顶空气相色谱法测定盐酸右美托咪定中3种有机溶剂残留量

李 继，林 芳，王 莉，王荪璇，王牛民（.陕西省食品药品检验所，西安 70065；2.西安交通大学医学院第一附属医院药学部，西安 7006）

顶空气相色谱法测定盐酸右美托咪定中3种有机溶剂残留量

李 继1，林 芳1，王 莉1，王荪璇1，王牛民2＊（1.陕西省食品药品检验所，西安 710065；2.西安交通大学医学院第一附属医院药学部，西安 710061）

目的 建立顶空气相色谱法测定盐酸右美托咪定原料药中3种有机溶剂残留量的方法。方法 用水溶解样品，采用顶空进样，在DB－WAX（25.0m×320μm×0.5μm）毛细管柱上程序升温，应用FID检测器，载气为氮气。结果 甲醇、丙酮、二氯甲烷均能得到有效分离，各组分在考察的质量浓度范围内线性关系良好，r＝0.999 0～0.999 9，平均回收率为96.2%～102.2%。结论 该方法可用于检测盐酸右美托咪定原料药中甲醇、丙酮及二氯甲烷的残留量。

盐酸右美托咪定；溶剂残留；顶空毛细管气相色谱

盐酸右美托咪定是一种选择性α2肾上腺素受体拮抗剂，通过作用于2种肾上腺素能受体而具有抗交感、阵痛和镇静作用，主要适用于手术和术后的镇静，尤其适用于重症患者。自2000年3月在美国首次上市（商品名Precedex）后，由于其疗效佳且不良反应小，特别是与其他α2肾上腺素受体拮抗剂相比，本品对呼吸的抑制作用小，故临床上对此药物的需求量很大［13］。盐酸右美托咪定是通过拆分其消旋体美托咪定而得，在美托咪定的合成及盐酸右美托咪定的拆分过程中，均需使用多种有机溶剂［4］，但尚未见到盐酸右美托咪定原料中残留溶剂检测的相关报道。本文根据ICH对有机溶剂残留量测定的指导原则［5］，针对生产工艺中涉及的丙酮、甲醇、二氯甲烷3种有机溶剂进行检测，根据《中国药典》2010年版二部附录残留溶剂测定法［6］及相关研究［7］，采用顶空气相色谱法，以高纯水溶解样品，同时测定上述3种有机溶剂，结果重复性好，稳定，分析速度快，为进一步对盐酸右美托咪定的生产工艺考察及质量控制提供了参考。

1 仪器与试药

1.1 仪器 6890N气相色谱仪及7694E顶空进样仪（美国安捷伦）；SPB－3全自动空气源（北京中惠普析技术研究所）；BS－223S电子分析天平（赛多利斯）；Millipore超纯水机。

1.2 试药 盐酸右美托咪定（西安利君制药有限公司，批号120401，120402，120403）；甲醇、丙酮、二氯甲烷（分析纯，国药集团化学试剂有限公司）；N，N－二甲基甲酰胺（色谱纯，德国Merck公司）；水（自制高纯水）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 使用DB－WAX（25.0m×320μm× 0.5μm）石英毛细管柱；程序升温：在40℃保持8min后，以8℃·min－1的速率升温至120℃，保持10min，再以20℃·min－1的速率升温至180℃，保持5min；进样口温度200℃，分流比为10∶1；检测器温度220℃；载气为氮气，流速1.5mL·min－1；顶空进样，平衡温度85℃，平衡时间为30min，顶空定量环体积为1mL，定量环温度95℃，传输线温度105℃。

2.2 溶液的配制

2.2.1 混合对照品溶液 称取甲醇、丙酮、二氯甲烷各适量，精密称定，以N，N－二甲基甲酰胺为溶剂制成每1mL中含甲醇30mg、丙酮5mg、二氯甲烷6mg的溶液，再精密移取各对照溶液5mL，置于同一50mL量瓶中，加水稀释至刻度，制成每1mL中含甲醇3mg、丙酮0.5mg、二氯甲烷0.6mg的混合对照品储备液。精密量取对照品储备液5mL，置于50mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为混合对照品溶液。

2.2.2 供试品溶液 取盐酸右美托咪定约1.0g，精密称定，置于10mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。

2.3 专属性考察 分别精密量取混合对照品溶液、空白溶剂及供试品溶液各5mL，置于20mL顶空瓶中，密封，按2.1项下色谱条件进行分析，记录色谱图，见图1。

由图1可知，该方法的专属性良好，各待测组分峰之间无相互干扰且峰形良好，理论板数均不低于5 000。

图1 GC图A.对照溶液；B.溶剂空白；C.供试溶液；a.丙酮；b.甲醇；c.二氯甲烷；d.N，N－二甲基甲酰胺Fig.1 GC chromatogramsA.standard reference B.solution blank；C.sample solution；a.acetone；b.methanol；c.dichloromethane；d.N，N－dimethylformamide

2.4 线性关系考察 精密量取对照品储备液适量，逐级稀释得标准曲线系列溶液。精密量取标准曲线系列溶液各5mL，分别置于20mL顶空瓶中，密封，按2.1项下色谱条件进行分析，记录各峰面积。以峰面积（A）为纵坐标、各对照品的质量浓度（ρ）为横坐标，进行线性回归，分别得到甲醇、丙酮及二氯甲烷的标准曲线线性回归方程及线性范围，结果见表1。

表1 3种残留溶剂的线性方程和线性范围Tab.1 Linear regression equation and their concentration range of 3residual solvents （n＝6）

2.5 精密度实验 精密量取混合对照品溶液5mL共6份，分别置于20mL顶空瓶中，密封，各进一针，连续进样，按2.1项下色谱条件进行分析，计录各待测组分的峰面积，甲醇、丙酮、二氯甲烷峰面积的RSD分别为1.5%，2.0%和2.4%。

2.6 重复性实验 取盐酸右美托咪定（批号120401），按2.2项下方法操作，分别制备供试品溶液6份，按2.1项下色谱条件进行分析，检测供试品中含丙酮的质量分数为0.0040%（RSD＝2.7%），甲醇及二氯甲烷均未检出。

2.7 稳定性实验 取混合对照品溶液，于24h内每隔4h测定1次峰面积，甲醇、丙酮、二氯甲烷峰面积的RSD值分别为2.4%，1.8%和2.2%。

2.8 定量限与检测限 用逐步稀释法进行测定检测限和定量限，甲醇、丙酮、二氯甲烷的检测限分别为1.0，0.2和0.2mg·L－1，定量限分别为3.0，0.6和0.6mg·L－1。

2.9 加样回收实验 称取各溶剂已知含量的供试品（批号：120401）0.5g共9份，精密称定，随机分成3组，以各溶剂检查限度的80%，100%和120%，分别精密加入混合对照品储备液0.8，1.0和1.2mL，按2.2项下方法制备供试品溶液，再分别精密量取5mL，置于20mL顶空瓶中，密封，按2.1项下色谱条件进行分析，结果见表2。

表2 加样回收实验结果Tab.2 Results of recovery test

2.10 样品含量测定 取盐酸右美托咪定3批样品（批号120401，120402，120403），按2.2项下方法制备供试品溶液，再精密量取供试品溶液5mL，置于20mL顶空瓶中，密封，按2.1项下色谱条件进行分析，结果3批样品中丙酮含量分别为0.004 0%，0.003 4%和0.003 9%，甲醇与二氯甲烷均未检出。

3 讨论

盐酸右美托咪定易溶于水，可制成真溶液，适用于顶空气相色谱法，故拟选择以水为溶剂。但在制备对照品溶液时，由于二氯甲烷在水中的溶解度差，故拟先使用N，N－二甲基甲酰胺溶解制成对照品储备液，再用水稀释成对照品溶液。实验结果表明，采用该方法溶解对照品，各组分峰之间分离度良好，无相互干扰，且残留溶剂回收率良好，无明显基质影响。

实验中考察了DB－1与DB－WAX 2种不同极性的毛细管柱，在非极性的DB－1毛细管柱中丙酮与甲醇分离效果差，且二氯甲烷峰形拖尾较严重，但在相同的色谱条件下，使用DB－WAX色谱柱时，各组分峰形良好，分离度满足检测需要，故最终选择DBWAX毛细管色谱柱。

根据《中国药典》2010年版二部规定，丙酮为第三类溶剂，其允许限度的质量分数为0.5%。本次研究中，应按药典规定考察其质量浓度在500mg·L－1时的线性关系，由于样品中的丙酮含量低，导致供试品溶液中其质量浓度远低于规定质量浓度，故在实验中选择考察丙酮质量浓度范围为5～100mg·L－1时的线性关系，实验结果表明，在该范围内，其峰面积与质量浓度线性关系良好，更适用于丙酮残留量的检测。

本实验摸索并建立了顶空气相色谱法测定盐酸右美脱咪定中甲醇、丙酮及二氯甲烷的方法，采用顶空进样法，避免了直接进样时原料样品对检测的干扰和对色谱柱带来的污染，同时程序升温能有效地分离待测组分，使各组分间分离度良好，实验证明，该方法灵敏度高，稳定性和重复性好，可作为盐酸右美托咪定中有机溶剂残留测定的参考方法。

［1］ 梁飞，肖晓山.盐酸右美托咪定的临床药理及应用［J］.现代医院，2010，10（5）：90－93.

［2］ 赵慧人，谭志荣，周淦，等.HPLC－MS／MS法研究盐酸右美托咪定注射液的人体药物代谢动力学［J］.药物分析杂志，2008，28（5）：698－701.

［3］ 盛照志，李清涛，孙峰京.盐酸右美托咪定注射液的稳定性研究［J］.齐鲁药事，2010，29（2）：106－107.

［4］ 王玉平，冯颂延，林丽薇.盐酸右美托咪定的合成［J］.广东药学院学报，2012，28（2）：135－137.

［5］ 周海均.药品注册的国际技术要求［M］.北京：人民卫生出版社，2006：126.

［6］ 国家药典委员会.中国药典2010年版［S］.二部.北京：中国医药科技出版社，2010：附录ⅧP.

［7］ 尤亚宁，雷琨，李霞，等.顶空气相色谱法测定丹参素冰片酯脂肪乳中溶剂残留量［J］.西北药学杂志，2013，28（4）：357－359.

Determination of three residual solvents in dexmedetomidine hydrochloride by headspace gas chromatography

LI Ji1，LIN Fang1，WANG Li1，WANG Sunxuan1，WANG Niumin2＊（1.Shaanxi Provincial Institute for Food and Drug Control，Xi′an 710065，China；2.Department of Pharmacy，the First Affiliated Hospital of Medical College，Xi′an Jiaotong University，Xi′an 710061，China）

Objective To establish a headspace gas chromatography method for determining three kinds of residual solvents in dexmedetomidine hydrochloride.Methods The samples were dissolved by water，then the content of residual solvents was measured by headspace gas chromatography by using DB－Wax（25.0m×320μm×0.5μm）capillary column with sequential increasing of temperature.Nitrogen was used as the carrier gas with FID as a detector.Results The linearity（r＝0.999 0－0.999 9）were satisfactory.Three residual solvents were completely separated，and the average recovery rates were between 96.2%－102.2%.Conclusion The method is simple，accurate and sensitive for the detection of three residual solvents in dexmedetomidine hydrochloride，and can be used for the quality control.

dexmedetomidine hydrochloride；residual organic solvent；headspace capillaryGC

10.3969／j.issn.1004－2407.2015.02.013

R917

A

1004－2407（2015）02－0147－03

2014－06－17）

李继，男，主管药师

＊通信作者：王牛民，男，主管药师