病理切片制作过程中常见问题及处理对策

郭海燕　王志生　王亦飞　吴巍

病理切片制作过程中常见问题及处理对策

郭海燕王志生王亦飞吴巍

目的 探讨病理切片制作过程中常见问题及处理对策。方法 选取我院病理切片坏片512件，分析其相关因素及处理对策。结果 病理切片制作过程中包埋切片、标本固定、染色固封三个过程导致坏片几率较高。试剂试药、器械原因、环境原因是导致坏片的主要因素。结论 严格规范病理切片制作过程中的各项操作是降低坏片率的关键。

病理切片；常见问题；原因分析

病理组织切片技术在病理实验室中是较为基本的一种方法，在临床外科病理中是最为基本的一种形态学检验技术[1]。病理组织切片制作质量是否符合标准，对于病理诊断准确性具有一定影响。本文选取病理切片坏片512件，分析其相关因素及处理对策，现报道如下。

1　资料与方法

1.1一般资料

选取我院2012年1月～2014年3月病理切片坏片512件。

1.2方法

统计分析在病理切片制作过程中出现坏片环节及引发此情况发生的相关原因，并总结其相应对策。

2　结果

在本文所选取的512例坏片病理切片中，包埋切片、标本固定、染色固封三个过程造成的坏片比例较高，其所占比率分别为34.18%（175/512）、21.48%（110/512）、19.53%（100/512）；其次为取材与添加试剂试药，分别占14.26%（73/512）、10.55%（54/512）；造成坏片主要原因为操作不当306例（59.77%），试剂试药54例（10.55%），器械原因143例（27.93%），环境原因9例（1.76%）。

3　讨论

3.1组织标本固定

当临床医生获得病理标本后，需及时将标本放置到有充足固定液的容器中，固定液量通常为标本体积的4～5倍，也可在15～20倍范围[2]。大标本或存在包膜标本需切开固定，在切开时间距保持1 cm左右，且注意不将其完全断开，需保留标本原本形状。所用固定时间需根据标本大小进行确定，小标本通常需≥4 h，大标本通常≥8 h，尽量避免出现固定未及时或无充分性的情况发生，造成标本干涸或腐败情况导致无法顺利制片。

3.2标本取材规范化

将标本完全固定后进行取材。取材过程需尽可能去掉多余或无相关性组织，切面需保持平整性。小标本通常全部进行制片，大标本则需在病变位置、病变与正常组织交界位置多处进行取材。取得的组织块需注意形状具有规则性，大小合理，薄厚保持一致性，通常为1.5 cm×1.5 cm×0.2 cm[3]。有的组织在取材时则具有较高灵活性，组织质硬韧时则取薄一些，组织具有一定疏松性时则适当取厚，当全喉切除时则制作大切片。在对骨组织进行取材时则需经充分脱钙后实施，以大头针轻扎骨组织能够穿入则可。在取材过程中避免用力挤压，防止组织因受压而出现变形情况。

3.3及时更换试剂

切片过程若试剂浓度出现变化，则往往对组织脱水、透明、浸蜡效果造成一定影响，有的试剂由于挥发而混至其他试剂中，甚至使得病理组织受到一定污染，由此出现误诊现象。所以在制片过程中需观察试剂变化，按照标本量大小立即更换试剂，保证组织处理具有合理性。

3.4严格执行包埋及切片操作

对于碎小组织需包埋到同一个平面上，在包埋时经热镊子处理使得预制好蜡块表面进行熔化，从而使得碎组织完全包埋到同一平面，在表面发生初凝时，及时以平滑金属板对其进行片刻轻压。小块组织需进行线状包埋，大块组织则需在包埋时进行压平处理。对于囊壁、管壁组织或操作突起组织需及时进行包埋或沿突起纵切面进行包埋，注意观察各个层次。在进行切片前需确保刀具有锋利性，避免切片出现断裂、破碎情况[4]。蜡块切片机需进行良好固定，避免对切片刀及组织块造成损伤。切片确保完整性，需将每块组织完全切出，且需切至最大面，避免出现漏诊情况。蜡片出现弯曲极有可能因刀锋不均匀，切片刀并未磨直，切片刀与蜡块无平行性。切片发生裂痕极有可能是切片刀存在缺口，石蜡中出现杂质，组织中存在钙化、骨片或线结，或是棉纸纤维等。当切片存在不连片现象，切不下片，切片较厚或切片后蜡块呈现白色，内陷组织无良好脱水，一般需将蜡块进行溶解，取出组织，置入加热水浴的丙酮内（80℃），持续30～60 min，然后予以透明浸蜡包埋切片。

3.5合理染色封固

注意把握烤片条件，通常60℃烤片持续0.5～1 h；加强对脱蜡的重视，避免因脱蜡不干净而对着色造成影响；且应加强对盐酸乙醇分化的重视避免因分化效果不佳而导致染色失败[5]。且树胶稠度需保持适度，避免溢胶或封片不完全、空泡现象发生。将切片固封后，需立即贴标签，避免发生混淆情况。

[1] 张中海. 病理切片制作过程中常见问题及原因探析[J]. 吉林医学，2011，32（27）：5761.

[2] 孙岩. 病理组织切片染色中的常见问题及解决方法[J]. 中国医药指南，2013，11（28）：578-579.

[3] 王晓鸿，曹婉维. 制作优质HE病理组织切片的要素[J]. 中国实用医药，2011，6（6）：135-136.

[4] 陈顺平，朱育连，郑云，等. HE染色常规石蜡病理组织切片烘烤温度与时间关系的探讨[J]. 诊断病理学杂志，2013，20（2）：12.

[5] 辛英，朱兆霞，胡丽，等. 土豆片外敷在抽血外渗中的应用[J].中国疗养医学，2013，22（4）：350-351.

The Common Problems in the Process of Making Pathological Slices and Countermeasures

GUO Haiyan WANG Zhisheng WANG Yifei WU Wei, The Tumor Hospital of Jilin Province, Changchun 130021, China

Objective To explore the common problems in the process of making pathological section and countermeasures. Methods In our hospital pathological bad piece 512, analyze the related factors and treatment measures. Results The pathological process of making embedded sections, specimens were fixed, stained solid three processes lead to bad piece of higher probability. Reagents reagent, instrument reason, environmental reasons are the main factors which lead to bad film. Conclusion Strictly regulate the operation pathological production process is key to reduce the rate of bad piece.

Pathological, Common problem, Reason analysis

R35

B

1674-9308（2015）09-0184-01

10.3969/j.issn.1674-9308.2015.09.158

130021 长春，吉林省肿瘤医院

吴巍，E-mail：wuwei666@163.com