干片式生化仪校准品基质效应研究*

叶桂样,黄瑞勋,卓雪芽,陈玉祯,黄 艳(广东省佛山市中医院 528000)



·论 著·

干片式生化仪校准品基质效应研究*

叶桂样,黄瑞勋,卓雪芽,陈玉祯,黄 艳
(广东省佛山市中医院 528000)

目的 评估强生VITROS FUSION 5.1全自动干片式生化仪校准品(KIT1：LOT0112；KIT3:LOT0322)两个校准包的基质效应。方法 以Olympus AU 5400全自动生化分析仪为参比系统，VITROS FUSION 5.1干化学分析仪为待评估系统，参照CLSI EP14-A2文件对KIT1及KIT3校准包每个校准包3个水平随机排列在20份新鲜的患者标本之中，用待评估系统和参比系统分别对患者标本、KIT1进行血糖(GLU)、尿素(UREA)、肌酐(CR)、尿酸(UA)测定，对KIT3校准包进行天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)测定。结果 KIT1校准包中GLU、CR相对于参比系统不存在基质效应，其他项目至少有一个水平存在基质效应，KIT3校准包中所有项目至少有一个水平存在基质效应。结论 在日常检测中由仪器校准品基质效应造成不同系统间结果的差异是不能忽视的，应尽量减少基质效应带来的影响。通过定期开展不同仪器间比对是减少其影响的手段之一，也是实验室标准化过程中不可或缺的一部分。

基质效应； 校准品； 干片式生化分析仪

干化学分析是相对传统湿化学分析而言的，即将所需分析试剂全部固化在多层复合膜上，分析时只需将少量待检样品加在膜上即可进行定性或定量分析，由于其具有优异的抗干扰能力，操作简便,可满足急诊标本检测，因此干片式全自动生化分析仪普遍存在于各大医院检验科，而本科室所用的强生VITROS FUSION 5.1全自动干片式生化仪便是其中的代表机型。但由于方法学差异导致所测急诊项目结果与传统水化学测定的结果产生差异，究其原因，校准品的基质效应是不可忽视的一环，尽管强生VITROS FUSION 5.1是一个全封闭系统，具有良好的溯源性，但其校准品为粉剂非新鲜血清，校准前需用配套溶剂溶解，因此基质效应是不可避免的。本课题以Olympus AU5400全自动生化分析仪为参比系统，参照美国临床实验室标准化协会(CLSI)文件EP14-A2[1]对强生VITROS FUSION 5.1全自动干片式生化仪急诊项目血糖(GLU)、尿素(UREA)、肌酐(Cr)、尿酸(UA)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK) 校准品的基质效应进行了研究，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 取40份新鲜标本血清，来自测试当天在本院住院的患者，标本选择应标本选择应涵盖高、中、低水平，在空腹情况下用真空采血管抽取静脉血5 mL，2 h内分离出血清，4 h内进行测定。

1.2 方法

1.2.1 仪器与试剂 以Olympus AU5400全自动生化仪参比系统，AST、LDH、CK、GLU、UREA、Cr、UA试剂及配套校准品均购自上海华臣生物科技有限公司。

1.2.2 待评系统 以强生VITROS FUSION 5.1全自动干片式生化仪待评系统，AST、LDH、CK、GLU、UREA、Cr、UA试剂包和校准包购自美国强生公司，其中GLU、UREA、Cr、UA校准包为KIT1批号为0112；AST、LDH、CK校准包为KIT3，批号为0322，各定标包分高、中、低3个水平。

1.3 方法

1.3.1 对Olympus AU5400全自动生化仪和强生VITROS FUSION 5.1全自动干片式生化仪按照操作规程进行操作、常规的检查及维护，使两者处于最佳的工作状态，根据CLSI EP9-A2[2]文件或EP15-A2[3]确保在这两台仪器上测得的结果具可比性。

1.3.2 按照CLSI EP14-A2文件，将KIT1校准包高、中、低3个水平的校准品各1份随机排列在20份新鲜的患者标本中，用VITRO FUSION5.1 全自动干生化分析仪对此23份标本作GLU、UREA、Cr、UA重复3次测定，每个标本共得到3个结果。然后再用Olympus AU5400全自动生化分析仪对此23份标本进行检测，步骤同上。同理，将KIT3校准包高、中、低3个水平的校准品各1份随机排列在20份新鲜的患者标本中，用VITRO FUSION5.1 全自动干生化分析仪对此23份标本作AST、LDH、CK重复3次测定，每个标本共得到3个结果，然后再用Olympus AU5400全自动生化分析仪对此23份标本进行检测，步骤同上。

2 结 果

GLU、UREA、Cr、UA95%预期区间见表1，各项目双侧95%预测范围曲线见图1～4；AST、LDH、CK95%预期范围见表2，各项目双侧95%预测范围曲线见图5～7。

表1 KIT1校准包各项目95%预期区间

图1 GLU基质效应评价图

图2 Cr基质效应评价图

图3 UA基质效应评价图

图4 UREA基质效应评价图

图5 AST基质效应评价图

续表2 KIT3校准包各项目95%预期范围(U/L)

图6 CK基质效应评价图

图7 LDH基质效应评价图

3 讨 论

基质效应早期是在酶活力测定中用人工制备的参考物质时发现的，是指检测系统检测样品中的分析物时，处于分析物周围的所有非分析物质对分析物参与反应的影响。按照CLSI文件EP14-A2定义的基质效应，是指：(1)标本中除分析物以外的其他成分对分析物测定值的影响；(2)基质对分析方法准确测定分析物的能力的干扰。产生基质效应的原因与以下4个主要因素的相互作用密切相关：仪器的设计、试剂的组成成分、测试方法的原理、质控材料的组成及处理技术等，可见基质效应在酶法分析及免疫化学分析中普遍存在，其对测定结果准确性的影响是不能忽视的，而且越来越受到人们的重视[4-9]。一般认为新鲜患者标本不存在基质效应，但校准品、室内质控品和室间质评品在制造过程中其理化性质发生改变，其基体与人源性的血清不同，在检测中产生的基质效应是客观存在的。有人曾对室内质控品在VITROFUSION5.1 全自动干生化分析仪上的基质效应作过报道[10]，但是由于干化学系统使用配套试剂、校准物、质控物均形成一个完整的检测系统，具有较好的量值溯源性能，其校准品产生的基质效应鲜有报道，而本研究恰好填补这方面的空白。本研究显示，KIT1校准包中GLU、CR这两个项目相对于参比系统AU5400不存在基质效应影响，并不是说没有基质效应，而是基质效应给GLU、CR这两个项目带来的差异刚好落在95%预测区间曲线内，根据EP14-A2的要求，可以认为基质效应给GLU、CR这两个项目在干化学与水化学两个系统间造成的结果差异可以忽略，但是KIT1校准包中的其余项目UREA、UA和KIT3校准包中的项目AST、CK、LDH都存在着一个或两个水平的基质效应影响，提示对应某个水平上的基质效应影响是不能忽略的，检验人员在日常检测工作中就要引起注意，当然除了校准品的基质效应外，还有质控品、试剂、操作人员等因素造成这两个系统间的结果差异。然而由校准品基质效应带来的差异却是方法间差异的根本原因，要减少校准品基质效应带来的影响，通过定期开展不同仪器间比对是减少其影响的手段之一，也是实验室标准化过程中不可或缺的一部分。

[1]CLSI.EP14-A2.Evaluationofmatrixeffects;approvedguideline[S].Wayne,PA,USA:CLSI，2008.

[2]CLSI.EP9-A2.Methodcomparisonandbiasestimationusingpatientsamples;approvedguideline[S].2nd,ed.Wayne,PA,USA:CLSI,2008.

[3]CLSI.EP15-A2.Userdemonstrationofperformanceforprecisionandaccuracy;approvedguideline[S].Wayne,PA,USA:CLSI,2008.

[4]张传宝,陈忠余,马嵘,等.血清肌酐测定基质效应的研究[J].中华检验医学杂志,2009,32(5):515-520.

[5]周伟燕,赵海舰,张江涛,等.血清总甘油测定基质效应的研究[J].中华检验医学杂志,2008,31(5):568-573.

[6]邹荣良.基质效应在临床化学检测中的影响研究[J].中国误诊学杂志,2009,9(34):8391-8392.

[7]郑松柏,王建兵,黄宪章,等.血清ALT与AST测定的基质效应评价[J].临床检验杂志,2011,29(5):391-393.

[8]张兴宗,林云,张清文,等.临床化学室间质评不满意结果项目分析处理的重要性[J].检验医学与临床,2012,9(8):943-945.

[9]苏武锦,张翙,黄广.肝素和EDTA-K2抗凝剂引入基质效应的评价及分析[J].检验医学与临床,2013,10(16):2124-2126.

[10]叶桂样,黄瑞勋,黄艳.日常室内质控品在干片式生化分析仪上的基质效应分析[J].国际检验医学杂志,2013,34(15):2012-2013.

Study on matrix effect of calibrator of dry type biochemical analyzer*

YEGui-yang,HUANGRui-xun,ZHUOXue-ya,CHENYu-zhen,HUANGYan
(FoshanMunicipalHospitalofChineseTraditionalMedicine,Foshan,Guangdong528000,China)

Objective To evaluate the matrix effect of the calibration packages of calibrator KIT1:LOT 0112 and KIT3:LOT 0322 for the Johnson VITROS FUSION 5.1 automatic dry chip analyzer.Methods Using the Olympus AU5400 automatic biochemistry analyzer as the reference system,and the VITROS FUSION 5.1 dry type chemical analyzer as the undetermined evaluation system,referring to the NCCLS EP14-A2 files,three levels for each package in the calibration packages of KIT1 and KIT3 were randomly arranged in 20 fresh patient samples,GLU,UREA,Cr and UA were detected for the calibrator KIT1 and AST,LDH and CK were detected for the calibrator KIT3 by the reference system and undetermined evaluation system.Results Compared with the reference system,GLU and CR in the KIT1 calibration package had no matrix effects and other items had at least a level with the presence of matrix effects and among all items in KIT3 calibration package at least a level had the presence of matrix effect.Conclusion In daily detection,the difference between the results of different systems caused by the matrix effect of the instrument calibrator can not be ignored.Therefore the effect of matrix effect should be reduced as far as possible.Launching the comparison among different instruments at regular intervals is one of reducing its influence,and also an indispensable part of laboratory standardization.

matrix effects; calibration material; dry type chemical analyzer

广东省佛山市卫生局医学科研立项课题(2013149)。

叶桂样，男，主管检验技师，本科，主要从事临床生物化学检验工作。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.22.014

A

1672-9455(2015)22-3329-03

2015-06-05

2015-09-11)