ASO测定阳性在诊断溶血性链球菌感染中的临床意义



ASO测定阳性在诊断溶血性链球菌感染中的临床意义

马春利

(陕西省宝鸡市人民医院 儿科, 陕西 宝鸡, 721000)

关键词:溶血性链球菌感染; 抗链球菌溶血素O; 抗DNA酶B

儿童感染A族链球菌(GAS)后，可引起上呼吸道感染、猩红热、风湿热、皮肤感染、肾小球肾炎和风湿性心脏病等。GAS感染后可产生多种外毒素和侵袭性酶，严重者可导致中毒性休克综合征(TSS)，后者病死率高达20%～30%[1], 严重危及患儿健康和生命安全。A族溶血性链球菌感染后，在细胞外产生抗链球菌溶血素O(ASO)和抗DNA酶B抗体[2]。测定血清中相应的ASO等抗体滴度，能为临床明确诊断GAS感染提供依据。

1资料与方法

1.1　一般资料

收集本院2013年5月—2014年12月明确诊断为链球菌感染的137例患儿的临床资料，依据各类型疾病相关诊断标准对患儿进行分组。其中急性风湿热组29例：男17例，女12例，年龄1～14岁，平均(6.53±2.18)岁；急性咽炎、扁桃体炎组36例：男19例，女17例，年龄2～12岁，平均(7.13±2.05)岁；急性肾小球肾炎组35例：男18例，女17例，年龄3～14岁，平均(7.29±2.24)岁；风湿性心脏病组37例(活动期20例，非活动期17例)：男18例，女19例，年龄2～13岁，平均(6.41±2.56)岁。各组患者性别、年龄等资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2　检测方法

① 咽拭子培养：用棉签取患儿咽喉部分泌物送检; ② ASO测定：抽取外周静脉血3 mL, 经高速离心后取血清待检。采用免疫散射比浊法测定ASO滴度，正常值<223 U/mL[3]。本研究选用BNⅡ特种蛋白分析仪(西门子公司)，严格按标准规程进行操作; ③ 抗DNA 酶B 检测：采用微量中和法，灭活血清后3倍稀释，加入DNA 酶B 抗原温育15 min，然后加甲基绿-DNA 底物，置入温箱24 h后，根据底物颜色消退程度确定抗DNA 酶B 抗体的滴度。采用美国心脏病学会推荐的标准[4]，间隔2 次测定有2个滴度的抗体升高即可诊断阳性。抗DNA 酶B 检测阳性值为7～18 岁≥240 U/mL, 2～6岁≥60 U/mL。本研究试剂由广东省心血管病研究所风湿热链球菌实验室提供；④炎症指标：抽取外周静脉血检测血常规、CRP及红细胞沉降率(ESR)。

2结果

2.1　不同检测方法诊断溶血性链球菌感染阳性率的比较

咽拭子培养阳性率、ASO阳性率、抗DNA酶B阳性率及联合检测阳性率呈依次增高趋势，各种检测方法结果阳性率比较均有显著差异(P<0.05), 且检测方法不同，对相关溶血性链球菌感染疾病的检测阳性率不同，见表1。

表1　咽拭子培养、ASO与抗DNA酶B检测阳性率观察[n(%)]

2.2　ASO和抗DNA酶B 检测抗体高峰及抗体滴度持续时间

在GAS 感染后，ASO抗体反应高峰时间、抗体滴度持续时间分别为(4.28±1.05)d和(52.38±4.08)d，均明显低于抗DNA酶B检测的(5.47±1.36)d和(163.06±15.16)d，差异有统计学意义(P<0.05)。

2.3　炎症指标检测

137例链球菌感染患儿炎症指标检测中, C反应蛋白(CRP)为(34.16±6.45) g/L, 血沉(ESR)(18.06±4.87) mm/h, 白细胞计数(WBC)为(10.76±2.34)×109/L, 中性粒细胞计数为(6.29±2.63)×109/L。

3讨论

GAS感染率高，全球每年约有6 亿人口发生链球菌感染性咽喉炎，皮肤感染例数高达1亿[5]。链球菌感染后通过变态反应可引起风湿热和肾小球肾炎, GAS感染后可产生多种外毒素和侵袭性酶，部分患儿感染侵袭性GAS, 可因TSS发生死亡[6]。因此应早期检测、明确诊断GAS 感染，及时进行病因治疗，以改善患儿预后。

抗链球菌溶血素O(ASO)测定是目前检测GAS 感染的常用血清学检测方法。β溶血性链球菌分为20个组，其中链球菌A、C、G族均可引起ASO升高[7]; ASO测定阳性率受干扰的因素较多，急慢性肝炎、高脂血症、肾病综合征时可出现非特异性ASO 增高；当血清标本发生溶血、或保存不当被细菌污染后, ASO滴度也可发生改变[8]。目前ASO测定采用微量特定蛋白免疫散射比浊法，灵敏度相对较低，可导致部分患者漏检[9]。本组数据中，ASO阳性率为40.15%, 其中急性风湿热组、急性咽炎、扁桃体炎组、急性肾小球肾炎组、风湿性心脏病活动期组和非活动期组检测阳性率分别为55.17%、22.22%、60.00%、45.00%、5.88%, 数据说明ASO测定阳性率在诊断溶血性链球菌感染中的有较高的临床意义。

微量中和法检测GAS抗DNA酶B抗体是近年来开始的一种新方法，对测定链球菌感染具有较高的特异性和敏感性[10]。GAS细胞外产物脱氧核糖核酸B具有较强的抗原性，当机体感染GAS后，抗DNA酶B升高，且抗DNA酶B不受肝功能、血脂水平及血清标本污染等因素的影响，具有良好的稳定性，检测阳性率较高[11]。本研究中抗DNA 酶B阳性率为59.12%，其中急性风湿热组、急性咽炎、扁桃体炎组、急性肾小球肾炎组、风湿性心脏病活动期组和非活动期组检测阳性率分别为68.97%、33.33%、82.86%、85.00%、17.65%。

ASO和抗DNA酶B有不同的抗体动力学，因此各检测方法中抗链球菌抗体中滴度高峰及维持阳性时间不一[12]。GAS感染2周后开始出现ASO, 3～5周达高峰，抗体高滴度持续时间约2个月。抗DNA酶B抗体反应高峰出现时间迟，抗体滴度持续时间长，二者之间可作为梯度检测，取到联合互补作用。本研究结果还显示，联合检测阳性率72.26%, 其中各组检测阳性率分别为89.66%、52.78%、94.29%、90.00%、17.65%。由此表明ASO联合抗DNA酶B检测能显著提高GAS感染检测阳性率。

参考文献

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收稿日期:2015-01-20

中图分类号:R 556

文献标志码:A

文章编号:1672-2353(2015)17-188-02

DOI:10.7619/jcmp.201517071