血清胸苷激酶－1水平在鼻咽癌患者治疗过程中的动态变化及与病理学特征的关系

李 军，宋秋灵

（山东菏泽市立医院，山东菏泽274000）

鼻咽癌（NPC）是国内常见的头颈部恶性肿瘤，全球4／5发病人口均在我国，南方各省是鼻咽癌的高发区。鼻咽癌早期症状无特征，容易误诊或漏诊，男性发病高于女性［1－2］。目前鼻咽癌的诊断依据除了取组织行病理检查联合MRI和CT影像学，还增加检测血清胸腺嘧啶脱氧核苷激酶（thymidine kinase，TK），即胸苷激酶，以提高诊断率降低误诊率。TK中的胸苷激酶－1（TK1）是TK家族中研究较为深入的成员，TK1与DNA合成相关，在临床用于评估增殖细胞增殖度和恶性程度［3－4］，恶性肿瘤患者细胞过度增殖，DNA 合成增强，血清TK1则现动态增加，那么鼻咽癌患者治疗过程中TK1动态增加与病理特征的关系如何，本课题就此展开研究。

1 资料与方法

1．1 一般资料 经院内伦理委员会同意，收集本院2010～2013年在放疗科收治且经病理确诊的鼻咽癌患者35例，年龄（53．6±10．7）岁。TNM 分期：Ⅰ期2例，Ⅱ期10例，Ⅲ期14例，Ⅳ期9例；淋巴结转移18例，无淋巴结转移17例；高中分化鳞癌9例，低分化鳞癌16例，未分化癌10例。所有病例接受标准的放射治疗。选择同期鼻咽部炎症患者20例为对照组，包括8例扁桃体炎、7例急慢性咽炎和5例鼻前庭囊肿。所有受试者均签署知情同意书。排除标准：已接受过放疗或化疗的鼻咽癌患者；伴心、肝、肺和肾功能异常者，远处转移，有感染表现，卡氏功能状态评分标准（KPS）＜70；血红蛋白小于90 g／L；既往有除鼻咽癌恶性肿瘤病史；先天性或获得性免疫缺陷性疾病者；6个月内有献血史者；维生素缺乏者；处于月经期、哺乳或妊娠期者。两组年龄、BMI、性别比、血红蛋白、功能状态评分差异无统计学意义（P＞0．05）。

1．2 方法 鼻咽癌患者均接受根治性放疗。Ⅰ期和Ⅱ期患者采用单纯放射治疗，Ⅲ期和Ⅳ期患者给予铂类辅助化疗1个疗程后进行放疗，采用直线加速器6MVX线分割照射，每次2 Gy，5次／周，照射剂量：鼻咽部组织70Gy，颈淋巴结转移者70 Gy，颈淋巴结未转移者行预防性照射60Gy，疗程6周［5］。鼻咽部炎症患者给予对症治疗。

1．3 指标检测［6］

1．3．1 检测治疗前后的血清TK1 采用印迹免疫－增强化学发光法检测血清TK1。所有患者分别在治疗前和治疗结束后5d内抽取空腹静脉血5mL，鼻咽部炎症者于体检日空腹抽静脉血5mL，所有收集的全血，离心分离血清。

1．3．2 治疗前鼻咽组织的TK1表达 采用免疫组化法，将石蜡包埋的组织切片、脱蜡、水化，滴加一抗鼠抗人TK1多克隆抗体，对照采用PBS，滴加二抗，固封，观察。TK1阳性为细胞质为棕黄色或棕褐色。

1．4 统计学处理 采用SPSS15．0软件进行统计学处理，将计数资料采用例数或构成比表示，计量资料采用x±s表示，组间比较采用χ2检验或组间方差分析，α＝0．05为检验水平，P＜0．05为差异有统计学意义。

2 结 果

2．1 两组治疗前后TK1变化 治疗前后，对照组的TK1无显著变化（P＞0．05）；与对照组比，治疗前后鼻咽癌组的TK1均较高（P＜0．05）；鼻咽癌组治疗前后TK1差异有统计学意义（P＜0．05），见表1。

表1 两组治疗前后TK1变化（x±s，pmol／L）

2．2 鼻咽癌患者治疗前后血清TK1水平与病理学参数分析 治疗前后，鼻咽癌Ⅰ～Ⅱ期的TK1显著低于Ⅲ～Ⅳ期（P＜0．05），无淋巴结转移TK1显著低于淋巴结转移（P＜0．05），颈神经未侵犯显著低于颈神经侵犯（P＜0．05），颅底未受侵显著低于颅底受侵（P＜0．05），未分化癌显著高于高中分化鳞癌和低分化鳞癌（P＜0．05），见表2。

表2 鼻咽癌患者治疗前后血清TK1水平与病理学参数分析

续表2 鼻咽癌患者治疗前后血清TK1水平与病理学参数分析

2．3 鼻咽癌患者治疗前病理学参数TK1表达情况 TNMⅣ期、淋巴结转移、颈神经侵犯TK1表达较高（P＜0．05），见图1。

图1 鼻咽癌患者治疗前病理学参数TK1表达情况

3 讨 论

TK1参与细胞分裂增殖，与DNA合成呈正相关，正常细胞基本不表达TK1，外周血几乎检测不到TK1。恶性肿瘤TK1活性是正常细胞的4倍，TK1在细胞周期的不同时相表达呈波动态，G1／S期逐渐升高，持续至S晚期或G2早期，恶性肿瘤可使TK1羧基末梢变异而难降解，使细胞周期的TK1保持高度活性。多种恶性肿瘤患者组织或血清的TK1呈现高表达，直肠癌组织的TK1表达明显高于直肠良性病组，而直肠良性病组与正常组无显著差异［7］；宫颈癌TK1表达明显增高，TK1水平也是预测宫颈癌预后的独立危险因素［8］。非小细胞肺癌组织中TK1表达亦上调［9］。因此TK1已作为恶性肿瘤细胞的活性、分裂增殖速率和恶性程度的重要标志，可评估消化道肿瘤、宫颈癌和肺癌等多种恶性肿瘤的发生、发展和预后［10－12］。

治疗前，鼻咽癌血清TK1显著高于鼻咽炎症组，治疗后鼻咽癌血清TK1下降，与文献结果相似［13－14］，与治疗杀死大量增生细胞，促使肿瘤细胞死亡或阻滞肿瘤细胞DNA复制和转录，缩小处于G1～G2期肿瘤细胞比例，降低了血清TK1水平相关。但仍需要注意的是，献血者、妊娠期妇女和维生素缺乏人群因细胞增生显著，血清TK1水平也会升高，这种良性或生理现象可假性拉高TK1水平，对这类人群的血清TK1高水平不能解读为病理改变。

TK1水平与鼻咽癌临床分期和淋巴结转移密切相关，分期越高，TK1水平越高，鼻咽组织的表达也越高，淋巴结转移较淋巴结未转移高，与文献结果相似［6，14，10］。类似地，Chen等［15］和Li等［16］报道血清 TK1与肺癌、食道癌、甲状腺癌、食管癌、喷门癌和非小细胞肺癌的临床分期有明显相关性，临床分期越高，血清TK1水平也越高。TK1水平越高提示淋巴结转移、颈神经侵犯、颅底受侵及病理恶化的概率增高，治疗时TK1水平较治疗前不变或升高，推测癌细胞可能远处转移，提示治疗失败。可见血清TK1水平与患者肿瘤临床分期和淋巴结转移相关，掌握鼻咽癌细胞增殖程度，为患者制定个性和动态放疗方案提供依据［17］。

TK1的检测与肿瘤的恶性程度密切相关也提供一个辩证看待鼻咽癌的观点：（1）鼻咽癌治疗后总体TK1水平降低，肯定了治疗效果，但分期越高、淋巴结转移、颈神经侵犯、颅底侵犯和未分化的鼻咽癌的TK1水平虽有降低但与分期较低、淋巴结未转移、颈神经未侵犯、颅底未侵犯和高中低分化仍较高，提示病理恶性程度较高者的预后不佳，大量临床试验证明分期Ⅰ和Ⅱ期的患者，单纯放疗即可达到治疗目的，5年的存活率可超过90%，对于Ⅱ～Ⅳ期患者，5年的存活率不超过50%，造成治疗失败的原因包括局部复发与远处转移［18－20］。（2）不论鼻咽癌的分期、转移、侵犯或分化，只要显著降低鼻咽癌患者体内TK1水平并确保患者的耐受与安全，那么鼻咽癌的痊愈是可以实现的，近年大量的研究结果显示通过控制TK1基因表达达到治疗鼻咽癌的目的［21－22］，虽然控制TK1基因表达还存在诸多人文伦理和耗费巨大等经济问题，但临床鼻咽癌的治愈仍具希望。

综上所述，TK1可反映鼻咽癌患者的肿瘤负荷和增殖活性，对鼻咽癌诊断、监测病情和预后等多方面有应用前景，有望为个体化基因治疗提供新靶点。

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