林蛙油改善大鼠酒精性肝纤维化的作用机制

许会静，郝 峰，张 磊，张 丽，李 艳

吉林医药学院

林蛙油改善大鼠酒精性肝纤维化的作用机制

许会静，郝 峰，张 磊，张 丽，李 艳

吉林医药学院

目的：探讨林蛙油对大鼠酒精性肝纤维化影响的作用及机制。方法：84只大鼠随机分为正常对照组、模型组、林蛙油组和秋水仙碱组。模型组、林蛙油组和秋水仙碱组给予白酒复制酒精性肝纤维化模型。林蛙油组以3g/kg、秋水仙碱组以0.1 mg/kg灌胃，正常对照组和模型组以等量生理盐水灌胃，连续12周，检测大鼠血清MDA、SOD和HYP含量。结果：与模型组相比，林蛙油组、秋水仙碱组的MDA和HYP含量显著降低（P＜0.01）；SOD活力升高（P＜0.01）。结论：林蛙油通过增强机体抗氧化能力改善大鼠酒精性肝纤维化。

酒精性肝纤维化；林蛙油；大鼠

酒精性肝病(alcoholic liver disease,ALD)是长期大量饮酒导致的一种肝脏疾病.依病情轻重分为酒精性脂肪肝、酒精性肝炎、酒精性肝纤维化和酒精性肝硬化[1]。在酒精性肝病早期肝纤维化阶段进行合理治疗，可以逆转肝纤维化进程，从而缓解甚至治愈肝纤维化，阻止酒精性肝病由早期肝纤维化向中晚期肝硬变发展。因此，延缓、阻止甚至逆转肝纤维化，成为酒精性肝病治疗的主要目标。在本研究中，采用酒精灌胃的方法复制酒精性肝纤维化模型，探讨林蛙油对大鼠酒精性肝纤维化影响的作用及机制，为治疗酒精性肝纤维化提供新的依据。

1 材料与方法

1.1主要试剂与仪器林蛙油：购买长白山林蛙干油。56度红星二锅头，北京酿酒总厂；秋水仙碱片，西双版纳药业有限公司；超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialde⁃hyde,MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathion peroxidase，GSH-Px）测定试剂盒，南京建成生物工程研究所。

1.2实验动物健康Wistar大鼠（吉林大学实验动物中心）84只。

1.3分组与模型制备大鼠适应喂养1周后，随机正常对照组、模型组、林蛙油组和秋水仙碱组，每组21只。模型组、林蛙油组和秋水仙碱组复制酒精性肝纤维化模型[2]，按每周所测得的体重给予酒精体积分数为0.56的白酒7g/kg灌胃,每日晨1次连续12周。正常对照组(n=6)以等量生理盐水灌胃。

1.4分组给药12周末大鼠停止造模，并开始给予药物治疗。林蛙油组以3g/kg、秋水仙碱组以0.1 mg/kg灌胃，正常对照组和模型组以等量生理盐水灌胃，连续8周。

1.5血清学指标检测治疗8周后，末次给药后禁食12h,大鼠麻醉后经腹主动脉取血，分离血清，检测血清中MDA、SOD、HYP水平。

2 结果

与对照组比较，模型组大鼠肝组织中MDA及Hyp含量明显升高,SOD活力降低,差异有统计学意义(P<0.01)；与模型组比较，林蛙油组、秋水仙碱组大鼠肝脏组织中MDA及Hyp含量明显降低SOD活力升高,差异有统计学意义(P<0.01)。见表1。

表1 抗氧化能力检测（X…±s)

与正常对照组比较：aP<0.01,与酒精性肝纤维化组比较：b P< 0.01,与秋水仙碱组比较：c P<0.01,与林蛙油组比较：d P<0.01。

3 讨论

本研究采用酒精灌胃的方法复制大鼠酒精性肝纤维化模型，模型复制成功后，分别用林蛙油和秋水仙碱进行治疗，以探讨林蛙油对大鼠酒精性肝纤维化影响的作用及机制。MDA为脂质过氧化物的终产物，可以反映肝细胞膜脂质过氧化强弱和肝脏受损程度[3]。Hyp是胶原蛋白特有的氨基酸，在肝纤维化时胶原蛋白合成增多，其在肝脏中的含量与肝纤维化程度相平行，是评价肝纤维化程度的重要指标[4]。本研究结果显示，模型组大鼠肝组织中MDA和Hyp含量明显增加，与模型组比较林蛙油组MDA和Hyp含量降低，并好于秋水仙碱组，林蛙油能使升高的MDA和Hyp降低，表明林蛙油能减轻脂质过氧化作用、减少胶原蛋白的产生，逆转大鼠肝纤维化程度。SOD能清除超氧阴离子自由基(O2-),保护细胞免受损伤，间接反应机体清除自由基的能力[3]。本研究结果显示林蛙油组大鼠血清SOD活力高于模型组，提示林蛙油组内源性氧自由基清除能力增强，林蛙油逆转肝纤维化作用机制与增强机体抗氧化能力有关。

[1]何培元,侯志平,高淑梅,王明娟,马立新,李炳庆.酒精性肝纤维化大鼠模型的建立及Smad7/TGF-β表达变化[J].世界华人消化杂志,2014；22(19):2692-2702

[2]周宁,厉有名,张宇,虞朝晖,陈韶华,季峰.大鼠酒精性肝纤维化模型的构建[J].东南大学学报(医学版).2003:22(2):93-97.

[3]孙设宗,唐微,张红梅,等.云芝多糖、维生素E对小鼠CCl4肝损伤保护作用的研究[J].中国老年学杂志,2009,29(20):2643-2645.

[4]程君,杨云霞.黄芩苷对四氯化碳致亚急性肝纤维化小鼠的保护作用[J].华西药学杂志,2010,25(1):32-33.

许会静（1985-），女，汉族，河北清苑县人，硕士研究生，助理实验师，主要从事要从事肝脏生物化学研究。

李艳（1960-），女，汉族，吉林省吉林市人，本科，教授，主要从事肝脏生物化学研究。