钴含量快速检测试纸的研发应用

文 / 汪生云 （昆明泊银科技有限公司 昆明650106）

钴含量快速检测试纸的研发应用

文 / 汪生云 （昆明泊银科技有限公司 昆明650106）

国家标准钴含量测量方法GB/T 14353.6-2010具有结果准确度和精密度高的优点，但操作过程较复杂、需要专门的仪器，不适于现场快速检测。为建立钴含量快速检测技术，采用化学显色反应的方法进行钴检测试纸的试制。本文选择一定量的显色剂，以中速定量滤纸为栽体制成钴离子检测试纸，并对试纸的显色剂浓度、试纸浸渍液配方、检测范围及色标卡梯度等进行了试验，确定其制作方法和储存条件。该试纸测定操作简便、快速，符合半定量分析的要求，对于现场快速检测具有较好的实用价值。

钴离子 试纸 快速检测 研制

钴是生物体的必需微量元素之一，具有重要的生理作用。它是维生素B12的组成成分，是某些酶的组分或催化活性的辅助因素，具有刺激造血的作用，并对某些微量元素的代谢有一定影响。

但是，过量的钴对人体及生物有一定的危害性。摄入过量可引起钴中毒，常表现为皮肤潮红、胸骨后疼痛、恶心、呕吐、耳鸣及神经性耳聋，还可出现红细胞增多症，重者导致缺氧紫绀、昏迷甚至死亡，如治疗不及时，可直接或间接影响小儿智力发育。

因此，钴离子含量检测在工业生产、环境检测、农业应用、医学、食品安全等领域具有重要意义。目前钴含量的检测方法有分光光度法、原子吸收光谱法、极谱法、高效液相色谱法、化学发光法、等离子体发射光谱法等，这些检测方法，不仅要求有实验室条件，而且检测时间较长，费用也较高，不利于实现现场快速检测。

1、 材料与方法

1.1 仪器

JT-1004型万分之一天平：余桃市金诺仪器有限公司；电热鼓风恒温干燥箱：沪南电炉烘箱厂；中速定量滤纸：双圈牌。

1.2 试剂及材料

亚硝基R盐：国药化学试剂有限公司；乙酸钠：国药化学试剂有限公司；磷酸：汕滇药业有限公司。

1.3 实验设计、技术路线

在磷酸介质中，当有乙酸钠缓冲溶液存在下，钴与亚硝酸基R盐生成红色络合物，根据颜色的深浅而检测钴的含量。

1.4 方法

1.4.1 硝酸钴溶液的配制

用硝酸钴来配制标准溶液，配制1mg/L、2mg/L、5mg/L、10mg/L 、20mg/L、30mg/L、50mg/L、100mg/L、200mg/L、500mg/LMo6+的标准液。

1.4.2 显色剂的配制

（1）亚硝基R盐（1-亚硝基-2-萘酚-3,6-二磺酸钠）溶液：称取0.2g、0.5g、0.8g、1.2g、1.6g亚硝基R盐溶于100mL蒸馏水中。

1.4.3 缓冲液等试剂的配制

（1）乙酸钠溶液：称取5g、10g、20g、50g乙酸钠溶于100mL蒸馏水中；

（2）磷酸溶液：量取10ml、20mL、30ml、50ml磷酸搅拌加入到70mL的蒸馏水中。

1.4.4 试纸的制作

采用浸泡的方法，将显色剂亚硝基R盐固定在滤纸上，即中速定量滤纸浸渍在上述浸渍液中5min，取出后自然晾干，从中间剪下1cm宽的试纸条，粘贴在3cm长的PVC塑料板上，制成检测钴含量试纸，避光保存。

1.4.5 浓度梯度的选择

选用1 mg/L、2 mg/L、5mg/L、10mg/L 、20mg/L、30mg/L、50mg/ L、100mg/L、200mg/L、500mg/共10个浓度，作为观察显色梯度的临界值，用于确定最后的检测范围和色标梯度。

1.4.6 试纸保质期的确定

将干燥后的试纸装入黑色的塑料瓶中，置于室温荫凉处保存，观察试纸外观和显色效果的变化。

2 、结果与分析

2.1 显色剂最佳使用浓度确定

试验表明：0.8%的亚硝基R盐（1-亚硝基-2-萘酚-3,6-二磺酸钠）溶液配制显色剂，显色效果最理想。

2.2 试纸浸渍液配方

试验表明：试纸浸渍液的最佳配制方法是，量取20%乙酸钠溶液15mL、15mL磷酸（2∶7）溶液、0.8%亚硝基R盐溶液60mL，合并、混匀，得到试纸浸渍液。

2.3 试纸的特性、性状

本试纸显色背景区为无色，待反应后呈琥珀色；检测限：5mg/L；

根据制作出的试纸最终的显色效果，选择了5-10-20-30-100mg/L为显色浓度梯度及检测范围。

2.4 试纸保质期的确定

将干燥后的试纸装入黑色的塑料瓶中，置于室温荫凉处保存，4个月后试纸的外观和显色效果无变化。

2.5 试纸的使用方法

滴1滴样液在试纸上，随后观察颜色变化，并与比色卡对照。

2.5 存在的问题

本试验在制作过程中，发现硫磷混酸不可取，只能在硫酸的介质中发生反应。但是根据试验原理，亚硝酸基R盐同样可以与铁、镍、铜等元素形成络合物，硫酸的加入是为了破坏其络合而消除干扰。但是，加入硫酸本试纸制作过程中不可取，整个试验缺失了掩蔽剂。所以，在后期的试验中，需找出合适的掩蔽剂，消除干扰。

3、结论

本文研究了钴离子的快速检测问题，利用显色反应原理研制出了检测试纸。该试纸测定操作简便、快速，符合半定量分析的要求，对于现场快速检测具有较好的实用价值。

[1] 李庆云，袁建敏，王婷.饲料原料中微量元素钴的检测[J].饲料研究，2008，（05）：44-45.

[2] 吕琳琳.水体中钴、镍的快速检测技术研究[J].鞍山师范学院学报，2007，（07）：43-46.

图1 甘草各提取物对α-葡萄糖苷酶抑制活性测定结果

4 、讨论

通过本实验的研究，甘草多糖的抑制效果最佳，皂苷和生物碱的抑制作用较好，黄酮的抑制作用较弱，反应出此种植物的降血糖作用，可作为药用资源予以开发利用，为甘草资源的药用开发提供参考。尽管与阳性药物比较，此种中药的α-葡萄糖苷酶抑制活性还较低，但如果进一步的分离、提取活性部位，可望获得抑制活性更强的中药提取物。

参考文献

[1] N.Asano.Glycosidase inhibitors：Update and perspectives on practical use．Glycobiology，2003，13：93.

[2] World Health Organization．Definition，Diagnosis and classification of Diatebes Mellitus and its Complications[J]． Genera：World Health Organization，1999．

[3] 惠寿年等．国内对甘草化学成分的研究进展[J]．中草药,1999,30(4):313-315．[4] 许有瑞.甘草中a-葡萄糖苷酶抑制剂的筛选研究[D].兰州大学,2006.

[5] 王惠敏.甘草药理作用及其临床应用[J].天津中医学院学报,2004,23(4).

[6] 许秋霞,邹敏.甘草的药理作用概述[J].实用中医药杂,2005,21(7).

[7] 郑永利.甘草及甘草制剂的临床应用研究进展[J].内蒙古中医药,2009,28(18).

[8] HE S T,XU j Y,CHEN D J．Antidiabetic drugs with α-Glucosidase inhibitor activities[J]．Industrial Microbiology,2003，33(1)：43-49．

Manufacture of the quick test paper for cobalt content

Wang Shengyun
(Kunming BoyinScience and Technology Ltd. Kunming 650106)

National standard method of measuring cobalt content GB/T 14353.6-2010 has advantages such as high result accuracy and precision, but it is not suitable for quick on-site test because of the comparatively complex operation process and the need of special instruments. In order to build the quick test method of cobalt content, we adopted the chemical chromogenic reaction method to manufacture test paper for cobalt content. In this paper we chose a certain amount of chromogenic agent, manufactured test paper for cobaltic ions with mid-speed quantitative flter paper as carrier, made experiments on the density of chromogenic agent, recipe of maceration solution, range of test and gradient of color card, and ensured its manufacture method and storage condition. This test paper is quick and easy to operate, it meets the requirement of half-quantitative analysis and has superior application value in quick on-site test.

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