糖尿病及糖尿病并发冠心病患者血清sP-selectin、sE-selectin 水平变化及意义

刘艳秋 高美华 李红林 解长银 章海飞 (青岛大学医学院免疫学教研室，青岛 266071)

近年研究显示，我国糖尿病患者已超过9 200万，此外尚有约1.48 亿属于糖尿病前期，将有发展为糖尿病的趋势［1，2］。糖尿病血管并发症是糖尿病患者致死致残的主要原因［3］。在众多的黏附分子中，选择素家族备受关注。选择素在糖尿病各种血管事件如动脉粥样硬化、血栓形成、微血管损伤的病理生理过程中起着重要作用。本文对2 型糖尿病患者血清中sP 选择素、sE-选择素水平变化及相关因素进行研究，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 研究对象收集2014 年1 月～2014年6 月在本院就诊的患者，按照2003 年美国糖尿病协会(ADA)关于糖尿病(DM)、空腹血糖异常(IFG)、糖耐量异常(IGT)的诊断标准分为:①糖尿病前期(PDM)组32 例，男15 例，女17 例，30～77岁，平均(62.55±14.76)岁。包括空腹血糖异常(Impaired fasting glucose，IFG)，5.6 mmol/L≤空腹血糖(FPG)＜7.0 mmol/L，并且餐后2 h 血糖(P2hBG)＜7.8 mmol/L;或者糖耐量异常(Impaired glucose tolerance，IGT)，FPG ＜ 5.6 mmol/L，且7.8mmol/L≤2hPG ＜11.1 mmol/L。②2 型糖尿病组(T2DM 组)32 例，男17 例，女15 例，42～84 岁，平均(57.77± 9.95)岁。FPG ≥7.0 mmol/L 和(或)2hPG≥11.1 mmol/L。③糖尿病合并冠心病组:34 例，男性17 例，女性17 例，30 岁～84 岁平均年龄(61.33±15.06)岁。冠心病组 经Judkins 法冠状动脉造影检查确诊为冠心病者，即至少有一支冠脉内径狭窄≥50%，其中根据冠状动脉造影结果，疾病史上均先有糖尿病，后出现冠心病的患者。④选取同期在本院体检的健康者32 例为正常对照组(NC 组)，男15 例，女17 例，40～73 岁，平均(55.73±9.97)岁。排除各种急慢性感染、甲状腺功能异常、肝肾功能疾病和心功能不全、肿瘤、风湿等。

1.2 方法 采用Olympus(AU680)型自动生化分析仪测定空腹血清TG、CHOL、HDL-C LDL-C、FPG、HbA1C 含量，采用(MAGLUMI2000)全自动化学发光仪测定空腹血清FINS 含量，血清sP-选择素、sE-选择素用酶联法。试剂盒是由美国Rapidbio(RB)公司提供，操作按说明书。主要仪器包括:北京普朗公司的DNM-9602 型酶标仪和天津通利信达仪器厂生产的DH3600A 型恒温箱。

1.3 统计学处理 采用SPSS19.0 统计软件对数据进行分析和处理。经过正态性检验，各组检测结果均符合正态分布，以±s 表示;组间比较t 检验;各指标间相关性采用Pearson 相关分析。

2 结果

2.1 各观察组例数、性别比、年龄、DBP、CHO、LDL均无统计学差异(P ＞0.05)。糖尿病前期组HbA1C、FINS、HOMA-IR、sP-selectin、sE-selectin 高于正常对照(P ＜0.01～0.05);单纯糖尿病组SBP、FBG、TG、HbA1c、FINS、HOMA-IR、sP-selectin、sE-selectin 显著高于正常对照组(P ＜0.01);单纯糖尿病组FBG、HbA1c、FINS、HOMA-IR 高于糖尿病前期组(P ＜0.01～0.05);单纯糖尿病组HDL-C 显著低于健康对照组和糖尿病前期组(P ＜0.01);糖尿病合并冠心病组BMI、SBP、FPG、TG、HbA1C、FINS、HOMA-IR、sP-selectin、sE-selectin 均高于正常对照组(P＜0.01～0.05);糖尿病合并冠心病组BMI、SBP、FBG、TG、HbA1C、FINS、HOMA-IR、sP-selectin、sE-selectin 高于糖尿病前期组(P ＜0.01～0.05);糖尿病合并冠心病组BMI、FBG、FINS、HOMA-IR、sP-selectin 高于单纯糖尿病组(P ＜0.01～0.05);糖尿病合并冠心病组HDL-C 低于健康对照组和糖尿病前期组(P ＜0.01～0.05)。见表1、2。

表1 各组观察指标的比较(±s)Tab.1 Comparison with levels of each observation indexes (±s)

表1 各组观察指标的比较(±s)Tab.1 Comparison with levels of each observation indexes (±s)

Note:1)vs NC P ＜0.01，2)vs NC P ＜0.05，3)vs PDM P ＜0.01，4)vs PDM P ＜0.05，5)vs DM P ＜0.01.

表2 各组空腹胰岛素、胰岛素抵抗指数、sP-selectin、sE-selectin 水平的比较(±s)Tab.2 Comparison with each observation levels of FINS，HOMA-IR，sE-selectin and sP-selectin(±s)

表2 各组空腹胰岛素、胰岛素抵抗指数、sP-selectin、sE-selectin 水平的比较(±s)Tab.2 Comparison with each observation levels of FINS，HOMA-IR，sE-selectin and sP-selectin(±s)

Note:1)vs NC P ＜0.01，2)vs NC P ＜0.05，3)vs PDM P ＜0.01，4)vs PDM P ＜0.05，5)vs DM P ＜0.01.

表3 sP-selectin、sE-selectin 与临床资料的相关性Tab.3 Correlation between sP-selectin，sE-selectin and clinical data

2.2 Pearson 相关性分析结果 血清sP-selectin 与FBG、FINS、TG、HbA1C、HOMA-IR 呈正相关(P 均＜0.01);血清sE-selectin 与FBG、FINS、TG、HbA1C、HOMA-IR 呈正相关(P 均值为＜0.01)，与HDL-C负相关(P 均 ＜0.05)，sP-selectin 和sE-selectin 与BMI、SBP、DBP、CHO、LDL-C 无相关性(P 均值为＞0.05)。见表3。

2.3 sP-selectin 与sE-selectin 相关性分析(r=0.592 3，P ＜0.001)，见图1。

3 讨论

糖尿病是以血循环中葡萄糖水平持续升高为基本特征的临床代谢综合征，其主要特征为胰岛素抵抗和(或)胰岛素分泌不足。胰岛素抵抗作为代谢综合征的核心环节，可进一步诱导机体产生葡萄糖调节受损、高血压、血脂紊乱等症状［4］。

近几年来研究发现，2 型糖尿病微血管及大血管并发症发生发展过程中慢性炎症起重要作用，炎症论被提了出来［5］。免疫调节因子在糖尿病尤其是糖尿病并发症发病机制中所起的作用正逐渐为人们所关注［6］。研究发现，黏附分子家族的Ca2+依赖外源凝集素一族P-选择素和E-选择素在感染、创伤、缺血再灌注等病理生理过程中，特别是在炎症早期发展过程中起重要作用［7］。

图1 sP-selectin 与sE-selectin 之间的相关性Fig.1 Correlation between sP-selectin and sE-selectin

P-选择素即CD62P，是一种高糖基化的糖蛋白，又被称为跨膜单链糖蛋白，与E-选择素及L-选择素同属于选择素家族的成员。P-选择素是相对分子质量约140 KU 的跨膜蛋白，是凝血酶活化的血小板和血管内皮细胞上的白细胞黏附受体。它包含1 个氨基末端的碳水化合物识别域、表皮生长因子、9 个重复区域、1 个跨膜结构域和胞质尾区。P-选择素有两种，即单体可溶性P-选择素(TPS)和膜P-选择素(MPS)［8］。近年来，随着分子生物学发展，对P-选择素的结构、功能、调控及病理生理作用进行了较为深入的研究。查阅文献发现［9］，P-选择素的表达受体内外许多调节因子的影响，静息时，内皮细胞上的P-选择素含量甚微，当受到炎性反应因子刺激后，P-选择素的表达显著增加。Gokularishnam 等［10］研究发现，胰岛素抵抗的患者胰岛素水平增高，同时伴随血浆P-选择素水平增高;孙晓军等研究发现［11］，检测可溶性P-选择素，可作为2 型DM 病情判定以及治疗效果观察。Yngen 等［12］也进行了相关研究，他认为胰岛素抵抗可以促进P-选择素高表达，同时P-选择素高表达也加重了胰岛素抵抗，促进血小板活化;高血糖对脂肪代谢具有调节作用，血糖升高时常伴有高胆固醇血症及高三酰甘油血症，研究证实高胆固醇血症可引起血浆P-选择素水平升高，并且与LDL 具有相关性［13］。有研究证实P-选择素在急性心肌梗死疾病的发生发展过程中担负着重要角色［14］。冠心病发生涉及血管内皮功能、血小板、凝血、纤溶因子等一系列生物分子的参与。冠心病患者P-选择素水平明显升高，和冠状动脉病变程度相关，可预测冠心病严重性［15］。糖尿病已被大量流行病学调查和临床研究证实是心血管病变的危险因素。近年来随着血栓形成和血小板聚集学说的深入研究，给冠心病的病因研究及早期预防和治疗带来了革命性的影响。P-选择素作为上述学说的重要标志物和介导物［16，17］。本研究结果显示sP-选择素与FPG、FINS、HBA1C 呈高度正相关，提示血清sP-选择素随着血糖和胰岛素的水平升高而升高。糖尿病并发冠心病组患者血清sP-选择素水平明显高于糖尿病前期和单纯糖尿病组患者;血清sP-选择素水平与HOMA-IR 呈高度正相关，提示血清sP-选择素水平与胰岛素抵抗密切相关，血清sP-选择素水平的增高是2 型糖尿病及其并发冠心病发生发展的高危因素之一。

E-选择素属于人类白细胞分化抗原CD62E，为细胞因子激活血管内皮细胞表达的110 kD 跨膜糖蛋白，其相对分子量为115 000，由一系列蛋白区域片段构成，其结构的复杂性决定了功能的瞬时性和特异性。E-选择素(LECAM-2、ELAM-1)有一个末端唾液酸残基和至少一个岩藻糖残基。对E 选择素糖识别的结构调查显示，有许多小分子和大分子的多糖结合到E 选择素上，如唾液酸Lewisx 四糖域(α2-3)、半乳糖(β1-4)、葡萄糖。此外，对E 选择素的生化结构进行观察，确认E 选择素含有的唾液酸化Lewisa 抗原表位的寡糖，是外源凝集素识别的最小低聚糖［18］。E-selectin 是黏附分子成员。黏附分子是一类调节细胞与细胞间、细胞与细胞外基质相互识别、相互黏着及信号传递，起黏附作用的糖蛋白分子。在细胞的生长发育、免疫调节、炎症反应、组织修复和肿瘤转移等生理、病理过程中起重要作用。血管内皮细胞、白细胞及其他多种细胞可表达黏附分子，细胞表面的黏附分子脱落后进入血液，成为可溶性黏附分子，二者成平行关系。有研究显示，Eselectin 与心脑血管事件的发生相关［19］，许多研究证明，2 型糖尿病患者，甚至糖耐量降低，其血清各种黏附分子水平包括sE-selectin 显著高于正常人群。Matsumoto 等［20］的研究发现，糖尿病合并大血管、微血管病变组血清sE-selectin 水平均明显高于无血管病变组。sE-选择浓度可以是一种生物标记，用于指示随后的发展代谢性疾病，尤其是心血管疾病［21］。E-选择素及可溶性E 选择素在全身性炎症反应状态下水平升高［22］，本研究结果显示sE-选择素与FPG、FINS、HBA1C 呈正相关，糖尿病并发冠心病组患者血清sE-选择素水平高于糖尿病前期组，血清sE-选择素水平与HOMA-IR 呈正相关，提示血清sE-选择素参与胰岛素抵抗，血清sE-选择素水平的增高也是2 型糖尿病及其并发冠心病发生发展的高危因素之一。

综上所述，sP-selectin、sE-selectin 与糖尿病的发生有关，同时在糖尿病的发生与发展中起重要作用。这二者高度相关(r=0.5923，P ＜0.001)，sP-selectin和sE-selectin 作为血小板、内皮细胞活化的标志物，在糖尿病前期阶段就已经明显升高，并随着糖代谢紊乱程度的加重而逐渐升高。因此，有效监测sPselectin 和sE-selectin 对早期血管病变的诊断，对预防大血管并发症的发生具有重要意义。

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