呼吸道感染苛养菌的分布及耐药特点

杨晓波，周璐坤，张方琼

（1.中国人民解放军第二五三医院检验科，内蒙古呼和浩特 010051；2.湖北秭归县人民医院检验科，湖北秭归 443600）

呼吸道感染苛养菌的分布及耐药特点

杨晓波1，周璐坤1，张方琼2

（1.中国人民解放军第二五三医院检验科，内蒙古呼和浩特 010051；2.湖北秭归县人民医院检验科，湖北秭归 443600）

目的了解该院呼吸道感染苛养菌的分布及耐药性分析，更好地服务临床，为临床诊疗提供参考依据。方法该院2012年1月至2014年11月从呼吸道感染患者痰共分离培养得到173株病原菌，选用法国梅里埃公司的API鉴定系统进行鉴定；药敏试验使用K-B法，选用英国Oxoid公司的MH琼脂、血琼脂平板和药敏纸片进行。结果在1 374株呼吸道感染患者痰培养中分离出苛养菌173株，其中未发现对青霉素中介或耐药的肺炎链球菌。卡他莫拉菌、流感嗜血杆菌对四环素的敏感率达80%以上，然而对肺炎链球菌的耐药率则高达80%；肺炎链球菌、流感嗜血杆菌对环丙沙星和左氧氟沙星的敏感率为100%；流感嗜血杆菌对第三代头孢菌素的敏感率为100%。结论对于苛养菌的感染，临床治疗应根据药敏试验结果，合理选用抗菌药物，以有效提高治愈率。

呼吸道感染； 苛养菌； 卡他莫拉菌； 肺炎链球菌； 流感嗜血杆菌； 耐药性分析

苛养性菌是一类生长需要特殊营养物质的细菌，与许多感染性疾病有关，其分离培养较为困难，又称为“难培养的细菌”。卡他莫拉菌、流感嗜血杆菌和肺炎链球菌都是临床上较为常见的呼吸道感染的苛养菌，当机体免疫力低下时，可引起呼吸道相关性疾病，如肺炎、支气管炎、急性中耳炎等，另外这些苛养菌还可以随着血液循环侵入到组织内部，引发脑膜炎、菌血症和心内膜炎等［1］。因此，对苛养性细菌的分离鉴定和药敏试验不仅是临床迫切的需要，也是衡量临床微生物实验室技术水平的重要标志。笔者对本院2012年1月至2014年11月分离得到的173株苛养菌的临床特点及耐药性进行分析，旨在为临床合理选用抗菌药物提供参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料 2012年1月至2014年11月，本院临床共对门诊和住院的呼吸道感染患者的痰标本共1 374例进行分离培养，苛养菌共计173株，卡他莫拉菌53株，肺炎链球菌89株，流感嗜血杆菌31株。其中门诊患者66例（4.8%），住院患者1 308例（95.2%）；男性共145例，女性共28例，平均年龄为76.8岁。

1.2 方法

1.2.1 标本采集 门诊患者在采集痰标本前先用清水或双氧水（30.0 mL/L）漱口，住院患者需在晨起后先用清水和双氧水（30.0 mL/L）漱口，然后进行深咳，弃用第一口痰，保留第二口痰，进行痰涂片镜检，合格标本的要求：白细胞大于25个/低倍镜视野、鳞状上皮细胞小于10个/低倍镜视野或者鳞状上皮细胞/白细胞小于0.4，或者是经过无菌毛刷刷取的痰标本。采集的标本应迅速接种到血琼脂平板和巧克力琼脂平板，放入35℃、5%CO2的培养箱孵育18～24 h，再进行常规分离培养。

1.2.2 细菌鉴定和药敏试验 按照《全国临床检验操作规程》第三版对所有标本进行分离、培养，严格按照无菌操作技术规范，同时接种血琼脂平板和巧克力平板。采用上海新苗 WJ-160A-Ⅲ型CO2培养箱，力康HFsafe-1200生物安全柜。将分纯的菌株选用法国梅里埃公司的API鉴定系统进行鉴定；选用英国Oxoid公司的MH琼脂、血琼脂平板和药敏纸片进行药敏试验，肺炎链球菌和流感嗜血杆菌的药敏结果按照美国临床实验室标准化委员会（CLSI）2013年版标准判断结果，卡他莫拉菌的药敏结果按照CLSI的2010年M45-A2版标准判定结果。

1.2.3 质控菌株 采用流感嗜血杆菌ATCC49247，肺炎链球菌ATCC49619标准菌株进行质控，质控合格方可进行药敏试验。

1.2.4 β-内酰胺酶检测 采用头孢硝噻吩纸片定性检测流感嗜血杆菌和卡他莫拉菌的β-内酰胺酶。

1.3 统计学处理 采用Whonet5.6系统进行统计学分析。

2 结 果

2.1 细菌分布 2012年1月至2014年11本院痰标本中共分离173株苛养菌，其中卡他莫拉菌53株，肺炎链球菌89株，流感嗜血杆菌31株。各年度苛养菌的分布情况详见表1。

2.2 药敏试验 卡他莫拉菌、肺炎链球菌和流感嗜血杆菌对15种抗菌药物的药敏试验结果见表2。检测出产β-内酰胺酶的卡他莫拉菌41株，流感嗜血杆菌9株。

3 讨 论

呼吸道感染（RTI）是一种常见多发病，高居门诊就诊患者人数的首位［2］。苛养菌主要引起RTI，通常以冬季带菌率较高，发病也增多。据统计，我国每年有近5亿人感染呼吸系统疾病，7岁以下儿童平均每人每年患急性呼吸道感染3～4次［3］。呼吸道感染是抗菌药物使用频率最高、用量最多的疾病。对于肺部重症感染的患者，至关重要的是从痰培养中及时找出病原菌，使临床快速准确地选择抗菌药物，能够对患者进行有效的治疗。

本次分析结果如表2所示，在1 374株呼吸道感染患者痰培养中分离出苛养菌173株，其中肺炎链球菌对万古霉素的敏感率100%，并且未发现对青霉素中介或耐药。卡他莫拉菌、流感嗜血杆菌对四环素的敏感率达80%以上，然而对肺炎链球菌的耐药率则高达80%；肺炎链球菌、流感嗜血杆菌对环丙沙星和左氧氟沙星的敏感率为100%，喹诺酮类药物适合成人使用，但由于其肾毒性作用不适合用于儿童；流感嗜血杆菌对第三代头孢菌素和利福平的敏感率为100%。对阿莫西林/克拉维酸的敏感率为90.0%，较之氨苄西林的敏感率（68.5%）提高了21.5%左右，这与国内相关文献报道基本相近［4-6］。另外，卡他莫拉菌对红霉素和阿奇霉素的敏感率为100.0%。卡他莫拉菌产β-内酰胺酶率高达77.3%，β-内酰胺酶的产酶率不断增高，在1976年前，世界上并无产β-内酰胺酶流行菌株的报道，然而20世纪80年代后期，英国报道90.0%的卡他莫拉菌产β-内酰胺酶。在中国台湾有97.8%的产酶菌株的报道［7］。RTI疾病治疗的关键在于及时地明确致病菌和合理使用抗菌药物。然而，由于滥用抗菌药物，导致患者菌群失调，耐药菌株逐年增多，耐药菌感染逐渐成为除癌症、心脑血管疾病和AIDS外威胁人类生命健康的第四大医学问题［8］。

目前，本院仍然存在以下问题：由于临床对微生物学检验的重要性认识不足，导致留取标本的合格率低；对于回报的检验结果，临床总以个人的“标准”加以衡量，受控于经验性用药的理念，致使耐药菌株不断增多的问题更加棘手，还时常被能够选择的抗菌药物较少而困扰；相应的检验设备和科研条件不足等，以上都是限制本院病原学诊断发展的重要影响因素。综上所述，苛养菌引起的呼吸道感染，临床治疗应按照《抗菌药物临床应用管理办法》，根据药敏试验结果，合理使用抗菌药物，以有效提高治愈率［9-12］。

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10.3969/j.issn.1673-4130.2015.17.049

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1673-4130（2015）17-2566-02

2015-04-08）