癫痫患者脑组织中SCG10的表达与耐药性的相关性分析

田 光

河南周口市川汇区中医院西医普内科 周口 466000

癫痫是临床常见的短暂性大脑功能障碍慢性疾病，现将我院收治的40例耐药性癫痫患者作为对象进行研究，具体报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取我院2011-08—2013-06收治的40例耐药性癫痫患者为观察组，男27例，女13例；年龄7～60岁，平均（32.8±6.7）岁；选取同期40例神经外科减压或清创治疗患者为对照组，男26例，女14例；年龄8～58岁，平均（33.2±5.4）岁；2组性别、年龄等比较差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 标本制备和随机化处理：2组取出脑组织后，以4%多聚甲醛48h固定，以石蜡常规包埋，保存备用。将石蜡块取出，使用石蜡切片机连续性冠状切片，控制切片厚度为5 μm，每份标本制备10张切片，随机抽取2张，实施免疫组化和荧光染色检测。

1.2.2 免疫组化检测：组织切片，使用电吹风烘烤10min，乙醇脱蜡，自来水浸泡5min，PBS缓冲液反复冲洗3次。蒸馏水配备3%双氧水，室温放置10min；以0.01枸橼酸钠缓冲液热修复抗原30min，温度95℃。加入抗原修复液Ⅰ，室温放置10min，随后PBS缓冲液反复冲洗3次，每次冲洗3 min。加入正常兔血清，室温放置30min，甩掉多余液体。加入适量稀释后益康山羊抗人SCG10，使用PBS代替一抗室温过夜作为阴性对照。设置冰箱温度4℃，于第2天37℃水浴箱中孵育30min，PBS反复冲洗3次，5min／次。添加生物素化二抗，上述相同步骤孵育冲洗，加入SABC，相同步骤孵育冲洗，DAB显色，苏木素复染，二甲苯脱水、透明，中性树胶封片。MAPK检测步骤相同于SCG10。

1.2.3 免疫荧光检测：切片脱蜡，抗原修复，加入1%牛血清蛋白及0.4%ritonX-100，室温放置60min，添加兔血清封闭液，封闭5h。添加SCGl0山羊抗人多克隆一抗和MAPK小鼠抗人多克隆一抗，以PBS替代作为阴性对照，4℃放置一夜。于第2天37℃水浴箱中孵育30min，PBS反复冲洗3次，5min／次。体添加RITC-兔抗羊二抗及FITC一兔抗小鼠二抗，室温下3h孵育，PBS反复冲洗，以油-PBS封片。

1.3 统计学分析 数据资料采用SPSS 20.0软件处理，计数资料以百分比表示，卡方检验，计量资料以（±s）表示，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 2组SCG10及MAPK表达情况比较 观察组SCG10表达（0.484±0.025）明显高于对照组（0.314±0.020），观察组MAPK表达（0.447±0.148）显著高于对照组（0.315±0.130），差异有统计学意义（P＜0.05）。

2.2 癫痫患者SCG10及MAPK表达情况比较 观察组经荧光双标检测，患者脑组织SCG10及MAPK表达处于同一细胞。

3 讨论

癫痫为神经系统常见疾病，属于短暂脑功能失调综合征，具有反复发作性特点，其特征主要表现为脑神经元异常放电致癫痫反复发作。研究［2］认为，癫痫病理变化表现为细胞骨架变化，而事实为神经可塑性结构改变。癫痫发病机制复杂，发病率高，严重影响患者身心健康，目前临床以药物治疗为主，但发病机制尚未明确，尚无特效药物。

SCG10是神经特异性蛋白，胚胎期神经元发生期间，SCG10在生长锥部位表达较高，但胎儿娩出后，SCG10表达大幅度降低，而在成熟大脑神经元突触重塑部位，SCG10依然存在表达。SCG10会促进神经延伸，重塑突触，影响了神经系统可塑性。同时在动物癫痫模型中，SCG10表达明显增高［3］，可见SCG10与癫痫形成有很大关系。MAPK为丝裂原活化蛋白激酶，于中枢神经系统表达广泛，受到各种细胞外刺激信号时，会对突触传递、神经元重塑等产生影响。SCG10是MAPK的下游底物，研究［4］发现，MAPK和神经元重塑有关，与癫痫发病机制有密切关系。在本组研究中，2组经免疫组化检测后，观察组患者SCG10和MAPK表达均显著高于对照组（P＜0.05）。且癫痫患者经荧光双标检测，患者脑组织SCG10及MAPK表达处于同一细胞。由此可见，SCGl0表达及MVPK表达与癫痫患者发病密切相关，且处于同一细胞。说明癫痫患者脑组织中SCG10的表达水平明显较高，通过对其观察能够明确患者病情，而SCG10及MAPK之间相互作用与疗效有一定的相关性。

［1］姚兰，张美林，陈阳美.难治性癫痫患者脑组织中SCGl0的表达及其意义［J］.世界科技研究与发展，2010，32（2）：239-242.

［2］韩璞.ATP-结合相关基因mRNA在耐药性癫痫患者脑组织中的表达［J］.中华医学杂志，2011，33（2）：198-199.

［3］杨柳.ROCK1，TRAF3mRNA在耐药性癫痫患者海马组织中的表达及意义［J］.重庆医科大学学报，2011，36（6）：176-177.

［4］葛晓霞.癫痫患者脑组织中SCG10的表达及其与耐药的相关性分析［J］.中国实用医药，2014，9（1）：183-184.