番茄红素对慢性酒精中毒肝损伤的保护作用研究

蔡丽梅 李嘉慧 肖青

·实验研究·

番茄红素对慢性酒精中毒肝损伤的保护作用研究

蔡丽梅 李嘉慧 肖青

目的 研究番茄红素对慢性酒精中毒小鼠肝损伤的保护作用, 探索其发挥保护作用的机制。方法 建立小鼠慢性酒精中毒模型, 以番茄红素灌胃治疗, 并建立对照组。通过比较各组小鼠整体外观、组织形态变化以及各组小鼠肝脏匀浆中谷草转氨酶( AST )、谷丙转氨酶( ALT )等指标的变化情况,分析番茄红素对慢性酒精中毒肝脏的治疗作用。结果 番茄红素对小鼠营养状态、应激能力等有所提升,可以降低肝组织AST、ALT活力, 并减少肝脏脂肪变性。结论 番茄红素对慢性酒精中毒肝损伤有保护作用。

番茄红素；慢性酒精中毒；肝损伤

番茄红素是成熟番茄的主要色素, 是一种不含氧的类胡萝卜素。在类胡萝卜素中, 它具有最强的抗氧化活性, 是迄今为止自然界中被发现的最强抗氧化剂之一。有研究表明［1］,醉酒后服用番茄红素, 可以减轻头痛、呕吐等醉酒症状。尽管番茄红素有解酒功能, 但其对慢性酒精中毒肝脏的预防性保护作用的研究目前仍尚未见报道, 因此, 本课题通过研究番茄红素能对慢性酒精中毒导致的肝损伤的保护作用, 可提供一种新的治疗慢性酒精中毒的保肝方法, 为后续对番茄红素的研究和治疗慢性酒精中毒患者提供参考, 具有一定的现实意义和价值。

1 材料与方法

1.1 主要药品及试剂 泸州老白干, 酒精度52%vol；番茄红素, 用食用调和油稀释；谷丙转氨酶(ALT/GPT)测试盒；谷草转氨酶(AST/GOT)测试盒。

1.2 动物 小白鼠, 雌雄随机, 28～35 g。

1.3 方法 将小鼠随机分成五组, 正常组：无白酒灌胃；酒精组：前2周, 每天52%白酒以8 ml/kg剂量灌胃1次,第3周调整白酒剂量以12 ml/kg灌胃1次, 建立模型［2］；番茄红素保护组：每天白酒灌胃, 5 h后, 番茄红素分别以5、10、20 mg/kg灌胃, 并根据番茄红素灌胃剂量分为5 mg/kg番茄红素组、10 mg/kg番茄红素组和20 mg/kg番茄红素组。8周后处死所有小鼠, 分别取各组小鼠肝脏用于检测。

1.4 观察指标

1.4.1 小鼠整体情况观察 观察各组小鼠毛色, 精神状态,应激能力以及营养状态等。

1.4.2 肝组织观察 取小块肝组织, 制取肝细胞切片, HE染色观察肝组织的形态变化。

1.4.3 肝脏功能评价 制备肝匀浆, 按测试盒说明书对ALT、AST进行检测。

1.5 统计学方法 用统计软件Graphpad进行统计学分析。计量资料以均数±标准差( x-±s)表示, 采用t检验；计数资料以率(%)表示, 采用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 一般情况比较 对照组小鼠毛色有光泽, 反应敏捷,营养状态好；酒精组小鼠毛色晦暗, 精神萎靡, 瘦弱；低剂量(5 mg/kg)番茄红素保护组毛色与酒精组比较, 反应敏捷程度有所提高, 营养状态好转, 但是番茄红素浓度越高(10、20 mg/kg),则小鼠状态越不好, 甚至与酒精组无别。

2.2 肝组织病理学变化 光镜下可见, 酒精组肝小叶界限不清, 肝细胞出现空泡变性, 同时散在淋巴细胞及单核细胞；5 mg/kg番茄红素组肝小叶结构清晰, 肝组织极少量空泡；10 mg/kg番茄红素组肝小叶结构出现疏松；20 mg/kg番茄红素组肝小叶结构界限开始不清且呈现明显疏松状态。

2.3 肝组织ALT与AST比较 与正常对照组比较, 酒精组小鼠肝组织ALT、AST明显升高(19.53±5.66)U/L, (10.14± 2.09)U/L。与酒精组比较, 番茄红素(5 mg/kg)能显著降低肝组织ALT、AST(2.56±0.91)U/L、(2.05±0.98)U/L；番茄红素给药剂量增加(10、20 mg/kg), ALT、AST明显回升10 mg/kg：(7.13±3.78)U/L、(6.67±0.83) U/L；20 mg/kg：(19.3±2.56)U/L、(7.02±2.64)U/L。

3 讨论

过量饮酒及酗酒对人体健康的危害正成为日益严重的社会问题, 长期大量饮酒可导致慢性的酒精中毒, 对肝脏的损伤非常大。其中, 酒精代谢产生的氧化应激损伤是肝损伤的重要机制之一［3］。

本研究结果显示, 持续用白酒灌胃小鼠8周后, 酒精组小鼠精神状态及应激能力等明显下降, 肝脏组织边缘界限模糊, 肝细胞脂肪变性明显增加, 肝组织AST、ALT水平明显增加, 证明小鼠肝脏严重损伤, 模型建立成功。ALT主要存在于肝细胞浆中, 当肝细胞损伤时, 细胞内转氨酶可进入组织中, 导致组织中ALT的水平升高。AST也存在于肝细胞浆内, 并分布于线粒体内, 当肝细胞严重损伤时, AST从线粒体内释放到组织中, 使得组织中AST水平升高［4］。而本实验中适量的番茄红素(5 mg/kg)降低肝组织中AST、ALT水平, 肝脏脂肪变性等明显减少, 表明番茄红素能一定程度上保护肝细胞不受酒精损害。有研究表明, 番茄红素可以增加超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力及总抗氧化能力(T-AOC)升高, 降低丙二醛(MDA)含量［5］, 说明番茄红素具有良好的抗氧化能力。故本实验室下一步将继续研究番茄红素对慢性酒精中毒肝损伤的可能保护机制。

在研究中还发现番茄红素低剂量(5 mg/kg)的效果最好,能明显减少空泡的出现, 并能显著改善肝组织结构, 降低AST和ALT水平；而增加剂量(10、20 mg/kg)导致肝脏组织重新出现疏松, 特别是20 mg/kg时肝脏组织又出现明显的结构界限不清和显著的组织疏松, 且AST和ALT水平又明显回升, 表明肝脏损伤加重。此结果可能与长时间给予高剂量番茄红素会超出小鼠肝脏的代谢承载能力或导致有关组织细胞发生病理变化有关。关于番茄红素最佳剂量的确定, 还可以扩大样本、增设剂量组进行更深入的研究。

综上所述, 长期服用番茄红素对慢性酒精中毒小鼠肝损伤有一定的预防性保护作用, 在临床上为慢性酒精中毒患者提供一种新型廉价的保肝药物提供新的基础证据。

［1］ 金丽芬, 张晓燕, 夏文明.番茄红素的研究进展.海军医学杂志, 2010, 31(1):91-92.

［2］ 刘坤, 仓怀芹, 高华,等.硫酸软骨素对慢性酒精中毒模型大鼠脑组织神经递质的影响研究.中国药房, 2011, 22(9):798-800.

［3］ 杨万枝, 吕雄文.酒精性肝病发病机制研究进展.安徽医科大学学报, 2012, 47(1):97-99.

［4］ 吕圭源, 陈素红, 张丽丹,等.铁皮石斛对小鼠慢性酒精性肝损伤模型血清2种转氨酶及胆固醇的影响.中国实验方剂学杂志, 2010, 16(6):192-193.

［5］ 潘洪志, 万丽葵, 胡万胜,等.番茄红素对CCl4致大鼠肝肾抗氧化功能改变的保护作用.卫生研究, 2006, 35(3):329-330.

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.11.205

2014-12-11］

广州医科大学学生课外学术科技项目, (项目编号：2013A025)

510182 广州医科大学药理教研室

肖青