消银解毒饮对银屑病血热证患者皮损组织中细胞因子及外周血中T细胞亚群含量影响

万卉蕾

（河南省郑州人民医院医务部，河南 郑州 450003）

消银解毒饮对银屑病血热证患者皮损组织中细胞因子及外周血中T细胞亚群含量影响

万卉蕾

（河南省郑州人民医院医务部，河南 郑州 450003）

目的分析消银解毒饮治疗对银屑病血热证患者皮损组织中细胞因子含量及外周血中T细胞亚群含量的影响。方法选择在该院接受治疗的银屑病血热证患者78例作为研究对象，随机分为对照组（接受常规内科治疗）、观察组（在内科治疗基础上加入消银解毒饮治疗），每组各39例。留取皮损组织标本及外周静脉血，检测组织细胞因子诱导型一氧化氮合成酶（iNOS）、低氧诱导因子1α（HIF-1α）、热休克蛋白-60（HSP60）、热休克蛋白-90（HSP90）、白介素-2（IL-2）及白介素-6（IL-6）蛋白表达量，外周血T细胞亚群水平等差异。结果观察组患者接受治疗后的皮损组织中iNOS与HIF-1α蛋白表达量明显低于对照组患者（P＜0.05）。观察组患者接受治疗后的皮损组织中的HSP60、HSP90、IL-2及IL-6蛋白表达水平明显低于对照组（P＜0.05）。观察组患者接受消银解毒饮治疗后的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平较对照组上升（P＜0.05）。结论消银解毒饮应用于银屑病血热证患者中，可以有效抑制皮损组织中的相关细胞因子蛋白表达，优化T细胞亚群含量平衡，促进病情康复。

银屑病；消银解毒饮；细胞因子；T细胞亚群

银屑病是临床多见皮肤病，治疗难度大且易复发，是目前临床治疗的难点，给患者的身心均带来巨大伤害。银屑病的发生发展与机体各类细胞因子水平紊乱、T淋巴细胞失衡等均关系密切。目前中医治疗银屑病获得了较大的进展，中医理论认为银屑病病机为阳盛内热、气郁化火、气血流窜且发于肌肤，治疗应以消毒散瘀、消风止痒为主[1]。消银解毒饮是目前用于银屑病治疗的一类中成药物，主要成分为金银花、水牛角片、牡丹皮及全蝎，可以优化患者的全身微量因子水平及免疫水平[2]。本次研究主要分析消银解毒饮治疗对银屑病血热证患者皮损组织中细胞因子含量及外周血中T细胞亚群含量的影响，现汇报如下：

[28][32] 唐世平：《一个新的国际关系归因理论——不确定性的维度及其认知挑战》，《国际安全研究》2014年第2期，第3-41、8页。

1 资料与方法

1.1一般资料

选择2012年5月-2014年1月在本院确诊并接受治疗的银屑病血热证患者78例作为研究对象。纳入标准：①3月内无系统性应用免疫抑制剂、糖皮质激素等；②不伴有其他内科疾病，各项常规及肝肾功能检查指标正常；③患者在了解研究过程后签署知情同意书。排除标准：①关节炎型、红皮病型、脓疱型银屑病；②1年内妊娠、哺乳患者；③伴严重心肺系统疾病、恶性肿瘤患者；④神经或者精神病患者。根据接受的治疗方式不同随机分为观察组及对照组，每组各39例。观察组患者中，男性21例，女性18例；年龄23～58岁，平均（41.82±8.22）岁。对照组患者中，男性20例，女性19例；年龄22～56岁，平均（40.09±7.58）岁。两组患者的基线资料差异无统计学意义，P＞0.05，具有可比性。

1.2治疗方法

对照组患者接受银屑病常规治疗，于患处外擦青鹏膏剂，每日2次。观察组患者在常规治疗基础上加用消银解毒饮（水牛角、金银花、苦参及丹皮等），每日1剂，分早晚2次服用，以6周为1疗程。

热休克蛋白（heat-shock protein，HSP）是高度保守的“分子伴侣”，在细胞内参与了多个复杂的功能活动，HSP本身还可与受体结合发挥活化巨噬细胞、增强共刺激因子表达、促进多种细胞因子释放的作用[6]。HPSs正常情况下不表达于血液及细胞表面，当病毒感染或者机械损伤发生是，其表达迅速上调并释放到细胞外。银屑病的疾病病理变化是角质形成细胞的过度增殖，而角质形成细胞的生长动力是皮损区具有生长分化调控作用的细胞因子异常表达[7]。银屑病发病过程中免疫细胞协同发挥作用，分泌IL-2、IL-6等多种细胞因子，其作用于不同细胞并相互诱生，形成自我维持的恶性炎性循环。上述研究检测了患者病损组织中的HSPs、IL-2、IL-6表达情况，结果显示：治疗前两组患者的HSP60、HSP90、IL-2及IL-6蛋白表达水平差异无统计学意义（P＞0.05），观察组患者接受治疗后的HSP60、HSP90、IL-2及IL-6蛋白表达水平低于对照组（P＜0.05），可能与消银解毒饮的有效成分切断了HSP及炎症因子级联递呈的过程，减少T细胞进一步活化产生的特异性细胞免疫相关。

病损活检标本采用全蛋白提取试剂盒进行蛋白抽提，蛋白定量采用BCA蛋白浓度测定试剂盒，12%聚丙烯酰胺凝胶电泳后等量样品上样，随后转膜至硝酸纤维膜。采用磷酸盐缓冲溶液（phosphate buffered solution，PBS）洗膜后，5%脱脂牛奶中封闭孵育iNOS、HIF-1α、HIF-1α、HSP60、HSP90、IL-2及IL-6第一抗体。PBS洗膜后二抗稀释并孵育1 h；洗膜后检测采用增强化学发光试剂盒。以β-actin蛋白作为内参，设置治疗前对照组蛋白含量100，计算观察组相应指标的蛋白表达含量相对值。

免疫学发病机制是银屑病的研究热点，目前已经有较多动物实验证实：银屑病模型皮肤病损中，存在T淋巴细胞浸润，直接提示银屑病是一个由T淋巴细胞介导的自身免疫性疾病。关于T淋巴细胞在银屑病发病中具体发挥的作用，有学者认为是活化的T淋巴细胞迁移至病变部位，释放大量细胞因子进而引发角质形成细胞的过度表达及异常分化[8]。上述研究对银屑病患者接受治疗前后的外周血T细胞亚群水平进行检测，结果显示治疗前所有患者的外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平降低，而两组患者组间差异无统计学意义（P＞0.05），提示银屑病患者Th细胞变少。在对患者进行不同治疗后再次检测外周血T淋巴细胞水平发现：观察组患者的CD3+、CD4+及CD4+/CD8+水平较对照组上升（P＜0.05），提示经消银解毒饮治疗后患者的细胞免疫平衡得到一定程度恢复，是患者病情恢复的内在原因之一。

抽取所有入组患者外周静脉血5 ml，置于肝素抗凝管中2 h内送检，采用流式细胞仪检测其中T细胞亚群水平。

1.5统计学方法

[1]田海刚,胡帅,尤立平,等.凉血解毒汤对寻常型银屑病血热证患者外周血Th17细胞相关细胞因子的影响[J].中日友好医院学报, 2014,28(4):212-215.

2 结果

2.1iNOS与HIF-1α蛋白表达

根据《重庆市河道管理范围内建设项目管理办法（修订）》的要求，市水行政主管部门负责4类项目的审查，其他涉河建设项目由各区县水行政主管部门审批。各区县水行政主管部门在进行涉河建设项目相关审查时，应当按照程序审批，不能越级越权审批。

治疗前两组患者的皮损组织中iNOS与HIF-1α蛋白表达量差异无统计学意义（P＞0.05），观察组患者接受消银解毒饮治疗后的皮损组织中iNOS与HIF-1α蛋白表达量明显低于对照组患者（P＜0.05），见图1。

船舶设备不同于陆上应用的相关车辆设备，其在设备安装中如设备安装质量不合格，其在实际应用中存在修复难度高，危险性高，且造成的经济损失高的现象。其中具体分析安装振动，造成的安装质量不合格也为常见的一类故障原因。因此从设备的安装效果方面分析，船舶设备在组件安装中应用减振措施，对于设备组件安装质量合格性的保障，发挥了重要的作用。规避了设备在安装中因振动等不良现象，造成的设备组件内部损坏，安装误差等不良现象。

针对南通鹏越纺织有限公司从2004年成立的背景，历来的发展轨迹和现状，发展中所存在的问题等方面，笔者分批次对南通鹏越纺织有限公司进行了客观全面的调研和总结。其营销现状主要表现如下：

2.2HSP60、HSP90、IL-2及IL-6蛋白表达

治疗前两组患者的皮损组织中HSP60、HSP90、IL-2及IL-6蛋白表达水平差异无统计学意义（P＞0.05），观察组患者接受消银解毒饮治疗后的皮损组织中的HSP60、HSP90、IL-2及IL-6蛋白表达水平明显低于对照组（P＜0.05），见表1。

表1 两组患者的皮损组织中HSP60、HSP90、IL-2及IL-6蛋白表达水平比较（±s）

组别HSP60HSP90IL-2IL-6治疗前治疗前治疗前治疗前治疗后观察组99.28±0.3263.18±7.05101.72±4.1159.11±3.8698.64±1.7772.53±5.09103.28±4.0955.17±5.37对照组10091.27±6.2310090.87±5.7310092.53±3.0510091.61±4.93 t值0.177.290.267.180.366.390.259.83 P值0.3720.0130.2970.0150.4650.0190.3360.011治疗后治疗后治疗后

2.3T细胞亚群水平

治疗前两组患者的血清T细胞亚群水平差异无统计学意义（P＞0.05），观察组患者接受消银解毒饮治疗后的CD3+、CD4+及CD4+/CD8+水平较对照组上升（P＜0.05），见表2。

“对！因为你走到下一条路，下个路口，只有下个山头，你才知道它下面的选择是怎么样，这里的风景跟前面不一样。有些机会是你以前想象不到的，但时间没有变，工作还是没有变。”紧凑的语速和敏捷的思维背后，我能感受到他的一丝疲惫。

银屑病是临床多见慢性复发性炎症性皮肤病，角质形成细胞过度增殖及血管生成是该病最主要的病理生理学特征。银屑病顽固性强、治疗难度大、极易复发，给患者的身心均带来巨大困扰。中医学中银屑病的发病机制主要为患者体内阴盛内热、复感邪气，导致气郁化火、热盛生风发于肌肤，治疗应以消毒散瘀、清血清热及消风止痒为主。消银解毒饮主要成分为金银花、重楼、牡丹皮、全蝎及赤芍等，在清热解毒、凉血化瘀方面效果较好，可以用于银屑病血热证患者的治疗[3]。

3 讨论

目前各国学者研究或论证的能够改变小行星轨道的技术手段包括动能撞击、质量驱动、拖船、太阳光压、引力牵引、激光烧蚀等[40-41]，这些技术手段通常需要几年甚至几十年的预警时间，仅适用于防御尺寸小、预警时间长的PHAs。各种可能的近地小行星防御技术，如图13所示。

3.做鲜文化节目。以文化为根，挖掘具有地方元素的文化特色，是节目样式的立足基础。依托地方丰富的文化资源，融入时代的元素，做出鲜活的文化节目，不仅可以扩大文化的认同度，还可以提升节目品味，给受众以视觉和精神的双重享受。如鄂州综艺频道开办的《鄂州文化长廊》栏目立足鄂州，全面展示鄂州历史文化，有利于拓展市民的视野，丰富知识，增强历史厚重感。

银屑病患者角质形成细胞过度增殖、表皮肥厚加上细胞数目增多，导致其对氧的需求进一步增加，形成与局部氧供受损的矛盾。一氧化氮（nitrogen monoxidum，NO）是生物体内的重要信使分子及效应分子，由一氧化氮合成酶（nitric oxide synthase，NOS）催化生成。其中诱导型NOS（iNOS）正常情况下在组织内表达量最少，当细胞受到免疫或者炎症感染时，iNOS表达量显著增多并促使NO生成[4]。已经有研究证实NO在银屑病的发生发展过程中发挥重要作用，故iNOS的水平可以间接且敏感的反映疾病严重程度。低氧诱导因子1α（HIF-1α）广泛参与低氧诱导性应答，在低氧条件下可以参与众多基因的表达，iNOS就是HIF-1α诱导的靶基因之一[5]。本次研究检测了病损标本中的iNOS及HIF-1α表达情况，结果显示：治疗前两组患者的皮损组织中iNOS与HIF-1α表达差异无统计学意义（P＞0.05），观察组患者接受消银解毒饮治疗后，皮损组织中iNOS与HIF-1α蛋白表达水平大幅低于对照组患者（P＜0.05），提示消银解毒饮可以抑制病损皮肤组织中的NO产生，遏制皮肤血管中血流量增加导致的氧供增加，阻断银屑病进一步进展的途径。

1.3皮损组织中细胞因子含量

1.4外周血T细胞亚群含量

综上所述，消银解毒饮应用于银屑病血热证患者中，可以有效抑制皮损组织中的相关细胞因子蛋白表达，优化T细胞亚群含量平衡，值得在日后临床实践中推广应用。

采用统计学软件SPSS 20.0对所得数据进行统计学分析，计量资料采用t检验，计数资料采用χ2检验，P＜0.05为差异具有统计学意义。

[2]夏梦,段行武,瞿幸,等.消银解毒饮对银屑病血热证外周血淋巴细胞中IL-4、IFN-γ[J].背景中医药大学学报,2010,33(12):837-841.

翌日，小虫陪姑妈把款交了，玉敏将那款钻戒小心翼翼地包好。花奴开玩笑说，玉敏这回真的做了个大单，提成厚厚的。玉敏说这次是特价，没有提成哦。一店美女叹息，说喝不上酒了。玉敏将钻戒盒放进一个漂亮的手提袋里，回家让小虫送给姑妈。小虫送去时，姑妈在搓麻将，一边抓牌一边对小虫说，你直接给你姑父送去吧，不然他要把我吃了。

[3]CZARNOWICKIT,MALAJIAND,SHEMERA,et al.Skin-homing and systemic T-cell subsets show higher activation in atopic dermatitis versuspsoriasis[J].J Allergy Clin Immunol,2015,136 (1):208-211.

[4]张凯辉,段行武.“消银解毒饮”对银屑病血热证外周血淋巴细胞调控作用研究[J].世界中医药,2015,10(6):863-866.

[5]CAMPANATIA,ORCIANIM,CONSALESV,et al.Characterization and profiling of immunomodulatory genes in resident mesenchymal stem cells reflect the Th1-Th17/Th2 imbalance of psoriasis[J]. Arch Dermatol Res,2014,306(10):915-920.

[6]李勇坚,张桂英,肖嵘,等.HIF-1α与iNOS在银屑病皮损中的表达及其与血管生成的关系[J].中南大学学报,2010,35(9):952-956.

[7]JACKS SM,TAYLORBR,ROGERS RP 3RD,et al.Rapid deterioration in a patient with primary aggressive cutaneous epidermotropic CD8+cytotoxic T-cell('Berti')lymphoma after administration of adalimumab[J].J Am Acad Dermatol,2014,71(3): e86-e87.

[8]VOLPE E,PATTARINIL,MARTINEZ-CINGOLANIC,etal. Thymic stromal lymphopoietin links keratinocytes and dendritic cell-derived IL-23 in patients with psoriasis[J].J Allergy Clin Immunol,2014,134(2):373-381.

Assessment of Cytokinesin skin lesions and T cell subsets content in peripheral blood after Xiaoyinjiedu Drink on patients with blood-heat syndrome of Psoriasis

Hui-lei WAN
(Department of Medical Services,Zhengzhou People's Hospital,Zhengzhou, Henan 450003,P.R.China)

【Objective】To assess Cytokinesin skin lesions and T cell subsets content in peripheral blood after Xiaoyinjiedu Drink on patients with blood-heat syndrome of Psoriasis.【Methods】78 cases of Patients with bloodheat Syndrome of Psoriasis In our hospital were chose as subjects and randomly divided into control group(received conventional medical treatment),observation group(combined with Xiaoyinjiedu Drink treatment),with 39 cases in each group.Specimens from skin lesions and peripheral blood samples to detect tissue factor inducible nitric oxide synthase(iNOS),hypoxia-inducible factor 1α(HIF-1α),heat shock protein-60(HSP60),heat shockprotein-90 (HSP90),interleukin-2(IL-2),interleukin-6(IL-6)protein expression,peripheral blood T cell subsets level.【Results】Observation group patients'iNOS and HIF-1α protein expression after treatment were significantly lower than control group patients(P＜0.05).Observation group patients'HSP60,HSP90,IL-2 and IL-6 protein expression levels were significantly lower than control group(P＜0.05).Observation group patients'CD3+,CD4+,CD4+/CD8+levels after treatment were higher than control group patients(P＜0.05).【Conclusion】Psoriasis patients with Xiaoyinjiedu Drink treatment,can effectively suppress the expression of cytokines in skin lesions,optimize T cell subsets content balance,promote disease recovery

Psoriasis;Xiaoyinjiedu Drink;Cytokines;T cell subsets

R758.63

B

1005-8982（2015）28-0062-04

2015-02-21