鹿肠毒血症的诊断

赵列平 黑龙江省农垦科学院哈尔滨特产研究所150038 卫喜明 黑龙江省农垦科学院畜牧兽医研究所150038

韩欢胜 黑龙江省农垦科学院哈尔滨特产研究所150038 张海燕 黑龙江省农垦科学院畜牧兽医研究所150038

鹿肠毒血症主要是由C 型、D 型魏氏梭菌毒素引起的以胃肠出血为特征的传染病，常呈散发流行，在国内养鹿场常有发生。

1 流行病学

该病的发生具有明显的季节性和条件性，但以6～10月多发，呈散发流行，同群膘肥体壮、食量大的鹿先发，而弱鹿则少发或不发。

2 临床症状

突然发病，一般10 小时内死亡，很少见到明显症状，个别病程2～3天。病鹿精神沉郁，离群独卧一隅，鼻镜干燥，反刍停止，腹围增大，口流涎，呼吸困难，体温升高至40～41℃。粪便带血呈酱红色，含大量黏液，有腥臭味，肛门及后肢常被血液污染。有明显疝痛症状，常呈四肢叉开、腹部向下用力姿势，个别鹿回头望腹。死前运动失调，后肢麻痹，口吐白沫，昏迷倒地死亡。

3 病理学诊断

剖检发现主要病理变化在胃肠道。腹腔有多量红黄色腹水流出，大网膜、肠系膜、胃肠浆膜明显充血和出血，呈黑红色。瘤胃充满未消化的食物，瓣胃和网胃轻微出血。真胃变化明显，胃底和幽门部黏膜脱落。小肠变化最为显著，外观呈“灌血肠样”，剖开有大量红紫色黏液流出，黏膜和肌层剥落。肾脏稍大，变软。肝稍肿大，个别有出血点和灰白色坏死灶。胸腔有多量淡黄色胸水流出。心脏扩张，冠状沟胶样浸润。心房和心室有紫黑色血块。心内膜和外膜有点状出血。肺充血和水肿。显微镜下可见胃肠黏膜层血管充血，上皮细胞脱落和淋巴细胞浸润。最突出的变化是黏膜的肠腺中出现大量杯状细胞。

4 病原学诊断

无菌条件下剪取肝病料或脾病料，用铂金耳钩入厌氧肉肝汤中，剪取碎病料小块，用铂金耳在葡萄糖血琼脂培养皿上划线接种。置37～38℃温箱中培养。

魏氏梭菌在厌氧肉肝汤中，培养5～6 小时即呈现均匀浑浊，并产生大量气体。在葡萄糖血琼脂上，菌落多为圆形、光滑、隆起、淡灰色，直径2～4mm，但也可形成圆盘形、边缘呈锯齿状、表面有辐射状条纹的“勋章”样大菌落。菌落周围有棕色溶血区，有时表现为双环溶血，内环透明、外环淡绿。魏氏梭菌可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸产气，能还原硝酸盐，不产生靛基质，可产生硫化氢，液化明胶，最突出的生化特性是对牛乳培养基的“暴烈发酵”。涂片可用铂金耳钩取该培养物，均匀涂于载玻片上，在酒精灯火焰上轻微干燥固定，用革兰氏染色方法染色。在800～1000倍显微镜下观察，可见粗大、两端稍方的正直杆菌，有的单在，有的成双排列，短链较少出现。

5 毒素检验

取死亡鹿回肠10～17cm 的肠内容物，用灭菌生理盐水稀释1～3 倍，充分混合后经3000 转/分钟离心15分钟，取上清液，通过除菌滤器过滤，用滤液对试验兔耳静脉注射2～4mL。如毒素含量高，10 分钟试验兔死亡；毒素含量低，试验兔30～60 分钟卧倒，心跳、呼吸加快，60 分钟以后恢复正常；若肠内容物不含毒素，试验兔不出现反应。

毒素中和试验。准备肠内容物滤液，小鼠6 只（分3 组），C 型、D 型抗毒素血清，灭菌生理盐水，注射器，6 号针头，试管3 支。取灭菌试管3 支，编为1、2、3 号，分别加入C 型、D 型毒素抗血清及生理盐水各0.1mL，并各加入肠内容物滤液0.5mL，混合均匀后在37℃下作用40 分钟。肌肉注射小鼠，第一组注射C 型抗毒素血清与肠内毒素的混合液；第二组注射D 型抗血清与肠内毒素的混合液；第三组注射生理盐水与肠内毒素的混合液，以作对照。如果第一组的小鼠死亡，第二组的小鼠不死，说明肠内毒素可被D 型毒素抗血清中和，不被C 型毒素抗血清中和，则为D 型魏氏梭菌毒素；如第一组的小鼠不死，第二组的小鼠死亡，说明肠内毒素可被C 型抗毒素血清中和，不被D 型抗毒素血清中和，则为C 型魏氏梭菌毒素。第三组小鼠均应死亡。