肝细胞癌含洛铂化疗方案疗效及与血管内皮生长因子和凝血酶蛋白表达水平的相关性

吴云军

（辽宁省本溪市中心医院放射科，辽宁 本溪 117000）

肝细胞癌含洛铂化疗方案疗效及与血管内皮生长因子和凝血酶蛋白表达水平的相关性

吴云军

（辽宁省本溪市中心医院放射科，辽宁 本溪 117000）

目的 分析血管内皮生长因子（VEGF）、凝血酶（thrombin）蛋白表达水平与肝细胞癌（HCC）的相关性及含洛铂化疗方案的临床疗效。方法 收集HCC患者临床资料共120例，按照随机数字表法随机分为观察组65例和对照组55例。对照组采用含顺铂化疗方案治疗，观察组采用含洛铂化疗方案治疗。所有患者均行CT平扫及三期增强扫描；所有临床标本组织均常规采用10%的福尔马林液固定、石蜡包埋，采用免疫组化SP法测定各组VEGF及thrombin的蛋白表达水平。结果 观察组65例患者中，根据CT图像的血供特征，HCC可分为少供血型组（12例）、双重供血型组（19例）及动脉供血型组（34例）3组，各组间蛋白表达阳性率差异有显著性(P＜0．05）；根据CT图像的侵袭特征，HCC可分为低危组（30例）和高危组（35例），其相应的 VEGF及 thrombin蛋白表达阳性率分别为 73．33%和88．57%，36．67%和85．71%，组间差异有显著性（P＜0．05）；根据CT图像是否明显强化，HCC可分为明显强化组（31例）和无明显强化组（34例），组间蛋白表达阳性率差异有显著性（P＜0．05）；根据CT图像特征中边界是否清晰，可分为清晰型组（21例）和欠清晰型组（44例），其相应的VEGF及thrombin蛋白表达阳性率分别为71．43%和86．36%，47．62%和70．45%，组间差异有显著性（P＜0．05）；根据CT图像中瘤体大小，可分为瘤体直径 5 cm组（29例）和瘤体直径＞5 cm组（36例），其相应的VEGF及thrombin蛋白表达阳性率分别为82．76%和80．56%，62．07%和63．89%，组间差异无显著性（P＞0．05）。观察组临床总有效率为36．92%，显著高于对照组的20．00%（P＜0．05）。结论 含洛铂化疗方案治疗HCC的疗效显著。CT作为诊断HCC的一种无创性检查手段，其表现特征与HCC组织中VEGF及thrombin蛋白表达水平有关，作用机制可能与VEGF及thrombin蛋白参与HCC的血管生成有关。

肝细胞癌；螺旋CT；血管内皮生长因子；凝血酶；洛铂

肝癌是常见的恶性肿瘤，发病率呈逐年上升趋势。血管内皮生长因子（VEGF）基因和凝血酶（thrombin）基因是与肿瘤侵袭转移相关的基因，目前对同时检测两者蛋白表达与肿瘤螺旋CT征象间的相关性鲜有研究[1-3]。目前，肝癌治疗手段主要包括外科治疗与局部治疗。本研究中采用含洛铂化疗方案治疗，通过对肝细胞癌（HCC）患者行CT平扫及增强扫描，并采用免疫组化SP法测定各组VEGF及thrombin的表达，同时统计螺旋CT征象与各指标间的关系，试图从HCC的VEGF及thrombin蛋白表达角度上分析螺旋CT征象，以评价肿瘤的生物学特性及肿瘤血管生成情况[4-5]，分析HCC影像改变及病理之间的关系，为HCC的影像学诊断、治疗方案选择和预后评估等提供帮助。

1 资料与方法

1．1 一般资料

收集医院2009年3月至2013年3月手术切除并经病理证实的HCC患者病理标本 120例。纳入标准：经影像学、病理学确诊为肝癌；病史资料完整；骨髓功能正常；签署知情同意书；均经医院伦理委员会批准。排除标准：不符合上述纳入标准；合并严重心、肝、肾等功能异常；药物过敏；妊娠或哺乳期妇女。所有患者扫描前及手术前未进行化学、介入等抗肿瘤治疗，均行CT平扫及三期增强扫描，于CT检查后2～28 d行手术治疗。根据随机数字表法将其随机分为观察组65例和对照组55例。观察组中，男 42例，女23例；年龄38～75岁，平均（56．52±3．84）岁；肿瘤直径最小1．52 cm，最大12．41 cm，平均（5．63±0．50）cm。对照组中，男36例，女19例；年龄 36～74岁，平均（57．16±3．25）岁；肿瘤直径最小1．56 cm，最大11．89 cm，平均（5．58±0．62）cm。两组患者一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0．05），具有可比性。

1．2 方法

观察组按照患者肿瘤大小以阿霉素（Antibioticos S．p．A，国药准字 X19990296）20～40 mg／m2+洛铂（海南长安国际制药有限公司，国药准字H20050308）40～50 mg／m2与碘油乳化后行介入治疗。对照组化疗方案中将洛铂换为顺铂（昆明贵研药业有限公司，国药准字H53020409）40～50 mg／m2，方法同观察组。

取观察组65例患者肝组织标本，均常规10%的福尔马林液固定，石蜡包埋，操作严格按照试剂盒（上海拜力生物科技有限公司）说明书标准。阳性对照为抑制的阳性切片，而阴性对照为正常肝组织，空白对照组为磷酸盐缓冲液（PBS）代替一抗。

1．3 疗效评定标准与观察指标

参照文献[6]标准评定疗效。完全缓解（CR）：患者所有目标病灶消失或功能性消失；部分缓解（PR）：患者目标病灶长径总和缩小不低于30%；疾病稳定（SD）：患者基线病灶总和有所缩小但未达PR；疾病进展（PD）：患者肝内新发病灶或原位新发病灶增长长径总和超过20%。总有效（RR）=CR+PR。

CT平扫可显示HCC病灶的部位、大小、形态和数目，并可了解肝脏的基础情况。增强扫描动脉期，绝大多数病灶都能见到强化表现；增强扫描门脉期，多数肝内病灶密度下降，低于正常肝组织；也有呈等密度或高密度的，分析其原因，与肝动脉和门脉参与肿瘤供血有关。因此，从以下5个方面进行分组。根据血供类型分组：HCC血供的CT分型根据平扫、动脉期、门脉期扫描CT表现，参考黄娟等[7]的方法，分为少供血型、肝动脉和门静脉双重供血型（以下简称双重供血型）、动脉供血型3组。其中少供血型HCC CT平扫病灶呈低密度影，在动脉期和门脉期扫描均无明显强化；双重供血型HCC CT平扫病灶呈高、等或低密度，动脉期病灶可强化，门脉期病灶强化程度减低；动脉供血型HCC CT平扫病灶呈高、等或低密度，动脉期明显强化，门脉期强化明显减低或不强化，典型表现为“快进快出”。根据侵袭危险性分组：动脉期图像上出现肝门和（或）腹腔淋巴结转移者，门静脉癌栓以及主癌灶周围出现卫星病灶者为高危组；未出现以上征象者为低危组。根据强化特征分组：肿瘤在平扫基础上CT值增加幅度大于30 HU为明显强化，不超过30 HU为不明显强化。根据边界情况分组：清晰型是指肿瘤边缘显示清晰、边界完整；欠清晰型是指肿瘤与正常肝组织无明确分界线，边缘形态不规则。根据癌灶大小分组：直径不超过5 cm为结节型肝癌组，直径大于5 cm为巨块型肝癌组。

1．4 统计学处理

采用SPSS 13．0统计软件分析处理。计数资料组间比较采用χ2检验。P＜0．05为差异有统计学意义。

2 结果

2．1 临床疗效

结果见表1。观察组总有效率显著高于对照组（χ2=4．130，P＜0．05）。

表1 两组患者临床疗效比较[例（%）]

2．2 HCC CT征象与VEGF及thrombin蛋白表达的关系

结果见表2。结果提示，VEGF及thrombin蛋白表达水平增高与HCC的CT表现血供分型显著相关，双重供血型组与动脉供血型组阳性率均明显高于少供血型组（P＜0．05）；VEGF及thrombin蛋白表达水平增高与HCC侵袭危险性显著相关，高危组阳性率明显高于低危组（P＜0．05）；VEGF及 thrombin蛋白表达水平增高与HCC CT图像强化特征显著相关，明显强化组阳性率明显高于无明显强化组（P＜0．05）；VEGF及 thrombin蛋白表达水平增高与HCC的CT表现边界是否清晰显著相关，边界清晰型组阳性率明显高于边界欠清晰型组（P＜0．05）；VEGF及thrombin蛋白表达水平增高与HCC瘤体大小无显著性相关，瘤体直径≤5 cm组和直径＞5 cm组阳性率差异无显著性（P＞0．05）。

表2 HCC CT征象与VEGF及thrombin蛋白表达的关系[例（%）]

3 讨论

许多研究表明，HCC的发病机制与众多因素有关。可诱发肝癌的因素包括黄曲霉毒素污染、乙型肝炎病毒（HBV）或丙型肝炎病毒（HCV）感染、饮酒和电离辐射、遗传毒性的人类代谢物等，大多直接作用于肝细胞的遗传物质，引起 DNA损伤，这是 HCC发生的一个重要的分子学基础。深入研究HCC的机制，特别是从基因水平研究，可能在预防和诊断HCC上取得突破性进展。介入治疗作为治疗HCC的一种新兴方法，越来越受到临床重视，同时肿瘤基因治疗也正在成为研究热点[8]。近年来，许多研究利用影像学手段探讨肿瘤的CT表现与相关因子之间的关系，分析HCC螺旋CT增强征象和肿瘤血管生成及相关因子的表达关系，可进一步认识CT征象的意义[9]。肿瘤新生血管的形成决定HCC血供类型，血供类型又决定了 CT的强化表现，故 HCC的 VEGF及thrombin表达与 CT表现之间存在着必然的联系[7，10]。因此，通过研究CT增强的特点可以间接推测肿瘤的血供特点。本研究中共收集HCC患者65例（男42例，女23例），根据血供多少和CT强化表现，将其分为少供血型、双重供血型和动脉供血型3类，患者数分别为12例（18．46%）、19例（29．23%）、34例（52．31%），可见，HCC的血供大都很丰富。但有些HCC的影像学表现不典型，仅靠影像学信息还不能满足临床需要，需要多方面的临床信息来进行综合判断。本研究结果显示，VEGF及thrombin蛋白的表达与HCC CT表现的血供分型显著相关（P＜0．05）。

肝癌的发生与晚期肝慢性疾病以及肝硬化关系密切，故通常预后较差，仅少数患者能得到根治治疗，而大多数患者需接受经导管肝动脉化疗栓塞（TACE）治疗。多种化疗药物联用能明显延长患者生存时间，但毒副作用也会相应增多。洛铂具有很好的溶解度，且在水中较稳定，能确保肿瘤血管内的高血药浓度，从而延长了对肿瘤的灭活时间。本研究结果显示，含洛铂化疗方案治疗HCC的总有效率显著高于含顺铂方案（P＜0．05），提示含洛铂化疗方案疗效显著。

综上所述，含洛铂化疗方案治疗 HCC疗效显著；VEGF及thrombin蛋白表达等多个因素会因影响 HCC的血管生成而影响HCC的CT表现，CT增强图像特征对于HCC的临床诊疗有重要的应用价值。作者简介:吴云军（1971-），男，大学本科，副主任医师，研究方向为CT诊断（血管造影），（电子信箱）manlipu1221＠163．com。

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Efficacy of Lobaplatin Containing Chemotherapeutic Regimen in Hepatocellular Carcinoma and Correlation between Hepatocellular Carcinoma with VEGF,Thrombin Protein Expression Level

Wu Yunjun
(Department of Radiology,Benxi Municipal Central Hospital,Benxi,Liaoning,China 117000)

Objective To analyze the correlation between the VEGF and thrombin expression levels with hepatocellular carcinoma(HCC) and the clinical efficacy of lobaplatin containing chemotherapeutic regimen．M ethods The clinical data in 120 cases of HCC were collected and randomly divided into the observation group(65 cases)and the control group(55 cases)according to the random number table．The control group was treated by the cisplatin-containing regimen,while the observation group by the lobaplatin-containing chemotherapeutic regimens．All cases underwent CT plain scan and triple-phase enhanced scan;all tissue samples routinely adopted 10% formalin solution for conducting fixation and paraffin embedding;the VEGF and thrombin protein expression levels were measured by the immunohistochemical staining method．Results Among 65 cases in the observation group,HCC could be divided into the less blood supply group(12 cases), dual blood supply group(19 cases)and the arterial blood supply group(34 cases)according to the blood supply characteristics in CT imaging,the positive rate of protein expression had statistically significant differences among the various groups(P＜0．05)．According to the invasion characteristics in CT imaging,HCC could be divided into the low risk group(30 cases)and the high risk group(35 cases),the positive rates of VEGF and thrombin protein expression were 73．33%,88．57%and 36．67%,85．71%,respectively,the differences between the two groups were statistically significant(P＜0．05)．According to whether the CT imaging being obviously enhanced,HCC could be divided into the obvious enhancement group(31 cases)and the non-enhancement group(34 cases),the protein expression had statistical differences between the two groups(P＜0．05)．According to whether the tumor boundary being clear in the CT imaging,HCC could be divided into the clear boundary group(21 cases)and the less clear boundary group(44 cases),the positive rates of VEGF and thrombin protein expression were 71．43%,86．36% and 47．62%,70．45% respectively,the differences between the two groups had statistical significance (P＜0．05)．According to the tumor size in CT imaging,HCC could be divided into the tumor diameter≤5 cm group(29 cases)and the tumor diameter＞5 cm group(36 cases),the positive rate of VEGF and thrombin protein expression were 82．76%,80．56% and 62．07%, 63．89% respectively,the differences between the two groups had no statistical significance(P＞0．05)．The total effective rate in the observation group was 36．92%,which was significantly higher than 20．00% in the control group(P＜0．05)．Conclusion The lobaplatin-containing chemotherapeutic regimen has significant effect for treating HCC,the manifestation characteristics of CT as a noninvasive examination measure for diagnosing HCC are related with the VEGF and thrombin protein expression levels in HCC tissue,its mechanism may be related with VEGF and thrombin proteins participating in HCC angiogenesis．

hepatocellular carcinoma;spiral CT;vascular endothelial growth factor;thrombin;lobaplatin

R969.4；R979.1；R445

A

1006-4931(2015)05-0018-03

2014-10-27)