止咳清咽缓释颗粒提取工艺研究

王娜 刘晓龙

止咳清咽缓释颗粒提取工艺研究

王娜 刘晓龙

目的优选止咳清咽缓释颗粒最佳提取工艺。方法以木犀草素的提取率为评价指标,以提取时间﹑液料比﹑乙醇浓度为考察因素, 采用响应面法优选提取工艺。结果最佳提取工艺条件为提取时间为1.1 h, 液料比为8, 乙醇浓度为89%。结论所优选工艺合理﹑可行, 可用于止咳清咽缓释颗粒的提取。

止咳清咽缓释颗粒；响应面法；提取工艺；木犀草素

止咳清咽缓释颗粒系是本院国医堂在《医学心语》中 “止咳散”的基础上［1-5］, 根据中医辨证施治原则, 加入羌活﹑独活﹑柴胡﹑前胡﹑茯苓﹑枳壳﹑川芎﹑党参等, 用于治疗外感风寒症, 具有散寒祛风除湿﹑益气解表﹑止咳之功效。为了提高产品质量, 稳定制备工艺, 需要对提取工艺进行合理优化［6］, 根据方中药味所含有效成分及其药性, 实验以桔梗中木犀草素的提取率为指标, 采用响应面法优选止咳清咽缓释颗粒的提取工艺, 为后续的剂型开发和工业化生产提供实验依据。现报告如下。

1 材料与方法

1.1 试药 止咳清咽缓释颗粒的处方药材(其中桔梗中木犀草素含量为240 μg/g)﹑木犀草素对照品。

1.2 仪器 色谱纯试剂Waters液相色谱仪﹑超声波提取器﹑万分之一电子天平。

1.2 试验方法

1.2.1 木犀草素标准曲线 课题研究中, 木犀草素对照品为5.6 mg/ml, 标准线性方程为A=7884.1C-5140.3, R=0.9996,线性范围为11.20～67.20 μg/ml。

1.2.2 色谱条件 色谱柱：AlltimaC18(4.6 mm×250 mm, 5 μm)；流动相：乙腈-0.5%磷酸(35：65)；柱温340 nm；流速1.0 ml/min；检测波长340 nm。

1.2.3 提取方法 以处方量的药材提取, 选择提取时间﹑液料比﹑乙醇浓度作为考察因素, 按照表2安排试验。以生产中的设备为基础, 提取2次。考察因素的参数范围见表1。

表1 考察因素的参数范围

1.2.4 供试品制备 取提取液20 ml置容量瓶中, 加入甲醇,精密定容至50 ml。高速离心(4000 r/min)30 min, 取上清液5 ml, 甲醇定容至10 ml, 作为供试品, 冷藏﹑备用。

1.2.5 提取率 将1.2.4项中供试品中木犀草素的含量, 与药材中木犀草素的总含量比较, 进而计算木犀草素的提取率。

C：供试品中木犀草素浓度；V：提取液的体积；M：药材中木犀草素的含量。

2 结果与分析

2.1 响应面优化结果与分析 采用响应面D-optimal设计方

法, 根据3个因素的参数范围进行试验设计, 设计方案及结果。见表2, 图1。

表2 止咳清咽缓释颗粒提取率

图1 止咳清咽缓释颗粒提取率3D图

利用Design-Expert8软件对数据进行多元回归, 得到响应回归方程为：

式中, 方程系数可知影响因素为X2＞X1＞X3, 且均为正相关, 其中X1和X2与X3均存在较强的交互作用, 呈正相关性,而且交互作用的影响度要大于单个因素。R2表明模型对提取率的实际值与预测值有很好的拟合度, 可以对提取工艺参数进行较好的分析和预测。利用软件分析所得最优工艺参数为：提取时间为1.1 h, 液料比为8, 乙醇浓度为89%。

2.2 最优工艺验证 依据求解所得工艺参数, 进行3次平行试验验证, 计算RSD值。见表3。

表3 3次平行试验提取率(%)

结果表明, 响应面分析法优化得到的工艺参数可信度高,具有较强重现性。

3 小结

响应面法在提取工艺中, 能较好的预测试验结果, 较正交试验优点更加突出, 试验次数少﹑周期短, 能在整个区域上查找明确工艺参数, 求得高精度的表达式等［7-12］。通过试验所得工艺参数较之前正交试验, 有效成分提取率提高, 在工艺条件上更加精确, 具有很强的实用价值。

［1］徐乃玉, 顾振纶.止嗽散药理作用研究. 中国野生植物资源, 2003, 22(2):35-36.

［2］黄保南, 武晓军.止嗽散应用体会.甘肃中医, 1998, 11(4):28-29.

［3］曲敬来, 高雪.止嗽散加减治疗甲型季节性流感病毒性支气管炎(亚急性期)的临床研究86例.中国中医药现代远程教育, 2010, 8(17):191-192.

［4］浦江晨, 沈丽华.不同剂型止嗽散治疗急性支气管炎疗效分析.中国中医急症, 2010(19):915-916.

［5］黄少芳.麻杏止嗽散治疗感冒后久咳临床观察.山西中医, 2010, 26(9):10-11.

［6］张新广, 王冬梅, 黄虔.调脂安合剂提取工艺的研究.中成药, 2008, 31(4):594-597.

［7］徐和祥.止嗽散加减联合消食口服液治疗儿童咳嗽变异性哮喘43例临床观察.时珍国医国药, 2013, 24(5):1185-1186.

［8］孙长霞, 苏印泉, 张柏林, 等. 响应面分析法优化松萝多糖提取工艺的研究.食品工业科技, 2014(5):196-201.

［9］黄萌萌, 乔娟娟, 邱亚玲, 等. 响应面法优化玄参提取工艺研究. 药学与临床研究, 2014, 22(1):34-38.

［10］卢婉怡.响应面法优化纤维素酶辅助提取青蒿素的工艺研究.中国当代医药, 2014, 21(1):4-5.

［11］金华, 马驰骁, 王建军, 等. 响应面法优化迎春花多糖提取工艺的研究.分析科学学报, 2013(6):827-830.

［12］余子川, 李小龙, 余捷婧, 等. 响应面法优选广玉兰种籽油的超声提取工艺.中国药房, 2013(47):4457-4460.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.22.216

2015-07-20］

河南省中医管理局立项课题(项目编号：2013ZY02084)

450000 郑州大学附属郑州中心医院