眼分泌物细菌培养及药物敏感性分析

南方医科大学附属中山市博爱医院（528403）林爱心 谭南 汪伟山 杨晓华 李丽莲

为了解我院婴幼儿眼疾的细菌分布及药物敏感试验情况，对1505例婴幼儿眼分泌物标本细菌培养及药物敏感试验结果进行回顾性分析，结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 标本来源 1505例标本来自中山市博爱医院2013年4月～2014年9月眼科门诊的患儿，诊断为结膜炎、泪囊炎或泪道阻塞合并感染，年龄从出生3天至6岁5月，其中3天至3月龄婴儿共1021例。

1.2 仪器与试剂 采用法国梅里埃生物公司VITEK 2全自动细菌鉴定药敏仪，其配套相关鉴定卡及药敏卡由广州华鑫公司提供，二氧化碳培养箱为美国Forma 3111，血琼脂平板、巧克力平板、麦康凯平板、血M-H平板、脑心浸液培养基及HTM平板均购于广州迪景公司，K-B法药敏纸片由OXOID公司提供。使用金黄色葡萄球菌ATCC25923、大肠杆菌ATCC25922、肺炎链球菌ATCC49619质控标准菌株购于卫生部临床检验中心。所有试剂均在有效期内使用。

1.3 实验方法 按照《全国临床检验操作规程》第三版要求，把标本接种于麦康凯平板、血平板及巧克力平板，置35℃，6%CO2经24～48小时培养，分离到纯菌落后于法国梅里埃生物公司VITEK 2全自动细菌鉴定药敏仪进行鉴定及药敏试验。流感嗜血杆菌和肺炎链球菌药敏试验用K-B法。判断标准遵循美国临床实验室标准化协会（CLSI）规定的法规。

2 结果

2.1 致病菌种类构成 1505例眼分泌物细菌培养中，无菌生长149例，占9.9%，有正常菌群（如：草绿色链球菌、棒状杆菌、凝固酶阴性葡萄球菌等）生长为840例，占55.8%，有致病菌生长占34.3%。检出致病菌549株，以流感嗜血杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌为主，分别占25.9%，25.3%，20.2%。其中有35标本存在混合感染，主要以流感嗜血杆菌混合其他细菌如肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯氏菌或阴沟肠杆菌为主，各17例、6例、4例和1例。其余金黄色葡萄球菌混合肺炎链球菌2例；肺炎克雷伯氏菌混合化脓链球菌、大肠埃希氏菌或真菌，大肠埃希氏菌混合金黄色葡萄球菌，肺炎链球菌混合植生拉乌尔菌各1例。

2.2 药敏试验结果 主要革兰阴性杆菌为流感嗜血杆菌，对氨苄西林及氨苄西林/舒巴坦的耐药率分别为33.1%和16.9%，对环丙沙星、头孢曲松、阿奇霉素耐药率均为时0%。而肺炎克雷伯氏菌、大肠埃希氏菌等肠杆菌科细菌对氨苄西林及氨苄西林/舒巴坦的耐药率分别为84.3%和21.9%，对头孢曲松，复方新诺明的耐药率分别为14.1%和7.8%，对环丙沙星及左氧氟沙星均为3.1%，肠杆菌科细菌对阿米卡星未见耐药。主要革兰阳性球菌为金黄色葡萄球菌及肺炎链球菌，对青霉素耐药率分别为97.1%和29.7%、对红霉素耐药率分别为41.0%和89.2%，对克林霉素耐药率分别为40.3%和85.6%、对复方新诺明耐药率分别为2.9%和69.4%、两者对万古霉素的耐药率均为0%，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）检出率为21.6%。

3 讨论

正常人的泪囊、结膜、巩膜、角膜和前房等是无菌的，然而人的眼睛常年暴露于空气中，以极易受到外界细菌的侵害。当遇到毒株和（或）人体抵抗力减弱时，外界进入的病原菌就会在眼内大量繁殖，引起感染[1]。草绿色链球菌是人体正常菌群的组成部分[2]，也非眼部主要致病菌。大多数棒状杆菌存在于人体各部位及环境中，如果采样过程不正确，就有可能会分离到这些菌株[1]。干燥棒状杆菌、表皮葡萄球菌、微球菌等是结膜上的正常菌群。故本研究对以上几种细菌列为非致病菌未作报告，注意勿将其误作病原菌报告。莫拉菌属存在于正常人皮肤和黏膜表面，是正常寄生菌，很少致病，是机会致病菌，也可引起眼结膜炎[1]，故对于大量优势生长的卡他莫拉菌也作为致病菌统计在内。儿童细菌性眼结膜炎的主要致病菌为流感嗜血杆菌、肺炎链球菌、卡他莫拉菌、灰色奈瑟菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌等[1]。本组数据显示，我院眼科患儿主要致病菌为流感嗜血杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、卡他莫拉菌、肺炎克雷伯氏菌、铜绿假单胞菌等，与其一致。金黄色葡萄球菌是革兰阳性菌中的主要致病菌，占致病菌检出率25.3%，与各文献报道相符。而流感嗜血杆菌25.9%和肺炎链球菌20.2%的检出率远比其高，这可能与其检测条件有关。因该两种细菌的培养条件较为苛刻，有时实验室又不能做到及时处理标本，从而造成分离率较低。而20株真菌均为年龄3月内婴儿标本中检出，可能与其在分娩过程中由产道感染所致。

药敏结果显示流感嗜血杆菌除对氨苄西林和氨苄西林/舒巴坦一般耐药外，对环丙沙星、头孢曲松、阿奇霉素均高度敏感。金黄色葡萄球菌对青霉素耐药性最高，对红霉素及克林霉素次之，而对复方新诺明、左氧氟沙星、利福平则较为敏感，对万古霉素则未见耐药。MRSA约占五分之一。肺炎链球菌对红霉素及克林霉素耐药率最高，复方新诺明次之，青霉素相对敏感，而头孢曲松和利福平则较为敏感，对万古霉素也未见耐药。肠杆菌科细菌则对氨苄西林较为耐药，对氨苄西林/舒巴坦及头孢曲松轻度耐药，而对环丙沙星、左氧氟沙星、复方新诺明等均较为敏感。结合本组数据，综合分析，诺酮类药滴眼液可作为首选外用药用于经验治疗细菌性眼部感染。因不同的细菌对各种药物的敏感性有较大差异，治疗感染性眼疾，特别是婴幼儿患者，一定要根据细菌培养及药敏试验结果合理选用抗生素，减少药物耐药性的产生及对儿童的毒副作用，以达到最佳治疗效果。