中药半枝莲有效成分的提取及含量测定

何文涓 俞佳慧

（无锡卫生高等职业技术学校，江苏 无锡 214028）

半枝莲是一种常用中药。味辛、苦，性寒，归脾、肝、肾经，具有活血化瘀，清热解毒之功效，其作用广泛，通常和其他中药配伍使用，用于治疗慢性乙型肝炎和肿瘤的辅助治疗，还可用于治疗慢性胃炎、慢性结肠炎等，其发挥作用的活性成分主要是多糖、黄酮等[1-2]。本文对半枝莲中总多糖、总黄酮的提取进行了研究，对其含量进行了测定。

1 材料

1.1 药品及试剂

半枝莲药材，唇形科植物半枝莲的干燥全草，产地：江苏。

芦丁对照品购于中国食品药品检定研究院。其余试剂均为分析纯。

1.2 仪器

TU-1810 紫外可见分光光度计，北京普析通用仪器有限责任公司。

2 方法

2.1 总多糖的提取及含量测定

2.1.1 总多糖的提取[3]

半枝莲药材适当粉碎，取100g，分别用水200、100、100ml 煎煮3次，每次20min，合并煎液，浓缩至浸膏状，加75%乙醇静置过夜，过滤，取沉淀，依次用石油醚、丙酮洗涤，挥干溶剂即得总多糖。实验重复3次，分别得到总多糖9.5，11.2，10.3g，平均收得率为10.3%。

2.1.2 含量测定

（1）标准曲线的制备

取葡萄糖对照品约100mg，精密称定，置100ml 量瓶中，加水适量使溶，并加水稀释至刻度，摇匀，精密吸取1ml 置另一100ml 量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为葡萄糖标准溶液，浓度为10.56μg/ml，精密吸取0.1，0.2，0.4，0.6，0.8 和1.0ml 葡萄糖标准溶液，分别加水至1.0ml，分别加苯酚试液1ml，摇匀，再加硫酸5ml，摇匀，置沸水浴15min，取出迅速冷却至室温。同时取水lml 同法操作，作为空白对照。在490nm 处测定吸光度，结果见表1、图1。线性回归方程为：A=0.0622C-0.004，r=0.9999，在1.056～10.56μg/ml 范围内，吸光度与浓度线性关系良好。

表1 葡萄糖浓度和吸光度的关系

图1 多糖测定标准曲线

（2）样品含量测定

取总多糖约60mg，精密称定，置100m 量瓶中，加水适量使溶，并加水稀释至刻度，摇匀，精密吸取1ml 置另一100ml 量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为样品溶液，精密吸取样品液lml，按2.1.2（1）项下方法测定在490nm 波长处的吸光度，并由标准曲线计算出浓度，并求出多糖含量。3 批提取物中半枝莲粗多糖的平均含量依次为56.3%，58.6%和54.1%。3 批平均为56.3%。

2.2 总黄酮的提取及测定

2.2.1 总黄酮的提取[4]

半枝莲药材适当粉碎，取50g，加入70%乙醇200ml，40℃浸泡3h，每隔15min 搅拌一次。过滤取滤液，残渣分别再用70%乙醇100ml 浸泡两次，合并滤液，滤液减压浓缩至浸膏状，烘干即得。提取3 批，分别得干粉5.6，6.2，5.8g，平均得率为11.7%。

标准曲线制备：

取芦丁对照品约20mg，精密称定，置50ml 量瓶中，加70%乙醇适量，超声使溶，加70%乙醇稀释至刻度，作为标准溶液，浓度为0.4208 mg/ml。精密吸取0.2，0.4，0.6，0.8，1.0，1.2 和1.5ml，分别置于10ml 量瓶中，分别加入5%亚硝酸钠溶液0.3ml、10%硝酸铝溶液0.3ml 以及4%氢氧化钠溶液4ml，放置10min。测定在510nm 波长处的吸光度。结果见表2，绘制标准曲线，见图2。进线性回归，得回归方程：A=0.0117C-0.008，r=0.996，在8.416～63.12μg/ml 的范围内，吸光度与浓度线性关系良好。

表2 芦丁浓度和吸光度的关系

图2 总黄酮测定标准曲线

2.2.2 样品测定

取提取物约150mg，精密称定，置50ml 量瓶中，加70%乙醇适量，超声使溶，加70%乙醇稀释至刻度，作为样品溶液。精密吸取0.5ml，按照2.2.1 项下的标准曲线制备方法测定在490nm 波长处的吸光度，并由标准曲线计算出浓度，并求出总黄酮含量。3 批提取物中半枝莲总黄酮的平均含量依次为12.4%，13.9%和12.8%。3 批平均为13.0%。

3 讨论

多糖和黄酮类化合物具有多种生理活性，是许多中药发挥药理作用的活性成分，因此，从中药中提取多糖和黄酮类化合物进行研究具有重要的意义。本文采用水提醇沉方法从半枝莲中提取总多糖，方法简单，操作简便。提取的平均得率为10.3%，总多糖含量为56.3%，由此可推算出半枝莲中的总多糖含量为5.8%。另外，采用乙醇提取的方法，从半枝莲中提取了总黄酮，得率为11.7%，总黄酮含量为13.0%，由此推算出半枝莲中总黄酮含量为1.52%。

本研究存在的不足是由于是实验室初试，提取样品的投料量较少，由于时间限制，未对提取条件做进一步的优化。以后可在此基础上进一步优化工艺，并进行纯化，进行进一步的研究。

［1］蔡震峰，任凤莲，申定珠，等.中草药半枝莲的研究进展[J].广州化学，2006，31(4)：55-60.

［2］王刚，董玫，郭会灿，等.中药半枝莲提取物体外抗肿瘤活性研究[J].河北中医，2006，28(9)：701-702.

［3］邢文善，纪耀华，张彦彤，等.半枝莲粗多糖的提取及总糖的含量测定[J].吉林中医药，2005，25(7)：56-57.

［4］袁崇均，王茄，杨红，等.正交试验发优选半枝莲提取工艺研究[J].广东药学院学报，2001，17(3)：186-188.