6—BA浓度对红色大花月季愈伤组织诱导的影响

王丰华　管远清　徐榕雪　于立芝

摘要：以红色大花月季不带芽茎段为外植体，研究了不同浓度6-BA对红色大花月季愈伤组织诱导的影响。结果表明，适宜浓度的6-BA对愈伤组织的诱导率、生长量和产生速率都有明显的促进作用；6-BA浓度为1.5 mg/L时，愈伤组织的诱导率和生长量均达到最高，分别为94%和0.9706 g/瓶；红色大花月季愈伤组织诱导的最佳诱导培养基为MS+0.5 mg/L NAA+1.5 mg/L 6-BA。

关键词：6-BA浓度；红色大花月季；组织培养；愈伤组织诱导

中图分类号：S685.12文献标识号：A文章编号：1001-4942（2014）12-0054-03

月季是蔷薇科多年生木本花卉，栽培品种很多，为世界四大切花之一，也是我国传统名花[1]。红色大花月季以色彩艳丽、花姿优美广泛应用于园林绿化中。月季通常采用扦插的方法进行繁殖，其繁殖速度受到一定限制[2～6]。植物组织培养技术具有周期短、繁殖率高、整体生产成本低等特点，已广泛应用于植物快繁和筛选优良种质[7～9]。愈伤组织诱导是植物组织培养技术的第一个环节，本试验以红色大花月季的茎段为外植体，研究6-BA（6-苄氨基腺嘌呤）浓度对愈伤组织诱导的影响，以期为红色大花月季组织培养中合理使用6-BA诱导愈伤组织提供科学依据。

1材料与方法

1.1试验材料

外植体采用红色大花月季生长健壮且无病虫害的当年生枝条，剥去叶片及附在茎上的叶柄及皮刺，用小毛刷蘸中性洗衣液将其茎段刷洗干净，并用自来水冲洗1 h待用。

1.2试验设计

诱导培养基均采用MS基本培养基，添加8 g/L琼脂、30 g/L蔗糖，同时添加相同浓度的NAA及不同浓度的6-BA，pH值为5.8，高温灭菌。试验共设6组处理（见表1），每组处理接种10瓶，每瓶接种5个外植体，共50个外植体[10]。

1.3试验方法

2013年10月1日，在超净工作台无菌环境中，将月季枝条中段饱满且无腋芽的部分剪成1 cm长的小段。无菌水冲洗3次后，先用75%的酒精表面消毒30 s，再用1 g/L的升汞溶液消毒8～10min，无菌水冲洗5次，用无菌滤纸吸去表面水分，接种于愈伤组织诱导培养基中。培养箱光照强度为3 000 lx，光照时间10～12 h/d，培养箱干球温度14.8℃，湿球温度24.5℃。接种后持续观察愈伤组织萌动情况。

1.4数据记录及处理

2013年10月10日开始定期观察并记录愈伤组织的数量及生长状态等。2013年11月26日，每组处理随机挑选3瓶对愈伤组织的生长量进行调查。

愈伤组织的诱导率（%）=每组处理中诱导出的愈伤组织数量/每组处理中外植体总数×100[11]

愈伤组织的生长量=每组处理中3瓶愈伤组织生长量总和/3采用Microsoft Excel进行数据处理。

2结果与分析

2.1不同浓度6-BA对红色大花月季愈伤组织诱导率的影响

由表2可以看出，不同处理对红色大花月季愈伤组织诱导率的影响不同。T4处理诱导率最高为94%；其次是T3、T5、T6处理，诱导率均为92%；T2处理的诱导率为88%；T1处理诱导率最低，仅为28%。

红色大花月季愈伤组织的诱导率与6-BA浓度的二次模拟函数为：

式中，x表示6-BA浓度，y表示红色大花月季愈伤组织的诱导率，其相关系数R=0.9159>0.9，相关性显著。6-BA浓度与红色大花月季愈伤组织诱导率的模拟曲线见图1。

2.2不同浓度6-BA对红色大花月季愈伤组织产生速率的影响

红色大花月季愈伤组织产生速率曲线见图2，添加6-BA的所有处理（T2、T3、T4、T5、T6）愈伤组织的产生速率显著高于未添加的处理（T1），但添加6-BA的各处理之间愈伤组织的产生速率则没有明显差异。

2.3不同浓度6-BA对红色大花月季愈伤组织生长量及生长状态的影响

由表3可知，T4处理的红色大花月季愈伤组织生长量最高，为0.9706 g/瓶，；T1处理的愈伤组织生长量最低，为0.0015 g/瓶；各处理愈伤组织生长量由大到小的顺序为T4>T5>T3>T6>T2>T1。

式中，x表示6-BA浓度，y表示红色大花月季愈伤组织的生长量，其中相关系数R=0.9832>0.9，相关性显著。6-BA浓度与红色大花月季愈伤组织生长量的模拟曲线见图3。

3结论

本研究结果表明，6-BA在红色大花月季愈伤组织诱导方面发挥着重要作用，适宜浓度的6-BA对愈伤组织诱导率、生长量和产生速率都有明显的促进作用。

对愈伤组织诱导率的影响表现为，红色大花月季愈伤组织的诱导率随6-BA浓度的增大呈现先增长后下降的趋势，当6-BA浓度为1.5 mg/L时，愈伤组织的诱导率最高为94%。对愈伤组织生长量的影响表现为，当6-BA浓度为1.5 mg/L时愈伤组织的生长量最高为0.9706 g/瓶。

对愈伤组织产生速率的影响的表现为，添加6-BA的所有处理中愈伤组织的产生速率无明显的差异，但都显著高于未添加6-BA的处理。

综上所述，红色大花月季愈伤组织诱导过程中，MS+0.5 mg/L NAA+1.5 mg/L 6-BA为最佳诱导培养基，NAA和 6-BA两种生长素共同作用的效果明显优于单一生长素处理。

参考文献：

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