孙艳芳
(河北省定兴县农业局,河北定兴 072650)
猪繁殖与呼吸综合征研究进展
孙艳芳
(河北省定兴县农业局,河北定兴 072650)
猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种急性接触性传染病,以母猪繁殖障碍及仔猪呼吸困难为主要特征。猪繁殖与呼吸综合征可引起怀孕母猪流产、木乃伊胎、死胎、弱仔等繁殖性障碍,仔猪则主要以呼吸道症状为特征,且死亡率极高。PRRSV进入猪机体内可引起免疫抑制现象,使其免疫力下降,对外界病原菌的抵抗力减弱,进而引发猪传染病发生,对养猪业危害巨大。
1987年此病最先在美国被报到,1988年加拿大也发生了该病,并很快蔓延到德国、英国、法国、比利时、荷兰等国,呈暴发流行状态。亚洲地区日本最早1988年发现该病,并于1993年首次分离到病毒。1995年我国首次发现疑似病例,郭宝清等人从疑似病猪身上分离出了PRRSV,证实了此病在我国的存在。目前,PRRS在我国广泛分布,东北、华北、华东、华南等地区相继发现并分离到病毒,且很多地区血清学阳性率非常高,并呈上升态势,防控形势十分严峻。PRRS常常伴发链球菌、支原体、流感病毒、圆环病毒、猪瘟病毒等病原微生物的感染,多种疾病并发,临床症状复杂多变,进一步增加了防治的难度。本文对PRRS的病原学、免疫学、免疫学及诊断技术的研究进展进行介绍,为其研究和防控提供理论依据。
猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)属于尼多病毒目、动脉炎病毒科、动脉炎病毒属,是一种不分节段的单股正链 RNA 病毒,呈卵圆形,内部是二十面体的核衣壳,有囊膜,表面有纤突,无凝血性。PRRSV对有机溶剂敏感,氯仿和乙醚等化学物质可迅速将其灭活。其热稳定性差,温度越高其死亡速度越快。PRRSV的最适pH值为6.5~7.5,酸性或碱性环境中会迅速失活,耐受力弱。PRRSV主要分为欧洲型和美洲型两种,我国大部分分离的病毒属于美洲型。
PRRSV进入猪机体后,首先通过病毒表面的E蛋白、M蛋白和N蛋白,刺激产生体液免疫,产生的抗体通过血清学方法很容易检测。感染后7d,首先可检测到IgM特异性抗体;感染后14d,可检测到IgG特异性抗体。有研究表明,PRRSV的特异性循环抗体可保持一年时间。细胞免疫在机体抵抗PRRSV感染的过程中同样发挥着重要作用。反复感染PRRSV猪的淋巴细胞增生反应强度变大,细胞数量增多。PRRSV 存在抗体依赖性增强作用,因此疫苗产生的低水平抗体可能增强病毒在机体内的繁殖。所以猪场要定期检测抗体水平,及时加强免疫,避免出现此种现象。
对于疑似病猪,首先可以通过临床症状和病理解剖变化进行初步诊断。母猪感染后,初期出现厌食、发烧、呼吸困难、流鼻涕似感冒症状,后期则四肢瘫痪无力、流产等繁殖障碍。仔猪感染后,主要症状为嗜睡、咳嗽、呼吸困难,有些出现腹泻和结膜炎,最后继发感染而死亡。PRRSV可侵害猪的肺、肝、脾脏、胸腺、扁桃体和淋巴结等,主要集中在呼吸系统和淋巴组织。剖检可发现淋巴结肿大,肺部有弥漫性间质性肺炎,病死仔猪有时可见胸腔积液和皮下、肌肉及腹腔水肿。
近年来,分子生物学技术快速发展,并在疾病诊断中广泛应用,是现在病原学检测的重要手段。PRRSV是单股正链 RNA 病毒,需通过发反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测其特异性基因片段,快速诊断该病的发生。实验室常用的基因为ORF7,因为其编码的N蛋白质包括所有不同毒株都具有的共同表面抗原表位。疑似病猪的血清、鼻涕、精液及肺脏、脾脏、淋巴结等组织器官均可直接提取其核酸物质,然后用RT-PCR 扩增特异性基因片段,进行基因检测。娄高明等人设计了一对特异性引物,用于扩增PRRSV 核衣壳蛋白 ORF7的一段基因序列,结果显示此引物不仅能大量扩增出特异性的核酸片段,基因片段测序后还可将美洲型和欧洲型区分开来。
血清学诊断主要是检测PRRSV 抗体,常用的方法有酶联免疫吸附试验、间接免疫荧光试验、免疫过氧化物酶单层试验和血清中和试验等。此种诊断方法操作简单,敏感性和特异性均较高。目前,酶联免疫吸附试验在RRRS 的诊断中应用广泛。酶联免疫吸附试验操作条件要求低、方便、易行,操作过程简便,结果判断可以标准化,具有快速、经济、敏感等特点,且适合大批量样品同时开展。
疫苗免疫是预防动物传染病发生的最常用和有用的方法。用于预防 PRRS 的疫苗有传统疫苗(灭活疫苗、弱毒疫苗)和新型疫苗(DNA疫苗、基因工程重组疫苗和亚单位疫苗)。PRRS灭活疫苗具有安全性高、便于贮存运输、对母源抗体干扰较小等诸多优点,是人们预防控制PRRS的首选疫苗。但灭活疫苗也普遍存在着免疫效果不太好的缺点。现在,全世界已商品化的PRRS弱毒疫苗有数十种,其中我国已批准投放市场的CH-1R株PRRS弱毒苗不仅对经典毒株抵抗力强,且对高致病性野毒株的免疫保护效果也很好。近年来,随着分子生物学的快速发展,DNA疫苗等新型疫苗应运而生,但大多属于科研研发阶段,投入到实际生产的较少。
目前,采取全方位的综合措施防控PRRS的发生,是大部分养猪场的首选,其中切断其传播途径是防控PRRS发生的关键。首先要做好引种检测工作,及时淘汰掉病猪,构建无PRRSV猪群。其次要做好猪舍的消毒和清扫工作,保持良好的生产环境,并加强饲养管理,提高猪群自身免疫力。饲养管理水平较高的规模化种猪场可采用早期断奶和异地饲养技术,阻止 PRRSV 的水平传播,构建无PRRSV种猪群。
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孙艳芳(1978-),女,中级兽医师,主要从事动物检疫监督工作。