990>0.05)。观察组射频消融术后主要不良反应为腹痛(35例,42.68%)、恶心伴呕吐(40例,48.78%)、肝周血肿(2例,2.44%)。观察组术后发生穿刺口出血约30ml(2例,2.44%),给予白眉蛇毒凝血酶肌肉注射后无咯血,无一例电灼伤,发生肝周血肿(2例,2.44%,未行特殊处理,两周后血肿吸收)。

2.4 两组肝细胞癌患者治疗后近期及远期临床疗效比较 治疗后观察组近期临床疗效优于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05),但治疗后观察组远期临床疗效优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),见表4。观察组的生存期长于对照组,且差异有统计学意义(χ2=4.066,P=0.044<0.05),观察组的中位生存期长于对照组,结果见图1。

表3 两组患者治疗前后QLQ-C30问卷特异性症状评分(分,±s)

表3 两组患者治疗前后QLQ-C30问卷特异性症状评分(分,±s)

注:a治疗后与观察组比较,P<0.05。

疲劳 恶心呕吐 疼痛 气促 睡眠障碍 食欲差 便秘 腹泻组别观察组(n=82)治疗前治疗后t值P值对照组(n=74)治疗前治疗后t值P值44.65±4.43 35.44±3.43 3.451 0.000 24.66±2.56 14.65±2.51 2.436 0.002 29.65±1.97 16.76±1.23 1.121 0.000 46.73±5.36 33.54±4.54 1.435 0.006 45.54±4.65 28.34±4.54 0.653 0.012 44.54±5.65 31.33±4.43 3.452 0.000 15.56±1.21 10.44±1.34 0.763 0.003 2.56±0.25 1.76±0.21 1.231 0.023 2.35±0.26 2.11±0.22a1.325 0.002 44.76±5.76 42.61±6.85a1.562 0.003 23.65±3.23 17.32±3.24a2.325 0.005 29.46±3.56 19.41±1.34a0.879 0.002 47.67±4.87 41.65±5.43a1.231 0.001 45.46±4.76 35.23±4.65a2.321 0.000 44.68±5.65 36.74±4.65a1.324 0.001 15.54±2.43 13.54±0.88a0.879 0.015

表4 两组患者临床疗效比较[例(%)]

图1 生存函数

3 讨 论

肝细胞癌是全球常见的消化系统恶性肿瘤,在消化系统恶性肿瘤中发病率仅次于胃癌居第二位,2007年美国癌症协会公布的研究数据显示:全球新发肝癌711 000例,死亡率居所有恶性肿瘤的第3位,新发病例中发展中国家占到约80%以上,我国占所有新发病例总数超过了55%[9]。原发性肝癌的办法主要还是局限于手术、放疗和化疗三大方法,但是这三种方法均不能很好的控制肿瘤细胞的转移,而晚期肝癌一旦确诊后中位性生存期只有2~4个月,且这三大传统方法存在副反应大、患者接受性差等缺点[11]。近年来针对中晚期肝癌的治疗往往采用多种方法联合治疗,充分发挥各自治疗的优势。本实验结果显示采取联合治疗后的观察组中位生存周期超过4个月,明显长于仅仅采取DC-CIK治疗的对照组。

RAF治疗法是利用频率在400~460 kHz范围内的电磁波作用于肿瘤组织内部而杀死肿瘤细胞,在肝癌的治疗中取得了较好的临床疗效[11]。2000年由美国学者Dupuy等[12]在国际上首次报道:经彩超或CT引导下的射频电极针穿刺进入肿瘤组织内,电极针发出的射频电磁波可引起肿瘤细胞内的分子发生震荡,震动过程中产生大量热,使肿瘤组织内部温度高达90℃~110℃,高温导致细胞内蛋白质的变性与DNA的断裂,此外高热还能导致肿瘤周围肝细胞血管发生闭合,可以有效的防止出血与肿瘤细胞转移,而周围正常肝脏组织血液含量丰富体,热量很容易随着血液而散发,使能量易于集聚,使瘤体内部坏死彻底,而避免周围正常组织的损伤[13-14]。过继性细胞免疫治疗主要是通过注射患者自体的经过体外活化、扩增的免疫活性细胞,激发或调动机体的免疫系统,增强抗肿瘤免疫性进而杀死肿瘤细胞或抑制肿瘤细胞生长,目前使用最多的是DC细胞与CIK细胞。DC是目前已知的抗原提呈能力最强的细胞,成熟的DC细胞可以有效诱导抗原特异性T细胞增殖和活化,激活自然杀伤细胞(Natural killer cell,NK)和自然杀伤T细胞(Natural killer T cell,NKT),而CIK细胞能在多种细胞因子的刺激下具备了T淋巴细胞强大的抗原活性和NK细胞的广谱杀肿瘤细胞的双重特点,是肿瘤过继治疗的首选免疫细胞[15-16]。本实验结果显示:治疗后观察组近期临床疗效有优于对照组的趋势,但差异无统计学意义(P>0.05),但治疗后观察组远期临床疗效优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),观察组的生存期长于对照组,且差异有统计学意义(P<0.05)。说明DC-CIK免疫细胞治疗联合RAF能很好地改善患者的提高远期临床疗效,提高患者的生存期,但不能提高近期临床疗效。此外两组治疗过程中不良反应的发生率差异无统计学意义(P>0.05),同时射频消融治疗后出现的副损伤主要有穿刺口出血,给予白眉蛇毒凝血酶肌肉注射后无咯血,无一例电灼伤,发生肝周血肿2例,未行特殊处理,两周后血肿吸收,但未发生肝破裂、大出血等严重副损伤,说明DC-CIK联合射频消融治疗是安全可靠的。

肿瘤生命质量核心量表(QLQ-C30)评价该方法对患者生命质量的影响。该评价方法是欧洲癌症研究与治疗组织(EORTC)推荐使用于癌症患者化疗期间生命质量评定的专业用表,国内已用于研究肺癌靶向治疗中使用QLQ-C30[17]。但是关于对肝癌的研究相对较少。本临床研究结果显示:两组患者治疗前躯体、角色、情绪、认知、社会功能与整体生命质量评分差异均无统计学意义(P>0.05),两组患者治疗后躯体、角色、情绪、认知、社会功能与整体生命质量评分均较治疗前升高(P<0.05);治疗后观察组躯体、角色、情绪、认知、社会功能与整体生命质量评分高于对照组(P<0.05);两组患者治疗前疲劳、恶心呕吐、疼痛、气促、睡眠障碍、食欲差、便秘、腹泻评分差异均无统计学意义(P>0.05);两组患者治疗后疲劳、恶心呕吐、疼痛、气促、睡眠障碍、食欲差、便秘、腹泻评分均较治疗前降低(P<0.05);治疗后观察组疲劳、恶心呕吐、疼痛、气促、睡眠障碍、食欲差、便秘、腹泻评分低于对照组(P<0.05),说明RAF联合DC-CIK细胞疗法治疗中晚期肝癌能很好的改善患者的生命质量。

总结RFA穿刺治疗转移灶较少晚期肝细胞癌的临床经验如下:①需要严格把握好治疗的适用人群,本临床研究入选的病例均为彩超检查瘤体血供丰富,CT平扫结果显示肿瘤转移灶较少,且单个瘤体直径≤6 cm,因为病灶太大易造成消融不彻底,目前临床经验显示对于直径<3 cm、病灶数目<3个的肝癌患者射频消融治疗效果已经得到了充分肯定,直径较大的病灶需要反复穿刺,而反复穿刺又易导致癌细胞转移[18];②肝脏血供丰富,含有大血管,结构复杂,因此必要时需要配合CT甚至MRI检查定位;③肝功能Child-pluge分级为B级或C级的患者不建议行射频消融术治疗,黄伍奎等[11]证实,射频消融术后5 d肝酶水平升高,说明射频消融术对肝功能有破坏性,因此需要有一定的储备力;④RFA治疗过程前后可以皮下注射IL-2,RFA联合IL-2在小鼠动物模型中显示能很好的抑制肿瘤细胞生长[18];⑤肝癌患者往往是午后低热,细胞回输时间应选择在上午。

综上所述,对于中晚期肝细胞癌患者给予DC-CIK免疫细胞治疗联合RFA能很好地提高远期临床疗效、提高中位生存期,且能很好地改善生命质量,该方法安全可靠,不良反应发生率低及其副损伤较小,因此值得在临床中广泛推广。

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Clinical efficacy of radiofrequency ablation combined with DC-CIK and its effect on quality of life in patients with advanced hepatocellular caicinoma.

LIU Hong-mei1,SHI Li-li2,LI Jin-rui1,ZHONG Xin-ping1.1.Department of General Surgery,the First Affiliated Hospital of China Medical University,Shenyang 110001,Liaoning,CHINA; 2.Department of Thoracic Surgery,Liaoning Provincial Corps Hospital of Chinese People's Armed Police Forces,Shenyang 110034,Liaoning,CHINA

ObjectiveTo investigate the clinical efficacy of radiofrequency ablation combined with dendritic cells and cytokine-induced killers(DC-CIK)and its effect on quality of life in patients with advanced hepatocellular caicinoma.MethodsA total of 156 patients diagnosed with advanced hepatocellular caicinoma in our hospital from Jan.2011 to Jan.2014 were randomly divided into observation group(82 cases)and control group(74 cases).The two groups were both treated with DC-CIK,and the observation group was additionally treated with ultrasound-guided percutaneous radiofrequency ablation for 6 weeks.The quality of life was assessed and compared before and after treatment by Core quality of life questionnaire(QLQ-C30).Adverse reactions were recorded,and the short-term and long-term clinical efficacy was assessed.ResultsAfter treatment,the overall function,indexes of specific symptom module,overall QLQ-C30 scores were significantly better than those before treatment in the two groups(P<0.05),and all the above scores after treatment in the observation group were significantly better than those in the control group (P<0.05).The two groups all showed fever,chills combined with fever,rash,with no statistically significant differences(P>0.05),and the observation group showed abdominal pain,nausea and vomiting,peripheral hepatic hematoma after operation.After treatment,the two groups showed no statistically significant differences in short-term clinical efficacy(P>0.05),but the observation group was found to had significantly better long-term clinical efficacy and longer median survival time(P<0.05).ConclusionRadiofrequency ablation combined with DC-CIK can raise the long-term clinical efficiency and improve the quality of life of patients with advanced hepatocellular caicinoma.

Advanced hepatocellular caicinoma;Radiofrequency ablation;Dendritic cells and cytokine-induced killers(DC-CIK);Clinical efficacy;Quality of life

R735.7

A

1003—6350(2015)21—3136—05

2015-05-08)

10.3969/j.issn.1003-6350.2015.21.1141

辽宁省科学技术计划项目(编号:2011225019)

钟鑫平。E-mail:www.liuhongmei2015@sina.com

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