外源激素诱导母犬同期发情和排卵试验

张跃骏，李静，李飞翔，毛爱国，陈方良，韦云芳，汪斌，唐树生，万九生

（公安部昆明警犬基地云南昆明650204）

Zhang Yuejun,Li Jing,Li Feixiang,Mao Aiguo,Chen Fangliang,Wei Yunfang,Wang Bin, Tang Shusheng*,Wan Jiusheng**

（Kunming police dog base,Ministry of public security,Kunming Yunnan 650204,）

外源激素诱导母犬同期发情和排卵试验

张跃骏，李静，李飞翔，毛爱国，陈方良，韦云芳，汪斌，唐树生*，万九生**

（公安部昆明警犬基地云南昆明650204）

为取得良好的同期发情效果和排卵率，采用PMSG和HCG激素联合使用诱导母犬发情和排卵。采用外部观法和公犬试情的发情鉴定方法，观察PMSG和HCG对犬诱导发情的影响，结果：PMSG连用5 d的Ⅱ实验组和连用7 d的Ⅲ实验组均表现出100%的发情率，并且均高于连用3 d的Ⅰ试验组的发情率（40%）和空白对照组的发情率（0%）。同时，利用外科手术的方法观察发情母犬排卵情况，结果：Ⅴ组和Ⅵ组2个实验组均获得了100%发情率，发情母犬分别获得55%和75%的排卵率，且排卵率两者差异显著（P＜0．05）。试验证明外源使用PMSG和HCG可以有效诱导乏情期母犬同期发情和排卵。

工作犬；外源激素；同期发情；诱导排卵

Zhang Yuejun,Li Jing,Li Feixiang,Mao Aiguo,Chen Fangliang,Wei Yunfang,Wang Bin, Tang Shusheng*,Wan Jiusheng**

（Kunming police dog base,Ministry of public security,Kunming Yunnan 650204,）

近年来，随着中国经济和社会发展水平的不断提高，对宠物犬、工作犬需求也大幅提升，尤其是对工作犬提出了更高的质量要求。由于犬存在特殊的生殖生理特性和繁殖规律，犬虽为多胎生动物，但是发情周期比较长，通常在126～240 d（4～8个月，平均为6个月）[1-2]，若错过发情期或发情期未受孕，产仔数就会大大减少。试验借鉴在猪牛羊等大家畜领域应用较为广泛的采用PMSG+HCG外源激素处理方法，结合犬在生殖生理上的特殊性，针对本地区气候条件下的乏情期母犬进行诱导发情，并观察诱导发情犬排卵效果，旨在建立一种适合于本地区气候条件的、具有实践价值的诱导工作犬同期发情的技术体系，以缩短工作犬的繁殖周期或实现同期、统一配种繁殖，达到提高工作犬繁殖力，实现订单式高效益工作犬繁育的目的。同时，可靠的同期发情诱导在犬的胚胎移植中的作用也是至关重要的。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1．1．1 试验动物

选择公安部昆明警犬基地健康母犬，包括昆明犬、马里努阿犬2个犬种，年龄1～2岁，未经产处于间情期。犬只开始试验时进行集中饲养统一管理，每天饲喂2次，自由饮水，使试验在同一水平进行。

1．1．2 试验地点与时间

本试验均在云南省昆明市盘龙区黑龙潭公安部昆明警犬基地内完成。试验一：2013年8月15日至2013月9月5日；试验二：2013年9月10日至2013月9月30日。

1．1．3 主要试剂与药物

孕马血清促性腺激素(PMSG)，由宁波第二激素厂生产，生产批号：130422；人绒毛膜促性腺激素（HCG），由宁波第二激素厂生产，生产批号：130408。

1.2 试验方法

1．2．1 激素处理

试验一：将40只供试犬随机分成4组，每组10只，每组均是8只昆明犬，2只马里努阿犬。3个实验组，1个对照组。按表1所示方式给药处理，观察和统计犬只的发情情况。

表1 人工诱导发情药物程序筛选

试验二：将40只供试犬随机分成2组，每组20只，每组均是18只昆明犬，2只马里努阿犬。按表2所示方式给药处理。观察和统计犬只的发情情况，利用手术剖腹的方法观察适配发情犬卵泡发育和排卵情况。

表2 人工诱导发情用药程序优化

1．2．2 诱导犬发情的鉴定方法

1.2.2.1 外阴和行为变化

发情犬的阴门水肿变大，阴门下角悬垂有小滴，阴道出现血样分泌物时说明犬进入发情前期，此时犬表现不安及激动，有的母犬相互爬跨，但公犬试情不接受爬跨；当阴唇水肿非常明显，尾偏向一侧，阴门开张，阴道分泌物由血红色变为无色透明或淡黄色，此时为发情期；从发情前期至发情期母犬的阴唇横径急剧增大，至发情期则变得柔软，在排卵前阴唇横径急剧缩小，之后再度增大。当阴门水肿迅速消失，阴道仅有少量黏液排出，母犬表现安静、松弛，对公犬的吸引作用降低为发情后期；阴门无任何肿大，外部看发情周期的任何变化为间情期。

1.2.2.2 公犬试情法

每天观察母犬的外观表现及外生殖器的变化，当发现阴门流出的黏性分泌物中含有血时，用性欲旺盛的具有交配经验的公犬进行试情。每天早晨7:00和晚上19:00试情两次。试情所用的公犬要求有交配经验，已实施过输精管切除术，性欲旺盛的公犬。母犬和公犬嬉戏，当公犬阴茎接触母犬外阴部时，母犬将尾巴歪向一侧，接受公犬爬跨。此时期将人的手指插入母犬阴道时，母犬不表现抵抗，则判定为发情期。1.2.2.3排卵情况鉴定

对通过发情鉴定判断为最适配种时间的发情母犬，采用手术剖腹的方法观察卵泡发育情况，以“处于发情期卵巢肉眼可见多个直径约1～10 mm大小不等的透亮卵泡分布，形状为球形或半球形，边界清晰，明显突出卵巢表面，刚刚排出卵母细胞的卵泡破裂后呈血红色，并明显可见一凸出略外翻的小孔，继而已排空的卵泡将由红体发育为黄体”为标准，来判断诱导发情母犬是否排卵。

1.3 统计学分析

试验所得数据采用SPSS 2.0软件进行统计分析。

发情率：母犬应用药物处理后，计算发情母犬数所占的百分比；

发情率=发情犬只数/药物处理的犬只数× 100%；

诱导排卵成功率=排卵犬只数/发情犬只数× 100%；

2 结果

2.1 试验一：外部观察法及试情法的测定结果

从表3可以看出，经PMSG+HCG外源激素处理试验犬只诱导发情率均高于空白对照组，且发情犬只表现出了一定的发情症状及行为表现，表明该外源激素对犬只的诱导同情发情具有明显作用。并且Ⅱ组和Ⅲ组处理的试验犬在激素处理完后的5～7 d都表现出100%的发情率，均高于Ⅰ组40%的发情率，说明其激素处理方案均优于Ⅰ组。

表3 PMSG+HCG对母犬诱导发情的作用及效果观察

2.2 试验二：外源激素诱导工作犬同期发情及排卵的效果观察

按表2的方式对试验犬只进行诱导发情处理，2个组别的犬只均获得100%发情率，然后通过对发情犬只诱导排卵情况观察及鉴定，Ⅴ组有55%的发情犬只成功诱导排卵，Ⅵ组有75%的发情犬只成功诱导排卵，并且Ⅵ试验处理组诱导排卵成功率显著高于Ⅴ组排卵成功率（P＜0.05，差异显著），详见表4。

表4 PMSG+HCG对母犬诱导发情及排卵效果的观察

3 讨论与结论

犬虽是多胎动物，但母犬非季节性单次发情，发情间隔时间长，有一个较长的乏情期，期间卵巢是处于静止状态的[3]。而公犬本身不受季节的限制，只要母犬允许，任何时候都可以进行交配[4]。母犬较长时间的乏情期就降低了母犬的受孕和繁殖几率[5]。在犬的乏情期，对繁殖机能正常的母犬应用外源性激素诱导母犬同期发情，再结合外界因素如提高环境质量、优化饲养状况等方法，可以缩短母犬的发情间隔，提高繁殖效率[6]。另外通过激素处理，诱导母犬在同一段相对集中时期内集中发情并排卵[7]，这对于规模化养殖中的配种、产仔、培育、断奶和防疫等工作的统一管理都具有重要意义。本试验旨在探讨在云南昆明这一特定的地理环境和气候条件下，利用PMSG结合HCG对昆明犬和马里努阿犬进行同期发情，以期为本地规模化犬的繁殖育种提供参考。

从试验一和试验二供试犬的外观表现和试情来看,Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅴ组和Ⅵ组的母犬在1～2 d内出现相对集中的发情表现，且发情率及同期发情率均高于相同条件下自然发情的母犬，这表明本试验选用的PMSG+HCG激素和使用程序能很好地诱导工作犬同情发情及排卵。这主要可能是因为PMSG对母犬具有催情并促使其排出成熟卵子的作用，而HCG具有使卵泡成熟和排卵的作用，与PMSG联合使用，从而促使母犬卵母细胞发育成熟，排出更多的成熟卵子。对照组未经激素处理则均无发情表现，激素处理组的发情率与发情同期率相对于空白对照组均较高。

从试验开展的时间分析，试验一是在夏季，试验二是在秋季，夏季属于犬只发情较零散的季节，而秋季属于犬只发情较集中的季节[12]，但经外源激素处理后2个试验均获得了理想的发情率（100%），这证明本试验建立的使用外源激素PMSG+HCG诱导工作犬同期发情技术和方法是可行的，具有普遍推广应用的价值。

另外，从本试验还可以看出，诱导发情的工作犬，经发情排卵鉴定和观察，其诱导排卵成功率普遍较低，原因可能是由于PMSG的强烈刺激导致母犬的正常卵泡成熟期缩短，发情前期和发情期时间缩短，黄体功能不足，这与之前的报道结果吻合[8-11]。

在试验中，应用外源激素对犬的发情诱导情况和排卵的情况进行了研究，但未对这两种激素应用下犬的配种、受胎率和产仔率情况等进行研究和观察，有待今后进一步深入研究。■（编辑：狄慧）

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Synchronization and 0vulation of Induction Estrus in Bitches Treated with Exogenous Hormone

In order to obtain favorable effect of oestrus synchronization and ratio of ovulation,PMSG and HCG were used to induce oestrus and ovulation.Using the estrus diagnosis methods of external observation and teaser test.The effects of PMSG and HCG on the induction estrus of canine were studied.The result showed that the oestrus rate ofⅡandⅢtreatment group which injected PMSG 5 times and 7 times both were 100%,were higher than those inⅠgroup which injected 3 times（40%）and the control group(0%).Using the method of surgical laparotomy to observation of estrus and ovulation.The estrus rate ofⅤandⅥgroup were 100%,ovulation rate was 55%and 75%respectively.They are significantly different(P＜0.05).It was effective to induce the synchronization estrus and ovulation of bitch by using exogenous PMSG and HCG.

working dog;exogenous hormone;estrus synchronization;induced ovulation

10.3969/j.issn.1008-4754.2015.02.028

公安部应用创新计划项目（项目编号：2011YYCXKMJQ167），公安部重点研究计划项目（项目编号：201301Z DYJ005）。

张跃骏（1978-），男，助理研究员，硕士，主要从事警犬技术研究工作，E-mail:zhangyj4292@163．com。

*通讯作者：唐树生，男（1957-），本科，教授，主要从事警用犬种培育和警犬技术教学管理研究。

**通讯作者：万九生（1976-），男，江西乐安人，副研究员，硕士，主要从事警犬辅助繁殖生物技术研究与应用，E-mail：ynwjs@163．com。