杨国锋,杨 辉,刘志英,郝智慧,夏美翠,孙 娟
(1.青岛农业大学经济草本植物应用研究所,山东 青岛266109 ;2.青岛农业大学生命科学学院山东省高校植物生物技术重点实验室,山东 青岛266109)
紫锥菊(Echinacea Purpurea)是原产于美洲的一类菊科野生花卉,在北美和欧洲作为免疫促进剂和免疫调节剂得到了广泛使用。但在中国,紫锥菊的研究和应用仍处于探索阶段,且有研究表明,紫锥菊的免疫增强抗病毒作用与我国传统补益中药黄芪作用相当,预示着紫锥菊作为抗病毒药有可能成为我国一种新的药用植物资源[1]。赵丹等[2]用紫锥菊提取物制备混悬液进行致突变(Ames)试验发现,紫锥菊提取物不引起鼠伤寒沙门菌的回复突变数增加,对小鼠骨髓细胞的微核率无影响,结果为阴性,说明该药无致突变作用。目前国内外对紫锥菊的研究主要集中在禽类、猪和部分水产养殖方面,在反刍动物上的研究鲜有报道。Aly 等[3]报道了紫锥菊对尼罗罗非鱼生长的影响,发现在夏季紫锥菊可显著增加罗非鱼的体增重和特定生长率,并能显著提高鱼的存活率。Oskoii 等[4]研究了在虹鳟日粮中添加紫锥菊对其生长等指标的影响,结果表明,紫锥菊各添加组均能提高虹鳟的体增重、特定生长率,降低饵料系数,且0.5%添加量效果最佳。而羔羊育肥生产是近些年来兴起的一种新的羊肉生产模式。羔羊在出生后5 个月内具有较强的生长势,利用此年龄段进行羔羊肉生产具有生产效率高和肉品质量好的特点,是肉羊生产的最佳方式[5]。为此,本研究研制了以紫锥菊提取物为主,配以我国传统补益中药黄芪等药材的复方紫锥菊提取物制剂,并将其饲喂4 月龄的崂山奶山羊羔羊,拟观测其对羔羊的免疫作用和增重效果的影响,为紫锥菊在反刍动物上的应用提供科学依据。
1.1 试验药物 本试验供试药物有3 个,分别是:(1)复方紫锥菊提取物制剂:紫锥菊提取物,黄芪,淫羊藿,炒神曲,炒麦芽,苍术,何首乌,甘草及适量的辅料;(2)四君子散:黄芪,山药,白术,虎杖及适量的辅料;(3)强壮散:党参,白术(炒),茯苓,甘草(炙) 及适量的辅料。以上复方制剂分别制成粉剂进行添加饲喂。
1.2 试验动物 选用体况良好、体重相近(24.09±1.25)kg 的4 月龄崂山奶山羊公羊16 只,随机分为4 组,即对照组和3 个试验组,每组4 只。
1.3 试验设计 试验共计67 d,预试期7 d,正试期60 d。预试期各复方制剂每天添加量为:第1~2 天添加试验量(精料量的1.2%)的1/4 即1.5 g,第3~4天添加试验量的1/3 即2 g,第5~6 天添加试验量的2/3 即4 g,第7 天添加试验量的100%即6g。预试期前对羊只进行常规驱虫,称重和标耳号,并对羊舍进行清扫和消毒;正试期每日清理1 次补料槽,2 次水槽,定期消毒。
1.4 试验基础日粮与分组 试验基础日粮组成及营养水平见表1,营养水平参考中华人民共和国农业行业标准-肉羊饲养标准(NY/T 816-2004)。正试期,对照组用基础日粮,3个试验组在基础日粮中分别添加精料量的1.2%的复方紫锥菊提取物(试验Ⅰ组)、四君子散(试验Ⅱ组)、强壮散(试验Ⅲ组)。
1.5 饲养管理 本试验在光照、通风等环境条件一致的情况下进行。试验期间精料500 g/只·d,分别于每日06:00、09:00、15:00 和18:00 分4 次等量饲喂;粗料(花生蔓:全株青贮玉米为1∶2)1 150 g/只·d,分别于每日06:00、09:00 和15:00 等量饲喂,先精后粗,精粗比约30∶70,自由饮水,各组间饲养管理完全一致。
1.6 样品采集 分别于正试期开始和结束连续两天清晨对所有试验羊进行空腹称重,并取其平均值作为始重和末重,计算其平均日增重和料重比。血样分别于正试期第30 天、第60 天清晨空腹进行颈静脉采血,每组3 只,每只采血10 mL,3 500 r/min 离心10 min,取上层血清于-20 ℃冰箱中保存备用。1.7 免疫指标的测定 采用OLYMPUS AU2700 全自动生化分析仪测定血清中碱性磷酸酶(ALP)、免疫球蛋白A(IgA)和免疫球蛋白G(IgG)的含量。1.8 数据分析处理 对试验所得的数据采用Excel 软件整理,SPSS17.0 软件One-way ANOVA 进行方差分析,LSD 法进行组间差异显著性检验。试验数据以“平均值±标准差”表示。
表1 基础日粮组成与营养水平(风干基础)
2.1 日粮中添加不同药草复方制剂对山羊增重的影响 由表2 可见,就末重而言,试验Ⅰ组显著高于对照组(P<0.05),比对照组提高了11.6%;就平均日增重而言,试验Ⅰ组显著高于对照组(P<0.05),比对照组提高了38.71%;就料重比而言,试验Ⅰ组极显著低于对照组(P<0.01),比对照组降低了36.04%,试验Ⅱ组和试验Ⅲ组显著低于对照组(P<0.05),分别比对照组降低了22.54%和29.00%。由此可见在生产性能这个方面试验I 组药草复方制剂效果更为理想。
2.2 不同药草复方制剂对山羊免疫指标的影响
饲喂不同药草复方制剂后,测定了山羊血清中的碱性磷酸酶、IgA 和IgG 指标,结果见表3。
表2 日粮中添加不同药草复方对山羊生产性能的影响
表3 日粮中添加不同药草复方对山羊血清碱性磷酸酶、IgA和IgG的影响
由表3 可见,30 d 和60 d 时,各组血清中碱性磷酸酶含量均无显著差异(P>0.05);30 d 时,试验Ⅰ组IgA含量显著高于试验Ⅲ组(P<0.05),较试验Ⅲ组提高了32.65%,其余各组间无显著差异(P>0.05),60d时,试验Ⅰ组IgA含量极显著高于试验Ⅲ组(P<0.01),较试验Ⅲ组提高了46.67%,且试验Ⅲ组IgA 含量显著低于对照组(P<0.05),另外与30 d 时相比,60 d 时各组中的IgA 含量略有下降的趋势;30 d 时各组血清中IgG含量无显著差异(P>0.05),60 d时,试验Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组IgG含量均有升高的趋势,但3组间差异不显著(P>0.05)。因此,不同药草复方制剂对山羊免疫指标的影响的试验中,试验I 组可以更好的提高山羊的免疫力。
3.1 日粮中添加不同药草复方制剂对山羊增重的影响 目前,药草复方制剂对畜禽增重的影响已经引起了研究者的关注。代雪立等[6]研究了紫锥菊复方对于高温环境下蛋鸡生产性能的影响,结果表明,1%紫锥菊复方和1.5%紫锥菊复方能够显著提高高温条件下蛋鸡的体增重和降低料蛋比。Lee T.T 等[7]在肉仔鸡日粮中添加不同比例的紫锥菊干粉发现,1.0%紫锥菊干粉添加组肉仔鸡的料重比显著低于对照组(P<0.05)。刘志英等[8]在成年母羊日粮中添加不同中草药复方制剂后发现,复方紫锥菊提取物添加组成年母羊的总增重和平均日增重分别较对照组提高了17.97%和6.18%,料重比较对照组降低了7.09%。本研究结果表明,复方紫锥菊提取物能显著提高山羊日增重和极显著降低料重,这与前人的研究结果一致。
3.2 日粮中添加不同中药复方对奶山羊免疫指标的影响 研究发现,碱性磷酸酶的活性可作为机体非特异性免疫的指标,能够评判免疫刺激剂对机体非特异性免疫功能的影响。本试验结果显示,试验I、III 组的碱性磷酸酶含量均低于对照组。有关紫锥菊提取物对血液中碱性磷酸酶含量影响的试验研究目前尚不多见,本试验2 个试验组的碱性磷酸酶含量低于对照组,可能与各中药复方的提取物和提取方法的不同、试验期不够长或与反刍动物与单胃动物相比存在生理差异等因素有关,具体原因有待进一步研究。
B 细胞接受抗原刺激后增殖分化为浆细胞进而产生免疫球蛋白,它主要存在于血浆中,也见于体液、组织和其他一些分泌液中,能与相应抗原特异性结合参与体液免疫反应,具有抗菌、抗病毒、激活补体等生物学功能[9]。本研究发现,复方紫锥菊提取物可提高血清中免疫球蛋白A 的含量,且奶山羊血清中免疫球蛋白G 的含量也有一定程度的提高。可见,在提高奶山羊机体免疫功能方面,复方紫锥菊提取物的效果更明显。
在“舍饲”的饲养模式下,在基础日粮中添加自制的中药复方能提高崂山奶山羊羔羊的日增重、降低总胆固醇含量和提高机体免疫能力。因而在一定程度上提高了养羊的经济效益,且复方紫锥菊提取物效果较为理想,可在生产中大力推广应用。
[1] Xiao P G.International popular immunomodulator-Echinacea purpurea and its preparation [J].China Tradit Herb Drug,1996,27(1):46-48.
[2] 赵丹,陈秀云,孙雨,等.紫锥菊提取物对小鼠骨髓细胞微核影响的试验研究[J].中国畜牧兽医,2010,37(1):208-210.
[3] Aly S M,Mohamed M F.Echinacea purpurea and Allium sativum as immunostimulants in fish culture using Nile tilapia(Oreochromis niloticus)[J].JAnimPhysiolAnim Nutr(Berl),2010,94(5):31-39.
[4] Oskoii S B,Kohyani A T,Parseh A,et al.Effects of dietary administration of Echinacea purpurea on growth indices and biochemical and hematological indices in rainbow trout(Oncorhynchus mykiss)fingerlings [J].Fish Physiol Biochem,012,38(4):1029-1034
[5] 李晓东,罗海玲,徐永锋,等.不同日粮水平添加复合酶制剂对羔羊生长发育的影响[J].中国草食动物,2007(3):22-25.
[6] 代雪立,石达友,莫桂芬,等.紫锥菊复方对高温条件下蛋鸡生产性能及血液生化指标的影响[J].中国畜牧兽医,2011,38(9):15-18.
[7] T T Lee,C L Chen,C C Wang et al.Growth performance and antioxidant capacity of broilers supplemented with Echinacea purpurea L.in the diet [J].The Journal of Applied Poultry Research,2012,21(3):484-491.
[8] 刘志英,杨国荣,王春元,等.不同中草药复方制剂对云岭黑山羊生产性能及免疫功能的影响[J].草业学报,2012,21(3):266-274.
[9] 徐奇友,许红,郑秋珊,等.牛磺酸对虹鳟仔鱼生长、体成分和免疫指标的影响[J].动物营养学报,2007,19(5):544-548.