■谢少林 陈平原 吕子君 王 超,3 向文洲 邹记兴
(1.华南农业大学动物科学学院,广东广州 510642;2.三亚海洋生物科技有限公司,海南三亚 572029;3.清远市兴渔水产科技有限公司,广东清远 511510;4.中国科学院南海海洋研究所,广东广州 510301)
螺旋藻是蓝藻门(Cyanophta)、颤藻目(Oscilata⁃rides)、颤藻科(Oscillatoridae)的一个属,其分布广泛,存在于世界各个海域及陆地淡水、咸水中,是营自养型的原核水生植物,具有很高的营养、保健和医药价值[1]。螺旋藻除含有大量的蛋白质外,其维生素和不饱和脂肪酸的含量也很高,还含有较多的生物活性成分以及全面易吸收的矿物质;螺旋藻因其全面且
丰富的营养,被联合国粮农组织誉为“21世纪最佳的理想食品”,也被世界卫生组织评为“人类21世纪的最佳保健品”[2-3]。随着对螺旋藻研究的逐渐深入,以及工厂规模化生产的实现,当前螺旋藻的生产不仅能够满足人类作为医药、保健食品的需要,而且逐渐扩展到作为添加剂在动物饲料中的应用[4]。本试验以添加1%螺旋藻的罗非鱼饲料饲养彭泽鲫,通过与对照组对比,对其生长和肌肉营养品质变化进行全面细致的分析,进而对螺旋藻的添加使用效果进行客观综合的评价,对螺旋藻在生产实践中的应用具有一定的指导意义。
1.1.1 试验饲料
对照组罗非鱼饲料由清远市金正饲料有限公司生产,试验组饲料是在原罗非鱼饲料配方中添加1%的螺旋藻,然后制成颗粒饲料;螺旋藻由三亚海王集团提供。具体试验饲料营养水平见表1。
表1 试验组和对照组所用日粮营养水平对比(%)
1.1.2 试验用鱼
由国家大宗淡水鱼类产业技术体系广州综合试验站清远石板基地提供的1龄左右彭泽鲫鱼种。
1.2.1 试验方法
试验在国家大宗淡水鱼类产业技术体系广州综合试验站清远石板基地8号塘进行。挑选个体大小均匀、体质健壮的彭泽鲫鱼种180尾,随机放入6个大小为2 m×2 m×1.5 m的网箱中,每个网箱放入彭泽鲫30尾,称取记录每个网箱鱼的初始重量。调节网箱深度使网箱水位控制在1 m左右,将6个网箱分成2组(对照组和试验组),每组3个重复。本试验所用饲料为罗非鱼沉性饲料,故在网箱中用密网设置食台,对照组投喂未添加螺旋藻的罗非鱼料,试验组投喂添加1%螺旋藻的罗非鱼饲料。每天上午10:00和16:00各投喂一次,投喂量为鱼体质量的3%~5%,根据天气和鱼的吃食情况适当调整。准确称量每天投喂的饲料质量,定时清洗食台,做好网箱的日常检查维护。试验时间为2013年8月10日到2013年11月10日,驯食时间为一周。
1.2.2 肌肉营养品质分析
1.2.2.1 样品制备
试验结束称取每个网箱鱼总重量,从中随机选取6条,取鱼体头部至尾柄两侧背部肌肉,取其中一部分于(105±2)℃烘干,粉碎后密封冷冻保存,用于常规营养成分的测定;另一部分进行冷冻干燥,粉碎后用于脂肪酸和氨基酸的测定。
1.2.2.2 常规营养成分的测定
水分采用烘箱(105±2)℃恒温干燥失重法测定(GB/T6435—2006)[5];粗灰分采用马弗炉(550±20)℃高温灼烧法测定(GB/T 6438—2007)[6];粗脂肪采用脂肪测定仪,按照索氏提取的方法测定(GB/T 6433—2006)[7];粗蛋白采用FOSS全自动凯氏定氮仪进行测定(GB/T 6432—94)[8]。
1.2.2.3 蛋白质氨基酸分析
取上述冷冻干燥并粉碎的鱼肌肉样品30.0 mg(精确到0.1 mg),通过酸水解处理后,采用日立L-8800氨基酸分析仪进行分析。
1.2.2.4 营养价值评价
分别计算出对照组和试验组肌肉干样氨基酸评分(AAS)、化学评分(CS)和必需氨基酸指数(EAAI)[9-10]:
AAS=所测样品蛋白质氨基酸含量(%)/(FAO/WHO)评分标准模式中相同氨基酸含量(%);
CS=所测样品蛋白质氨基酸含量(%)/鸡蛋蛋白质中相同氨基酸含量(%);
EAAI=[(a/A)×100×(b/B)×100×……×(g/G)×100](1/N)。
式中:a、b…g——表示待测样品中蛋白质氨基酸含量;
A、B…G——与待测样品对应全鸡蛋蛋白质氨基酸含量;
N——氨基酸的种类数。
1.2.2.5 脂肪酸分析
按照JY/T021—1996分析型气相色谱方法通则和GB/T6041—2002质谱分析方法通则,使用TRACE GC-2000 GC-MSTM气相色谱-质谱联用仪,进行鱼肌肉中脂肪酸组成分析。称取冷冻干燥粉碎试样60 mg(精确至0.1 mg),首先进行甲酯化处理,然后取上清液0.5 μl上机分析,通过脂肪酸甲酯峰面积归一化法计算脂肪酸的组成[11]。
1.2.3 数据统计与处理
采用SPSS统计软件进行T-test检验对试验组和对照组数据进行差异显著性比较。试验数据采用“平均数±标准差”表示(置信区间为0.05)。
表2 螺旋藻添加剂对彭泽鲫生长性能的影响
由表2可以看出,试验组彭泽鲫增重率要大于对照组,饵料系数要较对照组低并且差异都显著(P<0.05)。
表3 螺旋藻添加剂对彭泽鲫肌肉营养成分含量的影响(%)
由表3可以看出,试验组的粗蛋白含量[(18.21±0.98)%]和粗脂肪含量[(2.38±0.01)%]均比对照组高,差异均达到显著水平(P<0.05)。
2.3.1 氨基酸组成分析(见表4)
表4 彭泽鲫试验组和对照组肌肉氨基酸组成比较(%,干样)
由表4可以看出,试验组氨基酸总量71.61%大于对照组;氨基酸组分中含量最高的都是谷氨酸,分别为12.10%和11.64%,其次是天门冬氨酸、赖氨酸、亮氨酸、丙氨酸,含量最低的都是胱氨酸。试验组中天门冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸、亮氨酸和精氨酸的含量比对照组高且有显著差异(P<0.05),其中天门冬氨酸和谷氨酸为鲜味氨基酸;由表4可以发现,试验组和对照组虽然在各个氨基酸含量上存在差异,但各个组分所占比例大小顺序保持一致;试验组鲜味氨基酸和必需氨基酸总量大于对照组,其中必需氨基酸和鲜味氨基酸含量差异达到显著水平;必需氨基酸占总氨基酸的比例差异不明显。
2.3.2 肌肉营养品质的评价
依据氨基酸评分(AAS)、化学评分(CS)以及必需氨基酸指数(EAAI)的公式,计算对照组和试验组必需氨基酸的AAS、CS、EAAI,结果见表5。根据氨基酸评分可以看出,对照组的第一限制性氨基酸是异亮氨酸和缬氨酸,试验组的第一限制性氨基酸为缬氨酸;试验组的氨基酸评分、化学评分和必需氨基酸指数均要大于对照组。
表5 彭泽鲫对照组和试验组的AAS、CS、EAAI比较
表6 试验组与对照组彭泽鲫肌肉脂肪酸比较(%)
由表6可以看出,对照组和试验组肌肉组织中均含有16种脂肪酸,其中饱和脂肪酸4种,单不饱和脂肪酸3种,多不饱和脂肪酸9种。对照组和试验组除棕榈酸和亚麻酸差异显著外,其它各脂肪酸含量差异不显著。对照组和试验组饱和脂肪酸与不饱和脂肪酸的比值无明显差异。
螺旋藻营养成分的主要特点是蛋白质含量高,而脂肪和纤维素含量较低,其氨基酸种类齐全,特别是必需氨基酸含量较多,其中赖氨酸、亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸的含量尤为突出[3];螺旋藻营养丰富,含有丰富的胡萝卜素和维生素E,并含有多种微量元素,特别是含有微量的硒[2];而且易被动物消化吸收,具有促进动物生长增强动物体质的功效。添加螺旋藻的试验组,其生长速度要明显高于对照组,对其肌肉进行营养成分分析可以发现,其粗蛋白含量要明显高于对照组,部分氨基酸含量也明显高于对照组,鲜味氨基酸就包括其中,而鲜味氨基酸是决定鱼肉质风味的主要因素,可见添加螺旋藻对提高彭泽鲫肉质品质有一定的作用。另外,从氨基酸评分也可以看出,添加螺旋藻的试验组,其各项评分均大于对照组[9-12]。鱼类的脂肪酸多为不饱和脂肪酸,不饱和脂肪酸具有调节血脂、清理血栓、免疫调节等功能,其含量高低也是评价食物好坏的一个重要指标[13-15];螺旋藻含有丰富的亚麻酸、亚油酸和棕榈酸[3],添加螺旋藻的试验组同对照组相比,显著提高了棕榈酸和亚麻酸的含量。这与刘立鹤等在凡纳滨对虾上的研究结果一致。因此,综合常规营养成分、氨基酸组成和脂肪酸分析,在饲料中添加螺旋藻有提高彭泽鲫肉质营养价值的作用。