基于蒽酮-硫酸法则测定多糖含量的天麻饮片最佳炮制方法探讨

梁秀英

（辽宁省铁岭市中医医院中草药局饮片室，铁岭112000）

基于蒽酮-硫酸法则测定多糖含量的天麻饮片最佳炮制方法探讨

梁秀英

（辽宁省铁岭市中医医院中草药局饮片室，铁岭112000）

目的优选天麻饮片炮制方法o方法通过鲜切法加工工艺及传统加工炮制方法进行天麻饮品的加工，并采用蒽酮-硫酸法进行饮片中多糖含量的测定o结果不同炮制方法使方法天麻饮片中多糖含量高低不一致，其中真空冷冻干燥饮片多糖含量最高，余下自高到底排序为:鲜切饮片、蒸制饮片、半润透饮片、润透饮片o结论鲜切法加工工艺天麻饮片中多糖含量优于传统加工炮制方法o通过不同炮制方法，测定天麻饮片中多糖含量的研究，为天麻饮片炮制工艺改进提供理论依据o

天麻饮片；多糖含量；蒽酮-硫酸法；中药炮制

天麻药是一种名贵中药，其药用历史悠久o具有平肝、熄风的功效o临床多用于治疗头晕目眩、抽搐、惊厥、四肢麻木等症候o天麻中含有多种有效成分，文献报道：天麻含天麻素、香荚兰醇、香荚兰醛、琥珀酸、β-谷甾醇、维生素A样物质、苷类、生物碱、黏液质和天麻多糖等［1］o其中关于天麻多糖的研究报道显示：多糖具有增强细胞免疫功能、改善心脑细胞营养、增加血流量、提高抗缺氧能力的作用，对小儿惊厥、癫痫、抽搐等临床症状具有镇静、镇痛等功效，而且药效时间达2～7天［2］o因此，研究不同炮制方法对天麻饮片中多糖含量的影响，为提高天麻饮片中的多糖含量提供临床依据，提高天麻饮片的临床疗效o

1 材料与方法

1.1 研究材料UV-7200的分光光度仪器，药材选用同样大小、干燥洁净的兰科植物天麻的干燥块茎作为研究材料o

1.2 炮制方法

1.2.1 鲜切法均选取300g新鲜天麻，用水冲洗干净后晾干，将晾干后的天麻进行薄片处理o

1.2.1.1 鲜切饮片将薄片处理后的天麻放入烘干机（60℃）中烘干，粉碎过筛o

1.2.1.2 真空冷冻干燥饮片将薄片处理后的天麻放置入真空干燥箱中24h，干燥后进行粉碎过筛o

1.2.2 传统工艺法选取按照《中国药典》方法进行炮制过的100g天麻药材作为研究对象o

1.2.2.1 半润透切片将100g天麻药材进行快速洗淋，之后放于密闭容器中，每隔1小时进行喷洒加水并翻动药材，每次加水10ml，共喷洒加水5次、计50ml，药材经过5h的浸润后形成半润透，将半润透的药材取出并进行切薄片处理，放入烘干机（60℃）中烘干，粉碎过筛o

1.2.2.2 润透切片将100g天麻药材喷洒加水40m l并随时翻动，经过24h浸润，使药材全部润透，取出并进行切薄片处理，置入真空干燥箱中干燥，进行粉碎过筛o

1.2.1.3 蒸制切片将100g天麻药材快速洗淋，之后置于己圆气的蒸锅中进行隔水蒸10分钟，蒸至药材软硬适宜可以进行薄片处理为宜o取出并进行切薄片处理，置入真空干燥箱中干燥，进行粉碎过筛o

1.3 含量测定方法

1.3.1 制备对照品称取采用105℃干燥到恒重的无水葡萄糖100mg作为对照品，将其放置入100ml的容量瓶中，配置成浓度为1mg/ml的标准溶液［3］o

1.3.2 标准曲线的制备分别取1mg/ml的标准溶液20、30、40、50、60μl，将取出的标准溶液分别采用蒸馏水进行定容至50m l，依次取定容后的标准溶液1ml，置入具塞试管中［4］o取0.2% 蒽酮-硫酸试剂4ml分别加入试管中摇匀，将试管共同放入沸水中10min，取出后采用流水进行冷却至室温o在490nm处测吸光度，以吸光度为纵坐标，葡萄糖质量浓度为横坐标，绘制标准曲线(表1)，得到方程：A=44.54C-0.017（R= 0.995）o

表1 葡萄糖质量浓度测定标曲线

1.3.2 方法学考察精密度实验：精密提取对照品溶液40μl，按照标准曲线的制备方法进行5次测定吸光度，结果显示吸收度良好，RSD为1.46%，表明仪器精密度良好o

稳定性实验：精密吸取供试品溶液1.0m l于具塞干燥试管中，按照标准曲线的制备方法进行6次测定吸光度，每0.5h一次测定吸光度其稳定性o测定结果显示供试品溶液在3h内稳定性良好，RSD为1.90%o

加样回收实验：准确称取1g蒸制切片样品，将样品平均分为5份；取干燥至恒重的无水葡萄糖94.25mg，放置于100m l容器瓶中，加入蒸馏水至刻度；准确量取其溶液10ml，依次加入5份样品中，按照制备方法操作，测定其吸收度，结果平均回收率为100.1%，RSD为3.4%o

1.3.3 各饮片多糖含量测定取经过4h进行减压干燥的各样品细粉约0.25g，采用精密仪器称重，置圆底烧瓶中，加石油醚(60～90℃)150mlo水浴中回流1h，趁热抽滤，残渣用热石油醚(60～90℃)涤3次，每次10ml，将残渣及滤纸置烧瓶中，加10%乙醇200m l沸水浴中加热回流1h，趁热抽滤，残渣及滤纸置烧瓶用热10%乙醇洗涤4次，每次10ml，合并滤液与洗液，放冷，转移至250m l量瓶中，加水至刻度，摇匀，精密量取1m l，置10m l具塞干燥试管中，照标准曲线的制备项下的方法，自加水至2.0ml起，依法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中含无水葡萄糖的重量(mg)，计算得出多糖含量[5]o见表2o

2 结果

不同炮制品中的天麻多糖含量明显低于生品饮片o经方差分析，有显著性差异(P＜0.05)o

表2 天麻炮制品种多糖吸光度含量测定结果（%）

3 讨论

天麻的多糖含量测定选用蒽酮-浓硫酸法，通过采用60～90℃的石油醚提取［6］，以除去树脂等干扰性成分、低浓度醇提取多糖类成分，实验过程中应准确提取各种量品，在时间及温度的控制上应精确o

植物多糖的提取常采用水煎煮法进行，但在实验过程中显示通过水提取的多糖出现树脂化问题较严重［7］o采用提取溶剂低浓度醇，并在温度较低的情况下进行提取，天麻多糖的提取效果更有效，而且对通过水煎煮法提取造成的树脂化的问题可以显著改善o

本实验研究显示：不同方法测定天麻饮片中多糖含量高低不一致，其中真空冷冻干燥饮片多糖含量最高，余下自高到底排序为：鲜切饮片、蒸制饮片、半润透饮片、润透饮片o综上所述，鲜切法加工工艺测定天麻饮片中多糖含量优于传统加工炮制方法，通过测定不同炮制方法，天麻饮片中多糖含量的研究，为天麻饮片炮制工艺改进提供理论依据o

[1]孙静，王昌利，杜鹃.不同炮制方法对天麻饮片中多糖含量影响的实验研究[J].时珍国医国药，2010，21(11)：2773-2774.

[2]翟宇君.天麻药材质量评价及H P L C指纹图谱研究[D].杨凌：西北农林科技大学，2009.

[3]张梦娟.天麻多糖的提取、纯化及活性研究[D].杨凌：西北农林科技大学，2007.

[4]韩江伟.蒙药材瑞香狼毒的炮制工艺及含量测定方法的研究[D].呼和浩特：内蒙古医科大学，2010.

[5]朱晓霞.罗学刚，天麻多糖水提及脱蛋白工艺优化[J].中药材，2007，30(6): 724.

[6]朱晓霞，罗学刚.天麻多糖提取工艺优化[J].时珍国医国药，2007，18(4):906.

[7]刘玉潭，梁华，蔡永萍，等.天麻多糖提取纯化方法及性质的初步研究[J].激光生物学报，2007，16(4):495.

LIANG Xiuying
(
Yinpian Chamber， Bureau of Chinese Herbal Medicine， Tieling City Hospital of Traditional Chinese Medicine， Liaoning Province， Tieling 112000， China）

ObjectiveTo optimizE The processing method of gastrodia elata pieces.MethodsThrough the fresh cut processing technology and traditional machining of gastrodia elata in different methods，the anthracene ketone-sulfuric acid method was used to determinE The polysaccharide content in gastrodia elata pieces.ResultsDifferent processing methods making the content of polysaccharide content in gastrodia elata pieces was different，the polysaccharide content of the vacuum freeze drying was the highest，followed by fresh cut s pieces，steamed，seminourishes pieces and nourishes pieces.ConclusionFresh cut processing technology of determinatioN Of polysaccharide in gastrodia elata pieces was superior to thE Traditional processing method.Through different processing methods，research on content determinatioN Of polysaccharide in gastrodia elatapieces provided theoretical basis for the improvement of gastrodia elata pieces processing technology.

gastrodia elata pieces;polysaccharide content;anthrone-sulfuric acid method;Chinese medicine processing

1672-2779（2015）-23-0003-03

：李海燕本文校对：杨涛

2015-09-14）