罗红霉素原料的含量测定

张喜瑞

（上海现代哈森（商丘）药业有限公司 河南商丘 476000）

罗红霉素 英文名：Roxithromycin，英文别名：Claramid、Rulid。白色结晶性粉末，无臭，味苦，略有引湿性)。易溶于乙醇或丙酮，在甲醇中溶解，略溶于乙腈，几不溶于水。比旋度-82°至-87°。罗红霉素是新一代大环内酯类抗生素，主要用于厌氧菌、革兰氏阳性菌、支原体和衣原体等。其具有与红霉素累死的体外抗菌作用，相比红霉素体内作用强1-4 倍。本文介绍了原料药罗红霉素的鉴别和检测项目以及含量测定方法。

图1 罗红霉素结构图与分子式

一、罗红霉素性状检验：比旋度

用分析天平，精密称取本品2.0006g，2.0011g，分别置100 ml 容量瓶中，加无水乙醇溶解并稀释至刻度，用数字式自动旋光仪测定，测值为：-3.372°，-3.374°，

平均值：-84.28°按无水物计算：-84.28°/（1-2.1%）= -86°（标准规定：比旋度为-82°～-87°）

二、罗红霉素的检查项目

（1）有关物质 用分析天平精密称取本品 0.1008g，置与容积为50ml 的容量瓶中，加流动相进行溶解，并稀释至刻度，将其作为供试品溶液；精密量取1.00ml，置与容积为100ml 的量瓶中，加入流动相使其稀释至刻度，充分摇匀后作为对照溶液；依照含量测定下的色谱条件，取对照溶液20ul，并将其注入液相色谱仪，同时调节检测灵敏度，使主成份色谱峰的峰高达到满量程的20%左右；随后，精密量取供试品溶液20ul 与对照溶液20ul，分别将其注入液相色谱仪中，记录色谱图至主成份峰保留时间的4 倍。

S 对：63.55 S

单杂：25.16

S 杂和：94.94

计算得单杂峰面积为0.4%，各杂质峰面积的和为1.5%，符合规定

（标准规定：供试品溶液色谱图中如有杂质峰，除二甲基甲酰胺峰（用流动相制成0.001%的二甲基甲酰胺溶液同法测定，按保留时间定位）外，单个杂质的峰面积不得大于对照溶液主峰面积（1.0%），各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的4 倍（4.0%），供试品溶液色谱图中任何小于对照溶液主峰面积0.1 倍的峰可忽略不计。）

（2）残留溶剂

甲醇与丙酮，用分析天平精密称取本品0.2029g，0.2011g，置顶空瓶中，精密加二甲基亚砜5.00 ml 使溶解，密封，作为供试品溶液；精密称取甲醇1.2019 g，丙酮2.0037g，置同一 100 ml 量瓶中，用二甲基亚砜稀释至刻度，再精密量取1.00 ml，置 100ml 量瓶中，用二甲基亚砜稀释至刻度，精密量取此混合液5.00ml，置顶空瓶中，密封，作为对照品溶液。照残留溶剂法测定，以6%氰丙基苯基-94%二甲基聚硅氧烷（或极性相近）为固定液的毛细管柱为色谱柱，起始温度为40℃，维持5 分钟，以每分钟30℃ 的速率升至200℃，维持3 分钟；检测器温度为250℃；进样口温度为230℃；顶空瓶平衡温度为105℃，平衡时间为30 分钟。取对照品溶液顶空进样，各成分峰间的分离度应符合要求。取供试品溶液和对照品溶液分别顶空进样，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，均应符合规定。（标准规定：甲醇应不得过0.3%；丙酮应不得过0.5%）

三、罗红霉素含量测定

照高效液相色谱法测定

色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.067mol/L 磷酸二氢铵溶液（用三乙胺调节PH 值至6.5）-乙腈（65：35）为流动相；检测波长为210nm；用分析天平精密称取罗红霉素对照品0.01004g 和红霉素标准品0.00998g，置同一10ml 容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度。取20μl 注入液相色谱仪，罗红霉素的保留时间约为14 分钟，其与红霉素峰的分离度应不小于15.0，罗红霉素峰与相对保留时间约为0.95 处的杂质峰的分离度应不小于1.0，与相对保留时间约为1.2 处杂质峰的分离度应不小于2.0。

测定法

用分析天平精密称取（1）0.05061 g（2）0.04970g分别置50ml 容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，精密量取20ul 注入色谱仪，记录色谱图。另用分析天平精密称取罗红霉素对照品（标示含量：94.7% ）0.02429g,0.02425g，分别置25ml 容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，同法测定。按外标法以峰面积计算即得。

根据公式计算得平均值： 95.24% 相对平均偏差： 0.05%

按无水计:95.24%/(1-2.1%)×100%=97.3%

（标准规定：按无水物计算,含C41H76N2O15应不少于94.0%）

以上检验方法是本企业长期惯用的检验方法，能够确保产品质量的稳定。

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