用离子色谱法研究饮片中残留二氧化硫在制剂过程中的变化

王国海，宋　莉，杨瑞瑞

(陕西省食品药品检验所,陕西 西安　710065)



用离子色谱法研究饮片中残留二氧化硫在制剂过程中的变化

王国海，宋莉，杨瑞瑞

(陕西省食品药品检验所,陕西 西安710065)

摘要：目的采用离子色谱法考察饮片中二氧化硫在牛黄上清丸制剂过程中的变化，为评价制剂安全性提供数据支撑。方法将饮片及自制样品经水蒸汽蒸馏，3%双氧水氧化吸收后，进离子色谱仪分析，测定其残留量。结果在1～30 mg·L-1浓度范围内与峰面积呈良好线性关系(r=0.999 9)；平均收率(n=9)为95.5%，RSD为3.0%。结论饮片中残留二氧化硫在其与炼蜜加热混合的过程中有一定程度的减少，但有部分伴随原粉转移到生药粉制剂中。

关键词：牛黄上清丸；二氧化硫；离子色谱法(IC)

牛黄上清丸由19味药的原粉加炼蜜制成[1]，具有清热泻火散风止痛的功效[1]。处方中的白芷、当归、白芷、菊花等中药材炮制时常用硫磺熏蒸以达到防蛀虫、霉变，同时提升视觉感官效果。药材中残留的二氧化硫在以原粉入药的制剂过程中是否会随粉碎、混匀及加炼蜜而减少值得我们去探索。为此，我们设计了合理的实验方案，考察饮片中二氧化硫在制剂制备过程中的变化[2-3]，为饮片安全、规范炮制提供参考依据，同时为评价制剂安全性提供数据支撑。

1仪器、试药及药材

1.1仪器万通离子色谱仪(型号761)；电导检测器；水蒸汽蒸馏装置[4]；超纯水系统。

1.2试药亚硫酸钠(Na2SO3)为优级醇(纯度99.7%)，碳酸氢钠(NaHCO3)、硫代硫酸钠(Na2S2O3)、碳酸钠(Na2CO3)、EDTA、碘(I2)、均为分析纯；实验用去离子水(电阻率为18.2ΜΩ)；硫酸根标准溶液购自中国计量科学研究院(编号0942，标示值为 1 000 mg·L-1)。

1.3药材荆芥穗、黄芩、薄荷、栀子、连翘、白芷、黄连、黄柏、川芎、大黄、当归、菊花、地黄、冰片、桔

梗、赤芍、甘草、人工牛黄、石膏原料药材及炼蜜均由牛黄上清系列生产厂家提供。

2方法与结果

2.1标准系列溶液的制备取硫酸根标准溶液适量，用去离子水稀释成浓度分别为1、2、5、10、20、30 mg·L-1的标准系列溶液。

2.2供试品溶液的制备取相当于2丸牛黄上清丸的药粉或(制备)样品，精密称定，置水蒸汽蒸馏装置的样品瓶中，加脱氧的去离子水20 mL使其润湿、分散，在100 mL量瓶中加入20 mL 3%的双氧水作为接收液，吸取浓盐酸5 mL快速加入样品瓶，迅速塞紧装置，进行蒸馏，至接收瓶中液体接近90 mL时，停止蒸馏，取下接收瓶，用去离子水洗涤尾接管将其并入量瓶中并定容至刻度，摇匀，放置1 h，作为供试品溶液[5-6]。

2.3色谱条件阴离子分析色谱柱：Metrosep A Supp 7 (250 mm×4 mm)；淋洗液：5 mmol·L-1碳酸钠和5 mmol·L-1碳酸氢钠混合溶液；等度淋洗；流速：0.8 mL·min-1；进样量：20 μL ；电导检测器。

2.4线性关系将2.1项下各标准系列溶液按上述色谱条件进样分析，以硫酸根的峰面积与其浓度分别任纵坐标和横坐标绘制标准曲线，其回归方程为：Y=13.924X-4.527，r=0.999 9，结果表明，硫酸根在1～30 mg·L-1范围内线性关系良好。

2.5精密度试验取同一份标准系列溶液，按照上述色谱条件连续进样6次，得硫酸根峰面积RSD为0.62%。

2.6稳定性试验取同一供试品溶液，按上述色谱条件分别在0、2、4、8、12、24 h进样，测定硫酸根峰面积，其RSD为0.88% ，表明供试品溶液在24 h内稳定性良好。

2.7重复性试验取白芷药材细粉，按“2.2” 项下供试品溶液制备方法平行制备6份供试液，按上述测定方法测定，其平均值为138.2 mg·kg-1，RSD为1.3%。

2.8回收率试验精密称得无水亚硫酸钠82.27 mg置100 mL量瓶中，用0.05%EDTA溶解并定容至刻度，用碘量法对其进行标定[7]，结果为为0.408 3 mg·L-1(以SO2计)。取白芷药材细粉适量，精密称取9份，每份约6.0 g，将其均分为3组，每组依次精密加入上述亚硫酸钠溶液0.8、1、1.2 mL，同供试品溶液的制备及测定操作，计算回收率，结果见表1。

图1　色谱图

2.9样品处理

2.9.1样品制备将上述19味药按牛黄上清丸处方量混合，粉细，过筛，混匀，分A、B、C、D、E五组试验，每组取样6份，每份约10 g， A组用于测定混合药材中二氧化硫残留量；将B组置于90℃的烘箱加热1 h后，用于测定其二氧化硫残留量； 将C、D、E三组中每份样加入13.0 g炼蜜，于90℃加热充分混合，时间分别为30、60、90 min，再测定其二氧化硫残留。

2.9.2样品溶液的制备取上述相当于2丸牛黄上清丸的量的粉末或样品，按“2.2” 项下供试品溶液制备方法制备供试液并按上述测定方法测定，结果见表2。

由此可见：在牛黄上清丸的制剂过程中，饮片中二氧化硫残留的损失率并不是很高，加热过程对二氧化硫损失的影响也很有限。因此，对制剂中二氧化硫残留量的监测来对饮片中二氧化硫残留作评估并没有很强的相关性。

表2　二氧化硫实验检测结果

3讨论

通过模拟牛黄上清丸制剂工艺过程，考察饮片中二氧化硫在整个制剂过程中的变化发现：饮片中残留二氧化硫在其与炼蜜加热混合的过程并非大量减少，而是伴随原粉转移到原粉入药的制剂中，但由于部分饮片在处方中所占比例较小(如牛黄上清丸中白芷、桔梗、当归等常用硫磺熏蒸的药材在处方中所占比例依次为16/622、16/622、50/622)，从而致使制剂中二氧化硫的含量较小。因此符合二氧化硫残留限度要求的制剂，其部分原药材残留二氧化硫严重超标仍有一定的可能性，通过对制剂中二氧化硫残留监测来对饮片中二氧化硫残留进行评估并不存在很强的相关性。因此，加强对药材及饮片中二氧化硫的监测，规范饮片炮制，整顿饮片市场比控制制剂中二氧化硫残留更有意义。

硫磺熏蒸对不同药材的成分、药性、药效、归经等是否有影响，有多大影响，是否影响制剂的药理作用、疗效等目前尚不清楚，因此应制定更加严格的二氧化硫残留限度标准，促使企业从源头上控制二氧化硫残留问题，二者相辅相成为药品的安全性提供保障。

检测限按3倍信噪比计算，定量限以10倍信噪比计算。

参考文献:

[1]国家药典委员会.中国药典(一部)[S].北京：中国医药科技出版社，2010：191.

[2]罗建民，王爱霞，陈俊宇．离子色谱法测定葡萄干中二氧化硫残留量 [J].检测分析，2014，35(4)：90-92.

[3]陈秀杰，谭倩，余涛．离子色谱法测定食品中二氧化硫与传统化学法的比较 [J].中国卫生检验杂志，2014，24(1)：38-43.

[4]袁向辉，乔蓉霞，刘海静，等．菊花中二氧化硫残留两测定方法研究 [J].安徽医药，2011，15(1)：32-33.

[5]乔蓉霞，杨瑞瑞，刘海静，等.离子色谱法检测牛黄上清丸中二氧化硫残留量 [J].药物鉴定，2011,20(13)：18-19.

[6]施秀杰，衷明华．氧瓶燃烧-离子色谱法测定中草药中硫含量 [J].江西化工，2014(2)：70-72.

[7]国家药典委员会.中国药典(二部)[S].北京：中国医药科技出版社，2010：附录183.

(收稿日期：2014-04-13，修回日期：2014-07-08)

基金项目：陕西省中医管理局科研课题(No 13-ZY021)

doi:10.3969/j.issn.1009-6469.2015.02.019