蝙蝠葛碱透皮扩散促渗剂的研究分析①

孙淑波,李 冬,时 慧,高洪霞,张沙莎

(佳木斯大学附属第一医院药剂科,黑龙江 佳木斯 154003)

蝙蝠葛碱透皮扩散促渗剂的研究分析①

孙淑波,李 冬,时 慧,高洪霞,张沙莎

(佳木斯大学附属第一医院药剂科,黑龙江 佳木斯 154003)

目的:比较、分析、选择蝙蝠葛碱透皮扩散促渗剂。方法:通过改良Franz扩散池,根据Q-t方程和通过考察透皮速率常数,从1%丙二酮，3%Azone，3%OA，十二烷基硫酸钠，冰片，6%尿素，5%松节油中分析比较出最适合蝙蝠葛酚性碱的透皮扩散促渗剂。结果:由实验结果得出3%氮酮为较好透皮渗透促进剂。结论:此研究操作方法简单易行,可重复性好。

蝙蝠葛碱；吸收促渗剂；透皮吸收

心脏病是比较常见的一类循环系统疾病。心脏、血管和神经体液组织(主要是调节血液循环)构成循环系统，这一系统的疾病被称为心血管病，属于内科疾病的常见病，其中以心脏病最为多见，能显著地影响患者的劳动力。目前发现，人类健康的头号杀手就是心脏病，多发于老年人群，它的发生往往让患者们束手无措，如果心脏病急性发作，很有很能会导致患者失去生命。统计显示，每年全世界有1700万人死于心脏病，每年，全世界死亡患者中，有三分之一是心脏病患者。而且，心脏病的危害很多：心力衰竭可引起低钾血症；心力衰竭引起低钠血症；心力衰竭病人要忍受极大痛苦：呼吸困难、足踝肿胀、精疲力竭等症状；心力衰竭给病人及家属带来诸多的不便和沉重的负担；心力衰竭可严重影响病人的生活质量。

蝙蝠葛碱是从常用中药防己科植物蝙蝠葛根茎中提取出的类似生物碱结构的混合物。目前已有研究表明，蝙蝠葛碱可用于预防和治疗冠心病、心绞痛，心律失常等常见疾病。但是通过调查发现，市面上主要还是以口服的剂型为主，例如：片剂，粉针剂，胶囊剂等[1,2]。本次实验的主要出发点是：避免胃肠道的降解和肝脏的首过效应。而且结合心血管疾病需要长期用药，需要保持平稳的血药浓度，需要尽量减少用药频率，需要保证给药间隔适当延长，需要在发病期能够及时准确地给药等特点，结合药物理化性质，将蝙蝠葛碱研发出不同以往的外用制剂品种。

1 仪器与试药

1.1 实验所用的仪器

TP-5型智能透皮扩散仪(天津市鑫洲科技有限公司)， 101-1AB型电热鼓风干燥箱(天津市泰斯特仪器有限公司)，Agilent1100型高效液相色谱仪(美国安捷伦科技有限公司)，SK250LH超声波清洗器(上海科导超声仪器有限公司)，艾科勒ALC-210.4型电子天平(上海兰科仪器有限公司)。

1.2 实验的药品与试剂

蝙蝠葛碱对照品(厂家购买)，去离子水(实验室自制)，甲醇及乙腈(色谱纯)，丙二醇(分析纯，天津市科密欧化学试剂有限公司)，油酸(分析纯，沈阳市东陵区红日化工厂)，尿素(分析纯，沈阳市试剂五厂)，松节油(分析纯，哈尔滨市化工化学试剂厂)，氮酮(分析纯，天津市博迪化工有限公司)，十二烷基硫酸钠(化学纯，天津市光复精细化工研究所)，冰片(教研室样品)。

1.3 实验所需的动物

家兔(黑龙江中医药大学，合格证编号：200101008)，雄性，体重(2500±3)g。

2 方法与结果

2.1 色谱条件的建立

色谱柱:Hypersil ODS-C18(150 mm×4.6 mm,5 μm)；流动相:缓冲液(将1.36 mL磷酸和1.42 mL的三乙胺加纯净水至1000 mL)-乙腈(76:24)；检测波长:280 nm；柱温:41℃；流速:1.1 mL·min-1；进样量:5.0 μL 。

2.2 贮备液的制备

精密称取蝙蝠葛碱对照品0.00398g，置于25mL量瓶中，用已选好的最佳pH 5.8磷酸盐生理盐水缓冲液定容(溶液浓度为0.1592μg·μL-1)，然后过0.45μm微孔滤膜备用。

2.3 标准曲线的建立

取对照品溶液，每种溶液分别进样1，3，5，7，9，11 μL，测定后，以蝙蝠葛碱进样量(X)为横坐标，色谱峰面积积分值(Y)为纵坐标，得出标准曲线，经计算得出回归方程Y=750.44X-27.82，r=0.9995，确定蝙蝠葛碱0.3562～1.8384 μg·μL-1质量浓度范围内呈线性关系。见图1。

2.4 稳定性试验

取样品溶液，于0，3，6，9，12，15，18 h每次进样5.0μL，以蝙蝠葛碱的含量计算，RSD为3.92%。由此实验可以说明样品稳定性良好。

2.5 精密度试验

取蝙蝠葛碱对照品溶液10 μL，按实验操作要求，反复重复进样10次，测定对照品溶液吸收峰面积，所得结果为：RSD为 2.68 %

图1 蝙蝠葛碱标准曲线

2.6 加样回收试验

将蝙蝠葛碱对照品贮备液10份分别加入供试品溶液，充分摇匀，完全溶解，微孔膜滤过，进样5.0μL，测峰面积，反复进样10次，结果代入回归方程，换算成实际浓度，得出样品的平均回收率为101%，RSD为 0.97 % 。

2.7 制备八种蝙蝠葛酚性碱溶液

精密称取蝙蝠葛酚性碱6.0005mg，置10 mL量瓶中加去离子水定容，备用。精密量取蝙蝠葛酚性碱溶液8份，其中第一份直接加去离子水置100 mL量瓶中定容，备用。其余七份分别配成含有3%OA，1%丙二酮， 3%Azone，冰片，6%尿素，5%松节油，十二烷基硫酸钠的溶液各100mL，将八种溶液分别编号为1～8，备用。

2.8 皮片的制备

首先，取一张事先准备好的已经去毛、去结缔组织的兔皮[3]，然后，剪取大小合适的椭圆形皮片，最后，在扩散池及接收池中间位置用以消毒的夹子固定皮片。

2.9 透皮吸收试验

将Franz扩散池加满水，调温于37 ℃，转速为300r·min-1，加热。当达到(37±0.5)℃后，接收池放入磁搅拌子，加入12mL的pH 5.8磷酸盐生理盐水缓冲液接收液，将八种预先配好的蝙蝠葛碱溶液分别加入每个扩散池中，放入顶部的水浴。在实验开始后的1，3，5，7，9 ，11 ，13 h吸取各接收池中6mL的样品，放入已经备用的西林瓶中，将标签粘贴好，不断地补充6mL接收液。所得样品液放入冰箱中冷藏，备用。

2.10 测定体外透皮速率常数

将样品溶液测峰面积(在280nm下)，分别计算样品浓度。计算累积渗透量Q值。具体公式如下：

表1 加入不同促渗剂蝙蝠葛碱的Q-t方程

从表1可以看出，3%Azone的J= 687.55μg·cm-2·h-1(P<0.05)，选其为蝙蝠葛碱透皮实验的促渗剂。

3 讨论

3.1 蝙蝠葛碱具有抗早后去极化所致心律失常作用，能减少心肌去甲肾上腺素出胞释放量，抑制交感神经纤维上钠通道及钙通道，降低H+-ATP酶活性,阻止钠进入囊泡,导致囊泡中钠含量减少。蝙蝠葛碱能增高胞浆内单胺氧化酶MAO活性,加速胞浆内钠降解,减少钠进入囊泡，拮抗钙通道。蝙蝠葛碱可减慢心率、延长P-R间期及窦房传导时间。蝙蝠葛碱可抑制缺血/再灌注性室颤发生。蝙蝠葛碱可减少停灌20min后心脏钠释放，可抑制缺血心脏钠非出胞释放。蝙蝠葛碱具有降低心肌耗氧量作用，扩张外周血管降低血压,减轻心脏负荷。蝙蝠葛碱减慢心率作用也减少了心肌对氧的消耗 。综上，蝙蝠葛碱可用于治疗心律失常及心肌缺血性疾患。

3.2 经筛选，从所得实验数据可以看出：3%Azone为促进吸收剂时，蝙蝠葛碱的透皮速率常数是最大的，而且3%Azone的实验成本不是特别高，可以考虑选用3%Azone为蝙蝠葛碱透皮扩散的促渗剂。本次实验的方法相对来说，还是比较简单可靠，重复率高的，而且实验的结果真实稳定，为蝙蝠葛碱经皮给药进一步研究提供有利的基本理论依据 ，为后续筛选外用制剂剂型工作时，免去了考虑吸收渗透剂的影响，为比较蝙蝠葛碱巴布膏剂，透皮贴剂，橡胶膏剂等剂型体外吸收奠定了前期必要的实验基础。

3.3 虽然经皮给药系统有它的缺点(考虑皮肤的不透过性，考虑部分药物的活性是否合适制成经皮给药制剂，考虑某些特殊体质的患者有可能发生接触性皮炎等等)，但是作为现代药剂学研究的热点，经皮给药系统以它独特的优势逐渐地代替很多的口服制剂。在研究经皮给药系统时，要综合考虑多种相关因素，选择合适的药物、辅料、工艺都成为要全面考虑到的对象。如何选用先进的技术，使中药材减小原本庞大的体积，使中药提取物能够便于成型和保持药物特殊的疗效，增强药物的透皮吸收的程度，实现成品质量的稳定性和可控性，还要在后续实验中进一步的研究。

[1]徐敏.中药透皮吸收制剂的研究概况[J].中国中医药科技，2008，15(2):159

[2]吴铁，张志平. 薄荷脑促进扑热息痛透皮吸收作用研究[J]. 中国医院药学杂志，1992，12(3):104

[3]卢闻， 贺浪冲. 白芷香豆素类有效部位体外透皮特性研究[J]. 中国药学杂志，2003，38(12)：939

The research and analysis on Dauricine transdermal penetration enhancers on the research and analysis

SUNShu-bo,LIDong,SHIHui,GAOHong-xia,ZHANGSha-sha

(the First Affiliated Hospital of Jiamusi University,Jiamusi 154003, China)

Objective: To compare,analyzesis, and selection of Dauricine transdermal penetration enhancers.Methods: The most suitablePAMD transdermal diffusion penetration enhancers 5% turpentine was analyzed and compared by modified Franz diffusion cell,the Q-t equation and percutaneous rate constant through the inspection according to the,from 1% C two ketone,3%Azone,3% OA, twelve sodium alkyl sulfate,borneol,6% urea,analysis and comparison of the most suitable PAMD transdermal diffusion penetration enhancers 5% turpentine.Results:Tthe effect of 3% azoneas good transdermal penetration enhancers was good.Conclusion:Tthe research method of operation is simple with,good repeatability.

Dauricine; penetration enhancers on the transdermal absorption

孙淑波(1977-)女，黑龙江佳木斯人，学士，主管药师。

张艳霞(1982～)女，黑龙江佳木斯人，硕士，主管药师。E-mail：zhangyanxia119@126.com。

R285.1

A

1008-0104(2015)04-0070-02

2015-03-10)