金水宝对糖尿病肾病血液透析患者氧化应激及微炎症状态的影响

易 晔 卢远航 冀倩倩

湖北省中山医院中西医结合肾病科，湖北武汉 430030

金水宝对糖尿病肾病血液透析患者氧化应激及微炎症状态的影响

易 晔 卢远航 冀倩倩

湖北省中山医院中西医结合肾病科，湖北武汉 430030

目的 观察金水宝对糖尿病肾病维持性血液透析患者氧化应激及微炎症状态的改善作用。 方法 选择2013年2～5月湖北省中山医院血液净化中心透析时间超过6个月的36例糖尿病肾病血液透析患者，随机分为对照组（18例）和治疗组（18例）。对照组给予常规碳酸氢盐血液透析治疗，每周3次，每次治疗4 h；治疗组为常规碳酸氢盐血液透析基础上加用金水宝胶囊口服，0.33 g/粒，每次5粒，每日3次。两组均治疗3个月。两组研究对象均于研究开始前及治疗3个月后检测血清超敏C反应蛋白（hs-CRP）、白介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、过氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）的变化。 结果 与治疗前比较，对照组患者治疗后IL-6[（19.70±1.11）ng/mL比（23.17±1.76）ng/mL]、TNF-α[（50.94±1.52）ng/L比（55.39±1.87）ng/L]、hs-CRP[（8.58±0.67）mg/L比（10.17±0.42）mg/L]、MDA[（5.51±0.33）nmol/L比6.59±0.25）nmol/L]水平均显著升高（P＜0.01），SOD[（55.19±2.82）nU/mL比（46.51±1.89）nU/mL]、GSH-Px[（197.05±8.88）U/L比（171.39±7.83）U/L]显著降低（P＜0.01）；治疗组治疗后与治疗前比较，IL-6[（19.36±1.71）ng/mL比（14.79±2.95）ng/mL]、TNF-α[（51.13±1.42）ng/L比（45.66±1.74）ng/L]、hs-CRP[（8.72±0.85）mg/L比（6.44±0.95）mg/L]、MDA[（5.68±0.58）nmol/L比（4.81±0.58）nmol/L]水平均显著降低 （P＜0.01），SOD[（54.00±2.42）nU/mL比 （63.90±3.53）nU/mL]、GSH-Px[（197.47±8.48）U/L比（237.77±9.44）U/L]均显著升高（P＜0.01）；两组治疗后IL-6、TNF-α、hs-CRP、MDA、SOD、GSH-Px组间差异有高度统计学意义（P＜0.01）。 结论 糖尿病肾病维持性血液透析患者体内普遍存在氧化应激及微炎症状态，金水宝胶囊可改善糖尿病肾病维持性血液透析患者体内的氧化应激及微炎症状态。

金水宝；糖尿病肾病；维持性血液透析；氧化应激；微炎症

随着我国经济水平的不断提高，2型糖尿病患者的发病率逐年增高，而终末期糖尿病肾病患者近年来也呈现明显增长趋势。随着血液透析技术的不断完善成熟，行维持性血液透析（maintenance hemodialysis，MHD）的糖尿病患者生活质量明显提高。但是在临床工作中发现其心血管疾病发生率及病死率明显高于其他类型血液透析人群[1]。研究证明与糖尿病肾病MHD患者普遍存在氧化应激与微炎症状态，导致多种透析相关并发症发病[2]。因此积极控制炎性反应和改善氧化应激，可能是降低糖尿病肾病血液透析患者心血管疾病发生率的有效途径。金水宝胶囊为人工虫草制剂，可以减轻肾脏损伤，保护肾功能[3]，在临床中用于治疗多种肾脏疾病。本研究采用随机对照方法，探讨金水宝对糖尿病肾病MHD患者氧化应激及微炎症状态的作用，找寻安全、高效的方案以提高患者的生存率。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2013年2～5月湖北省中山医院血液净化中心透析时间超过6个月的36例糖尿病肾病血液透析患者为研究对象，其中男23例，女13例；年龄48～65岁，平均（56.2±8.2）岁；透析时间6～15个月，平均（10.5± 2.6）个月；在入选前2周排除已知的任何炎症事件（感染、创伤、手术、心肌梗死、应激及活动性风湿疾病、自身免疫性疾病等急性事件及慢性消耗性疾病如肿瘤、结核等；无糖皮质激素或免疫抑制剂等使用史；所有患者透析均达干体重，尿素清除指数（Kt/V）为1.2～1.5者；排除透析期间应用维生素C、维生素E等抗氧化药物。将所有患者随机分为两组，各18例。对照组和治疗组在性别、年龄、营养、体重、平均透析时间、透析充分性、透析膜及透析用水等构成方面比较差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性，见表1。

表1 两组一般资料比较（±s）

表1 两组一般资料比较（±s）

注：“-”表示无数据

组别 例数 性别（例，女/男）年龄（岁）体重（kg）透析时间（个月）尿素清除指数血红蛋白（g/L）血清白蛋白（g/L） 透析膜 透析用水对照组治疗组χ2/t值P值18 18 10/8 11/7 0.986＞0.05 56.60±7.42 56.80±7.21 0.672＞0.05 58±9 60±7 1.217＞0.05 10.4±3.3 11.0±2.3 1.037＞0.05 1.41±0.83 1.39±0.73 0.671＞0.05 92±6 90±7 0.782＞0.05 37.2±6.05 36.1±4.72 0.932＞0.05聚砜膜聚砜膜--二级反渗水二级反渗水--

1.2 方法

所有病例行常规碳酸氢盐血液透析治疗，使用瑞典金宝公司AK96血液透析机，透析液流量500 mL/min，血流量200～300 mL/min，透析频率为每周3次，每次4 h；所有患者血液透析同时给予同种类药物降压、纠正贫血、补钙、控制血糖等常规支持对症治疗，病情稳定达1个月以上。治疗组在基础治疗上加用金水宝胶囊（江西济民可信金水宝制药有限公司；0.33 g/粒；国药准字Z10890003）口服，每次5粒，每日3次，服用3个月。两组均治疗3个月。

1.3 观察指标

36例研究对象均于研究开始和治疗3个月后采晨起空腹静脉血，检测血清超敏C反应蛋白（high sensitivity C-reactive protein，hs-CRP）、白介素6（interleukin-6，IL-6）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor，TNF-α）、过氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）、丙二醛（malondialdehyde，MDA），30 min内分离血清，-80℃冰冻保存备检。hs-CRP采用免疫透射比浊法，试剂由北京北方生物科技研究所提供。采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清IL-6、TNF-α、SOD、GSH-Px、MDA，试剂由上海恒远生物科技有限公司提供。

1.4 统计学方法

采用SPSS 19.0统计软件进行数据分析。计量资料数据以均数±标准差（±s）表示，组内比较采用配对t检验，组间比较采用成组t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

与治疗前比较，对照组患者治疗后血IL-6、TNF-α、 hs-CRP、MDA水平均显著升高 （P＜0.01），SOD、GSH-Px显著降低（P＜0.01）；治疗组治疗后与治疗前比较，IL-6、TNF-α、hs-CRP、MDA水平均显著降低（P＜0.01），SOD、GSH-Px显著升高（P＜0.01）；两组治疗前各指标比较差异比较无统计学意义 （P＞0.05）；两组治疗后各指标比较差异均有高度统计学意义（P＜0.01）。见表2、3。

3 讨论

免疫炎性反应在糖尿病肾病发展过程中有着重要的作用[4]，而糖尿病肾病维持性血液透析患者需要长期进行血透治疗，由于免疫功能紊乱、感染、透析膜的生物不相容及对炎症递质的清除不充分等，使他们更加容易处于微炎症状态[5]。微炎症状态是指患者没有全身或局部急性临床感染征象，但存在低水平持续的炎症状态，主要表现为急性时相反应蛋白的变化和细胞因子的活化。长期微炎症状态会导致多种并发症的产生，严重影响透析患者的生存质量。微炎性反应在慢性肾衰竭进展恶化中起着重要作用[6]，被认为是预示ESRD预后的可靠指标[5]。hs-CRP是一种正性急性时相蛋白，是慢性炎症状态下细胞因子产生的标志，也是系统性低水平炎性反应综合征的特异性标志物，可较好地反映目前的微炎症状态。hs-CRP水平连续超过正常（＞5～10 mg/L）即可诊断微炎症状态。研究发现hs-CRP水平在血液透析患者中均较正常人高[7]，与透析患者增加的心血管事件和病死率相关。IL-6、TNF-α是细胞因子网络中重要的促炎症细胞因子，除直接作用于组织细胞外，也可激活其他炎症介质发挥作用，致肾小球系膜细胞增殖、硬化及肾脏疾病恶化，且接受透析治疗后上述炎症因子升高更显著[7]。本研究以hs-CRP、IL-6、TNF-α为微炎症检测指标，检测结果显示透析前两组患者微炎症指标均升高，提示处于微炎症状态，透析3个月后对照组上述指标较透析前明显升高，差异有显著性意义 （P＜0.01），提示血液透析加剧了微炎症状态，与文献一致[7]。

表2 两组治疗前后氧化应激指标的比较（±s）

表2 两组治疗前后氧化应激指标的比较（±s）

注：MDA：丙二醛；SOD：过氧化物歧化酶；GSH-Px：谷胱甘肽过氧化物酶

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表3 两组治疗前后微炎症指标的比较（±s）

表3 两组治疗前后微炎症指标的比较（±s）

注：hs-CRP：超敏C反应蛋白；IL-6：白介素6；TNF-α：肿瘤坏死因子-α

氧化应激（oxidativcstrcss，OS）状态是指机体活性氧的生成增加和（或）机体清除活性氧的能力降低，导致活性氧的生成和清除失衡，过量的活性氧引起机体分子、细胞的损害。国内外大量研究结果显示，MHD患者体内氧化应激水平明显增高，血液透析治疗后升高更加显著[8]，近年来的研究表明体内氧化应激水平的增加导致血管内皮功能损伤和动脉硬化加重，是增加终末期肾病及尿毒症透析患者病死率的重要原因[9]，在慢性肾功能衰竭发展演变过程中具有非常重要的意义。氧化应激主要后果是脂质过氧化，脂质过氧化是自由基引起细胞损伤的主要途径，MDA是其主要终末产物。GSH-Px、SOD是体内重要的氧自由基清除剂，SOD、GSH-Px水平下降提示抗氧化能力的减低[10]。本研究以MDA、SOD、GSH-Px为氧化性应激状态检测指标，结果显示透析前两组患者MDA均升高，SOD、GSH-Px均降低，提示处于氧化应激状态，对照组透析3个月后MDA较透析前明显升高，SOD、GSH-Px明显降低，差异有显著性意义（P＜0.01），提示血液透析加剧了氧化应激状态，与文献一致[10]。

目前认为，原发及各种继发性肾脏疾病均存在机体免疫功能异常，自始至终都伴随着炎症因子的异常表达，而长期血液透析治疗则加剧了炎性反应和氧化应激[11]。炎症及氧化应激在MHD患者血管硬化的进程中各自扮着重要的角色，并且其相互之间能够起到协同作用，呈现螺旋上升式的恶性循环，是促进动脉粥样硬化、营养不良、心脑血管疾病等并发症的发生发展的关键环节[12]，导致患者的高病死率。目前对于如何改善糖尿病肾病MHD患者炎性反应和氧化应激状态还缺乏有效的治疗手段。

冬虫夏草是一种传统名贵的强壮滋补药材，具有滋阴壮阳之功效，其功能为补肾保肺、秘精益气，且对肝脾无明显毒副作用，在我国用于慢性肾脏病治疗已经有上千年历史[3]。金水宝胶囊是从冬虫夏草中分离的虫草菌一蝙蝠蛾拟青霉Cs-4菌株，并经纯化、人工发酵培养加工而成的虫草菌粉，含有多种氨基酸、核苷、微量元素、维生素等，具有与天然冬虫夏草同样的成分。研究显示冬虫夏草制剂能改善血液透析患者氧化应激及炎症状态[13-14]，且无明显毒副作用。但关于冬虫夏草制剂对于是否能够改善糖尿病肾病血液透析患者的氧化应激及微炎症状态目前临床研究不多。本研究结果表明，口服金水宝胶囊3个月后血浆IL-6、TNF-α、hs-CRP、MDA水平均显著降低 （P＜0.01），SOD、GSH-Px显著升高（P＜0.01），说明冬虫夏草制剂可以改善糖尿病肾病MHD患者的氧化应激及微炎症状态。其改善氧化应激的机制可能为冬虫夏草制剂具有稳定溶酶体膜，减少脂质过氧化损伤等作用，通过抑制低密度脂蛋白胆固醇的脂质过氧化反应发挥强大的抗氧化及抗动脉粥样硬化作用[13]；改善微炎症状态的机制可能为虫草制剂通过改善氧化应激状态，减少了促炎因子IL-6、IL-1、TNF-α等的释放，降低CRP的合成；同时虫草制剂可通过上调Th1相关因子，下调Th2相关因子来减少巨噬细胞激活而改善微炎症状态[15]。

本研究结果提示在常规治疗的基础上联合金水宝胶囊治疗可以改善糖尿病肾病MHD患者氧化应激及微炎症状态，从而为提高糖尿病肾病MHD患者这一特殊患者群体的治疗效果和生存质量的治疗用药提供一定的临床依据。但是本研究例数偏少，需进行较大规模随机对照试验观察；同时，其具体机制也有待进一步探讨，并且需要随访观察患者心血管疾病发病率及病死率等一些长期目标。

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Effects of Jinshuibao on oxidative stress and micro-inflammation state in patients with diabetic nephropathy maintenance hemodialysis

YI Ye LU Yuanhang JI Qianqian
Department of Nephrology of Integrated Chinese and Western Medicine,Zhongshan Hospital,Hubei Province,Wuhan 430030,China

ObjectiveTo investigate the effects of Jinshuibao on oxidative stress and micro-inflammation state in patients with diabetic nephropathy maintenance hemodialysis.Methods Thirty six diabetic nephropathy patients who had

CHD for over half year in Blood Purification Center of Zhongshan Hospital in Hubei Province were assigned into the control group(18 cases)and the treated group(18 cases).Control group were given conventional hemodialysis for 4 hours,3 times a week;treatment group were given conventional hemodialysis combined with Jinshuibao Capsules, orally,0.33 g/grain,once 5 grains,3 times a day.Both groups were treated for 3 months.Blood was collected before and after treatment for detection of hs-CRP,IL-6,TNF-α,MDA,SOD,GSH-Px levels.Results Compared with the indexes before treatment,in control group,IL-6[(19.70±1.11)ng/mL vs(23.17±1.76)ng/mL],TNF-α[(50.94±1.52)ng/L vs (55.39±1.87)ng/L],hs-CRP[(8.58±0.67)mg/L vs(10.17±0.42)mg/L],MDA[(5.51±0.33)nmol/L vs(6.59±0.25)nmol/L] were significantly increased(P＜0.01)and SOD[(55.19±2.82)nU/mL vs(46.51±1.89)nU/mL],GSH-Px[(197.05±8.88)U/L vs(171.39±7.83)U/L]were significantly declined after treatment(P＜0.01);in treatment group,IL-6[(19.36±1.71)ng/mL vs(14.79±2.95)ng/mL],TNF-α[(51.13±1.42)ng/L vs(45.66±1.74)ng/L],hs-CRP[(8.72±0.85)mg/L vs(6.44±0.95) mg/L],MDA[(5.68±0.58)nmol/L vs(4.81±0.58)nmol/L]were significantly declined(P＜0.01),SOD[(54.00±2.42)nU/mL vs(63.90±3.53)nU/mL],GSH-Px[(197.47±8.48)U/L vs (237.77±9.44)U/L]were significantly increased after treatment(P＜0.01).There were statistically significantdifferences between the control group and the treatment group of IL-6,TNF-α,hs-CRP,MDA,SOD,GSH-Px after treatment (all P＜0.01).Conclusion Micro-inflammation state and oxidative stress exists popularly in diabetic nephropathy maintenance hemodialysis patients.Jinshuibao can aggravate oxidative stress and micro-inflammation state in diabetic nephropathy maintenance hemodialysis patients.

Jinshuibao;Diabetic nephropathy;Hemodialysis;Oxidative stress;Micro-inflammation

R587；R692.3

A

1673-7210（2015）03（a）-0093-04

易晔（1978.8-），男，汉族，湖北武汉人，硕士；研究方向：肾病及血液净化。

2014-10-28本文编辑：张瑜杰）