沙枣果肉化学成分定性研究

2015-02-27 09:01陈魁尤松霞陈银银蔡明王天李凌智大庆师范学院生物工程学院黑龙江大庆163712
安徽农业科学 2015年24期
关键词:沙枣浓硫酸滤纸

陈魁,尤松霞,陈银银,蔡明,王天,李凌智(大庆师范学院生物工程学院,黑龙江大庆163712)

沙枣(Elaeagnus angustifolia L.)属胡颓子科、胡颓子属植物,落叶乔木,在我国主要集中于甘肃、新疆、内蒙、宁夏等西北干旱地区[1-2],面积超过13万km2,年产沙枣约1.5亿kg[3]。由于沙枣树可在高盐碱、干旱等土壤环境下生长,能承受10~15 g/L的土壤盐度[4],近年来,为防风固沙和改良土壤,沙枣被辽宁、黑龙江、河北、山西、山东和河南等省区引种栽培于盐碱地和沙漠上[1]。

沙枣被称为“沙漠盐碱地的宝树”,其药用和食用价值很高[5],花粉、叶片、果实和种子中均含有丰富的营养成分,如脂肪、蛋白质、糖和果胶等[6]。沙枣果肉呈淡黄白色,疏松,细颗粒状,气微香,味甜、酸、涩[7],含有尼克酸、胡萝卜素、硫铵素及锰、锌和少量的钙等[8]。果实可鲜食、加工、酿酒、制醋,也可磨碎做面等,其面可做馒头、面条、烙饼,也可制作成果酱、酱油、蛋糕等[9]。枝、叶、花和果均有药用价值,研究表明其对治疗闭合性骨折、慢性支气管炎、消化不良、神经衰弱等病症有促进作用[10]。药理试验表明,沙枣具有抗氧化、抗心律失常、降血脂、保肝、抗癌等功能[11]。GRBZ I等进行的体外试验,结果表明沙枣果实对酒精引起的消化道溃疡有一定的作用,而且此药在土耳其已经得到应用[12];进一步研究表明,沙枣果水提物还具有抗炎作用[13]。

随着沙枣的广泛栽培,对其开发利用的研究也越来越多,但主要集中于对沙枣中某一化学成分的深入研究,笔者通过较为全面的定性分析,了解沙枣果肉中的化学成分,为今后我国沙枣资源的综合利用提供理论参考。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 研究对象。沙枣购买于新疆乌鲁木齐市,颗粒饱满,无变质腐烂。

1.1.2 主要试剂。硅钨酸、浓盐酸、浓硫酸、冰醋酸、三氯化铁、氢氧化钠、乙醇、锌粉和硫酸铜等,均为分析纯试剂。

1.1.3 主要仪器。万能粉碎机,常州市博兰特干燥设备有限公司;PDZ5-WS低速多管架自动平衡离心机,长沙湘仪离心机仪器有限公司;HHS型电热恒温水浴锅,上海博迅实业有限公司医疗设备厂;通风橱,北京森雷博瑞实验室设备有限公司;BS124S电子天平,北京赛多利斯仪器系统有限公司;DHG-9245A电热恒温鼓风干燥箱,上海一恒科学仪器有限公司。

1.2 方法

1.2.1 沙枣果肉水提取液中化学成分定性分析。

1.2.1.1 以水为溶剂供试液的制备。分离流程如图1所示。

1.2.1.2 加热沉淀试验。将提取液加热至沸腾或加入5%硫酸溶液,若出现沉淀或浑浊,表示含有蛋白质。

1.2.1.3 双缩脲试验。在提取液中加入40%NaOH溶液摇匀,滴入0.5%CuSO4溶液2滴,边加边摇匀,若呈现红色或紫色表示含有蛋白质或多肽。

1.2.1.4 茚三酮试验。将提取液滴在滤纸上,再滴加0.2%茚三酮溶液,在沸水浴上加热5 min,冷却观察,若出现紫或蓝色反应,表示含有氨基酸、多肽或蛋白质;或在滴有提取液的滤纸上喷洒0.2%茚三酮溶液,再烘烤2 min(100℃左右),观察,若有紫红或蓝色斑点则表明有氨基酸、多肽,也有少数成红色斑点。

1.2.1.5 碱性酒石酸铜(Fehling反应)。在提取液中加入新配的碱性酒石酸铜试剂,加热10 min(沸水浴)。若产生砖红色沉淀,表示含有还原糖。

1.2.1.6 α-萘酚试验(Molish反应)。取提取液加热浓缩使其溶于乙醇中,再加入等体积10%α-萘酚乙醇溶液,摇匀后将1 ml浓硫酸沿试管壁缓缓注入,若界面出现紫色环则表明有多糖、糖及苷类。

1.2.2 沙枣果肉乙醇提取液中化学成分定性分析。

1.2.2.1 以乙醇为溶剂供试液的制备。分离流程如图2所示[14]。

图1 以水为溶剂供试液的制备流程

1.2.2.2 盐酸锌粉反应。在提取液中加入少量锌粉和数滴浓盐酸,若出现桃红色,表示含有黄酮类化合物。

1.2.2.3 氨熏试验。将提取液滴在滤纸上,置于氨中熏30 s后变成黄色,荧光下若显黄色荧光,表示有黄酮。

1.2.2.4 明胶试验。在提取液中加入NaCl-明胶溶液,若有白色沉淀或变浑浊,表示含有鞣质。

1.2.2.5 硅钨酸试验。将硅钨酸加入提取液,若产生淡黄色或灰白色沉淀,表明含有生物碱。

1.2.2.6 溴酚蓝反应。将适量提取液滴在滤纸上,滴加10%溴酚蓝溶液,若在蓝色背景上有黄色带,表示含有有机酸。

1.2.2.7 泡沫试验。取提取液于试管内,振摇2 min,产生的泡沫10 min及以上仍未消失,表明含有皂苷。

1.2.2.8 碱液试验。在提取液中加入10%NaOH液1~2滴,若呈深红色则表明含有蒽醌类。

1.2.2.9 FeCl3-冰醋酸反应。将2 ml提取液置于水浴上蒸干,冷却加入0.5%FeCl3-冰醋酸溶液1 ml,溶解,倒入干燥小试管内,再加入等体积浓硫酸(沿管壁小心加入),观察,若在两液层界面出现红棕色环,冰醋酸层渐呈蓝绿色,表明含有强心苷。

1.2.2.10 开环闭环试验。在提取液中加入1%NaOH后在沸水浴上加热3~4 min,获得澄清溶液,在其中加入2%盐酸使酸化,若溶液变浑浊则表明含有内酯和香豆素类。

1.2.2.11 荧光试验。将提取液滴在滤纸上再于紫外灯下观察,若出现黄绿色、蓝绿色或天蓝色的荧光带,表示有香豆素类。

图2 以乙醇为溶剂供试液的制备流程

1.2.3 沙枣果肉石油醚提取液中化学成分定性分析。

1.2.3.1 以石油醚为溶剂供试液的制备。取100 ml石油醚(60~90℃)将样品粗粉10 g溶解后静置2~3 h,过滤,滤液注入表面皿中,挥干石油醚,剩余干物质用于验证三萜类、甾类和脂肪油的存在[15]。

1.2.3.2 醋酐-浓硫酸反应。在水浴中将提取液挥干后加入醋酐使其溶解,取部分于比色盘中,再滴浓硫酸1滴于比色盘中,若溶液先呈红或紫色,后渐变为绿色,表明含有甾醇类或三萜类。

1.2.3.3 氯仿-浓硫酸反应。在提取液中加入氯仿后注于干燥试管内,再小心沿管壁加入浓硫酸,若氯仿层呈现红色,浓硫酸层有绿色荧光则表明含有植物甾醇。

1.2.3.4 油斑试验。将提取液滴在滤纸上,挥干石油醚,观察变化,若滤纸上有油斑,表明含有脂肪油。

2 结果与分析

由表1可知,沙枣果肉的水提取液中含有氨基酸、多肽、蛋白质、还原糖、多糖及苷类;乙醇提取液中含有黄酮类化合物、有机酸、生物碱、鞣质、蒽醌类、香豆素类及内酯,可能含有皂苷和强心苷;石油醚提取液中含有甾醇和三萜类,可能含有脂肪油。

3 结论与讨论

通过对沙枣果肉不同提取液中化学成分的定性研究可知,沙枣果肉中含有氨基酸、多肽、蛋白质、还原糖、多糖、苷类、黄酮类化合物、有机酸、生物碱、鞣质、蒽醌类、香豆素类、内酯、甾醇和三萜类,可能含有皂苷、强心苷和脂肪油。可见,沙枣果肉中含有多种的有效成分,具有巨大的开发潜力。随着我国沙枣栽种面积的不断扩大,其产量不断提高,对其进行综合开发利用具有相当大的空间。

表1 沙枣果肉定性检测试验结果

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