β1-肾上腺素受体自身抗体诱导的自噬和凋亡之间关系的研究

李　杨，王　丽，刘慧荣(山西医科大学基础医学院生理学系，山西太原03000;首都医科大学基础医学院病生教研室，北京00069)

β1-肾上腺素受体自身抗体诱导的自噬和凋亡之间关系的研究

李杨1，王丽1，刘慧荣2△
(1山西医科大学基础医学院生理学系，山西太原030001;2首都医科大学基础医学院病生教研室，北京100069)

目的:通过使用自噬激动剂、自噬抑制剂、凋亡抑制剂以及蛋白阻滞剂处理或预处理已由β1-肾上腺素受体自身抗体(β1-AA)造模的H9c2细胞，探讨能否通过人为因素调控细胞自噬从而下调心肌细胞凋亡，改善心功能受损。方法:采用不含EDTA的0. 25%胰蛋白酶消化传代H9c2心肌细胞，用含10%胎牛血清的DMEM高糖培养基进行培养，主动免疫Wistar大鼠获得的β1-AA对细胞进行24 h造模处理，或用自噬激动剂雷帕霉素、自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤、自噬抑制剂氯喹、凋亡抑制剂、蛋白阻滞剂分别单独给予或者联合处理细胞，采用Western blot以及RT-PCR对自噬的变化进行检测;对自噬变化组采用流式细胞术以及线粒体跨膜电位检测法对凋亡进行检测。结果: H9c2细胞约90%满时可传代并每隔约2天传代一次;β1-AA可诱导H9c2细胞发生自噬和凋亡;自噬和凋亡在一定范围内彼此影响，协同决定细胞死亡的发生。结论:β1-肾上腺素受体自身抗体诱导的自噬和凋亡在一定范围内彼此之间相互调节。

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