五味子酚对血管性痴呆小鼠学习记忆能力的影响

邓之荣++周世月++谭琳++王立++杨宏艳

摘 要：目的：研究五味子酚对血管性痴呆小鼠学习记忆能力的影响。方法：小鼠随机分为假手术组、模型组、五味子酚药物组（30、100 mg/kg，ip）。采用双侧颈总动脉结扎法建立血管性痴呆模型，给药2周后用Morris水迷宫测试小鼠学习记忆能力。结果：五味子酚能明显缩短痴呆小鼠找到平台的潜伏期和游泳路程。结论：五味子酚可改善血管性痴呆小鼠的学习记忆能力。

关键词：五味子酚 血管性痴呆 学习记忆

中图分类号：R749.16 文献标识码：A 文章编号：1674-098X（2015）01（a）-0026-01

血管性痴呆（vascular dementia，VD）是脑部机能减退而导致的一种认知功能缺损的综合征，主要与缺血性脑血管疾病有关。迄今为止，人类还未找到治疗血管性痴呆症的有效方法，且防治手段十分有限。双侧颈总动脉结扎能很好的模拟脑缺血过程，是制备血管性痴呆症的常用模型。本实验通过行为学实验观察五味子酚对痴呆模型小鼠的学习记忆的改善作用，观察五味子酚对血管性痴呆的疗效。

1 材料与方法

1.1 血管性痴呆模型复制方法

按文献方法，将小鼠用水合氯醛（350 mg/kg，ip）麻醉，消毒，颈正中切口，分离双侧颈总动脉，各穿一丝线备用。用小鼠动脉夹夹住颈总动脉，阻断血流15 min，并同时在距尾尖1 cm处剪断放血约0.3 mL，热凝止血。松开动脉夹灌注5 min后，再次阻断血流，重复上述步骤2次，缝合皮肤，术后每日肌注青霉素0.2万单位，连续3 d。假手术组只分离颈总动脉，穿丝线，但不阻断血流，尾部不放血，观察时间等与模型组相同。

1.2 动物分组与给药

健康昆明小鼠，体重20～30 g，由齐齐哈尔医学院实验动物中心提供。随机分为4组：假手术组、模型组、五味子酚药物组（30、100 mg/kg），每组15只动物。小鼠适应性饲养2天，小鼠连续腹腔注射五味子酚7天后，开始造模。模型组（造模后腹腔注射生理盐水，连续14 d）、五味子酚组（造模后五味子酚30 mg/（kg·d），100 mg/（kg·d），连续14 d）。造模2周后通过Morris水迷宫试验对小鼠进行学习和记忆成绩测试，观察其行为学改变。

1.3 Morris水迷宫实验

Morris水迷宫分两部分，前五天进行定位航行试验，第六天进行空间探索实验。平台放置于第二象限的中心，水面高出平台1.0 cm。每只小鼠每天接受2次训练，分别从两个不同的入水点开始，两次训练间隔1 min，记录小鼠找到平台的时间（逃避潜伏期）和找到平台的所经路程。如果小鼠在120 s内未找到平台，则潜伏期以120 s计算。空间探索实验中，移去平台，将小鼠从平台对角象限放入水中，自由游泳120 s，记录小鼠在平台所处象限停留的时间，用于测试小鼠对平台空间位置的记忆能力。

2 结果

水迷宫实验结果显示，与假手术组相比，双侧颈总动脉结扎的小鼠找到平台的潜伏期和游泳路程明显延长，两组相比，差异具有统计学意义（P<0.001），表明小鼠学习记忆功能明显损伤。而五味子酚在100 mg·kg-1剂量时，可显著缩短小鼠找到平台的潜伏期和游泳路程（P<0.01，P<0.05），表明五味子酚具有改善小鼠学习记忆的作用。见图1，A图是五味子酚对小鼠到达平台时间（s）的影响；B图是五味子酚对小鼠到达平台游泳路程（cm）的影响。模型组与对照组相比，###P<0.001；五味子酚药物组与模型组相比，*P<0.05，**P<0.01

3 讨论

血管性痴呆是发展中国家的人得痴呆症的首要原因，慢性脑缺血是研究血管性痴呆发病机理的重要组成部分，可导致持久性认知损伤。学习记忆障碍是人类血管性痴呆早发症状之一，Morris水迷宫是检测实验动物学习记忆能力的重要指标。本实验应用双侧颈总动脉结扎制备血管性痴呆的动物模型，用Morris水迷宫观察了五味子酚对痴呆模型小鼠学习记忆的影响。实验结果表明：与空白组相比，模型组动物找到平台的潜伏期和游泳路程明显延长，出现明显的空间学习记忆障碍，提示模型制备成功。与模型组相比，五味子酚可明显缩短小鼠找到平台的潜伏期和游泳路程，显著改善痴呆小鼠的学习记忆能力。

五味子酚是从中药五味子中提取的木脂素类成分之一。文献报道五味子酚具有显著的抗氧化活性，对氧化低密度脂蛋白（ox- LDL）引起的神经细胞损伤具有明显的保护作用[1]。其机制包括维持细胞内抗氧化成分谷胱甘肽水平、清除氧自由基、抑制凋亡信号通路的重要信号分子细胞色素C的释放。五味子酚对血管性痴呆的治疗作用可能与其抗氧化、清除氧自由基、减轻神经元的氧化应激损伤和凋亡有关。

参考文献

[1] YU L H，LIU G T.Schisanhenol attenuated ox-LDL-induced apoptosis and reactive oxygen species generation in bovine aorta endothelial cells in vitro[J].J Asian Nat Prod Res， 2008，10（7-8）：799-806.

[2] YU L H， LIU G T，SUN Y M， et al.Antioxidative effect of schisanhenol on human low density lipoprotein and its quantum chemical calculation[J].Acta Pharmacol Sin，2004，25（8）：1038-1044.

[3] Rincon F，Wright CB.Vascular cognitive impairment[J].Curr Opin Neurol，2013，26（1）：29-36.

[4] Dichgans M，Zietemann V.Prevention of vascular cognitive impairment[J].Stroke，2012，43（11）：3137-3146.