6例维吾尔族患者A3B亚型检测与血清学分析

宋小川，李凌波

(1.新疆医科大学第一附属医院输血科，乌鲁木齐 830011；2.长春博迅生物技术有限责任公司，长春 130102)



·临床探讨·

6例维吾尔族患者A3B亚型检测与血清学分析

宋小川1，李凌波2△

(1.新疆医科大学第一附属医院输血科，乌鲁木齐 830011；2.长春博迅生物技术有限责任公司，长春 130102)

目的 对新疆维吾尔族患者中A3B亚型进行血清学检测并分析，为临床安全输血提供借鉴。方法 采用微柱凝集技术对住院患者进行常规血型检测，对正定型为AB型，且红细胞与抗-A出现“混合视野”凝集的血型进一步结合血清学吸收放散试验等进行鉴定。结果 在45 326例维吾尔族患者中检出AB型8 450例，其中红细胞与抗-A出现“混合视野”凝集6例，结合唾液ABH血型物质检测及吸收放散等试验最终判断该6例为A3B亚型。结论 A3B亚型由于其A抗原性较弱，正定型容易误定为“B型”，为避免误判，血型鉴定一定要做正反定型，并注意观察凝集强度，防止亚型漏检给临床输血带来隐患。

A3B亚型； 微柱凝集技术； 分析； 输血

ABO血型亚型是表型，主要是经血型血清学试验以抗原性弱为主要特征的多种表型，A1和A2是血型血清学方法确定的最重要的A型红细胞亚型，其余还包括A的弱亚型A3、Ax、Am、Ael等，其A抗原表达逐渐减弱，A3型红细胞的最大特征是混合视野凝集，即A3细胞与抗-A和大多数抗-AB孵育后出现一些由数个红细胞形成的小凝集块，并被绝大部分游离的非凝集红细胞包围，在微柱凝集技术则表现为离心后凝集的红细胞位于凝胶顶部而阴性红细胞沉于微柱凝胶的尖底部的双群(混合凝集)形式，A3B即是AB血型的一种亚型[1-3]。ABO血型的表型，通常是由正反定型二者决定的，正定型检测红细胞抗原，反定型检测人血清中抗体，由于部分ABO亚型由于其抗原性弱常表现为正定型凝集强度弱、混合视野凝集或正反定型不相符合，因此只有正反方向ABO血型抗原和抗体的同时检测，才能正确完整地进行ABO血型定型。本研究自2013年1月至2015年1月采用微柱凝集技术对45 326例维吾尔族患者血液标本进行ABO血型正反定型，共检出AB型8 450例，并对其中6例红细胞与抗-A出现“混合视野”的血型进一步结合血清学吸收放散试验等进行鉴定，最终判断为A3B亚型，现将研究结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 45 326例血液标本来自新疆医科大学第一附属医院2013年1月至2015年1月收治的维吾尔族住院患者，其中男24 672例，女20 654例，年龄0～87岁。AB型中发现6例其红细胞与抗-A出现“混合视野”凝集，需进一步结合血清学吸收放散试验等进行鉴定。

1.2 试剂与仪器 ABODE血型检测卡(微柱凝胶)，ABO血型反定型试剂盒(人血红细胞)，由长春博迅生物技术有限责任公司生产；抗-A、抗-B血型定型试剂(单克隆抗体)由北京金豪制药股份有限公司生产；单克隆抗-AB、抗-H、抗-A1由德国Bio-Rad Medical Diagnostics GmbH公司生产，以上所有试剂均在效期内使用。人血清抗-A、抗-B及A1B、A2B型红细胞试剂由本科室自制。BYL型血型血清学多用离心机由长春博研医学生物仪器公司生产；电热恒温水槽由上海申贤恒温设备厂生产。

1.3 方法 样本ABO血型鉴定，采用微柱凝胶卡式法及试管法，试管法分别在不同温度条件下检测，卡式法按厂家说明书操作，试管法按文献[4]操作；红细胞吸收放散试验、唾液中HAB血型物质测定均按文献[4]操作。

2 结 果

2.1 ABO血型鉴定(微柱凝集卡式法) 6例血样经卡式法检测，正定型均显示为AB型，且6例样本红细胞均与抗-A出现“双群”(混合凝集)形式，反定型均为AB型。

2.2 ABO 血型鉴定及H 抗原检查(试管法) 见表1。

表1 6例患者ABO血型鉴定及H抗原检查(试管法)

注：“mf”为混合视野凝集。

2.3 红细胞吸收放散试验 6例患者样本均取洗涤3次后的红细胞悬液(1 mL)分别与等量人血抗-A、抗-B血清混合，4 ℃吸收1 h，洗涤后经56 ℃热放散；取放散液与4% A1型及B型红细胞悬液反应发生凝集，证实患者红细胞上存在A及B抗原。

2.4 唾液中H及AB血型物质测定 6例患者唾液中，2例未测到A、B物质，只含有H物质，为非分泌型；4例唾液中有A、B及H物质，为分泌型。

2.5 红细胞H物质活性强度测定 将6例患者红细胞及正常成人A1、B、O、A1B、A2B型红细胞分别与抗-H反应，结果凝集强度分别为+++、-、++、++++、-、+。

3 讨 论

血型是人类的一种遗传性状，当前已发现的人类血型系统达到33个、血型抗原集合7个[5-6]。ABO血型系统是与人类关系最密切的一个，ABO血型的遗传规律和分布能够很好地反映出种族的延续和早期人类的迁徙情况，对不同地区人群血型的研究，在科学地解释某些疾病高发的相关问题及对疾病的预防和研究等有着重要的意义。维吾尔族是新疆地区最主要的少数民族，关于维吾尔族ABO血型分布的状况已有诸多研究，有研究显示，乌鲁木齐地区健康维吾尔族体检者ABO血型表型分布是A>B>O>AB，其中AB型最少，占16.46%[7]。本研究检测了维吾尔族患者45 326例，检出AB型8 450例，占18.64%，与上述报道类似。但在检出的AB型中，经卡式法检测发现有6例正定型红细胞与抗-A出现“混合视野”的格局，反定型正常，排除人为及疾病因素后，怀疑为ABO亚型，遂通过试管法定型并结合血清学吸收放散试验等进行了验证。

在ABO血型亚型的鉴定中，一般可根据受检者红细胞抗原与相应血清抗体反应的强弱、血清中抗体的特异性及分泌型人血型物质的性质及量来判断。在本试验，6例样本红细胞与试管法中单克隆抗-A在4 ℃、室温、37 ℃均发生弱凝集(混合凝集)，说明其红细胞上存在A抗原(吸收放散试验亦证实)，唾液型物质测定中也有4例分泌型证实含有A、B及H物质，可见6例样本均应为AB型而不是B型，这也与反定型结果一致。A3(或A3B)型最重要特征就是混合视野凝集外观，即A3(或A3B)红细胞与抗-A混合后出现一些由数个红细胞形成的小凝块，并被绝大部分游离的非凝集红细胞包围，少部分A3(或A3B)型人的血清中含有抗-A1。本试验研究显示，发现的6例患者均是红细胞与抗-A混合后出现混合视野(或卡式法的双群)，但血清中均含有抗-A1，只要能分辨弱凝集与混合视野凝集，在正反定型中已可初步定为A3B亚型。

A2B是AB型的一个最常见的亚型，其与A3B亚型血清学特征一致的是红细胞上均不含A1抗原，仅含A抗原，血清中可能含有抗-A1抗体。二者主要区别即在于红细胞与抗-A反应的强度及是否存在混合凝集视野，有研究认为这应与不同亚型红细胞上的A抗原表达有关[8]。红细胞H物质活性强度测定可以帮助部分鉴别ABO亚型，常见的ABO血型成人红细胞H抗原性从强到弱依次顺序为O>A2>B>A2B>A1>A1B，而A3≥A2。本试验结果显示，6例患者红细胞及健康成人A1、B、O、A1B、A2B型红细胞分别与抗-H反应，H抗原性从强到弱依次为O>患者红细胞>B>A2B>A1=A1B，由此也可判断样本非A2B，而为A3B亚型。

A3B亚型由于其A抗原性较弱，正定型容易误定为“B型”，引起ABO血型的误判[9]。尤其需注意的是，A3B亚型血型定型更容易被定为AB型，在不做反定型情况下，如血清中出现了抗-A1抗体，输血输入正常AB型血液也会引起溶血性输血反应，威胁患者健康[10]。研究认为，对于诸如此类抗原减弱的患者必须认真咨询其血型，并进行吸收放散试验、唾液型物质检测，监测红细胞表面H抗原强度、红细胞与抗-A、抗-B、抗-AB的反应情况，甚至做ABO血型基因鉴定确定血型，并保证同型输血或输入O型红细胞，以保障患者输血安全[11-12]。

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吉林省科技发展计划资助项目(20150307011YY)。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.15.044

A

1672-9455(2015)15-2245-03

2015-02-25

2015-04-15)

△通讯作者，E-mail：lilingbo@bioxun.com。