枸杞多糖抗氧化活性的研究

吴 铭

（吉林工商学院，吉林 长春130507）

枸杞是茄科枸杞属的多分枝灌木植物，以果实入药，主产于宁夏、甘肃、青海、新疆、内蒙古、河北、山东、山西、河南等地，最有名的是宁夏枸杞。[1]枸杞是我国传统名贵中药材，素有“红宝”美称，富含植物多糖、蛋白质、维生素等营养成分。[2]枸杞子中含有14 种氨基酸，并含有甜菜碱、玉蜀黄素、酸浆果红素等特殊营养成分，使其具有不同凡响的保健功效。枸杞子含有丰富的胡萝卜素、维生素A1、B1、B2、C 和钙、铁等健康眼睛的必需营养，故擅长明目，所以俗称“明眼子”。[3]历代医家治疗肝血不足、肾阴亏虚引起的视物昏花和夜盲症，常常使用枸杞子。枸杞有提高机体免疫力的作用，可以补气强精，滋补肝肾、抗衰老、止消渴、暖身体、抗肿瘤的功效。枸杞具有降低血压、血脂和血糖的作用，能防止动脉粥样硬化，保护肝脏，抵制脂肪肝、促进肝细胞再生。[4]

枸杞多糖是从枸杞中提取而得的一种水溶性多糖。已明确该多糖系蛋白多糖，由阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖、甘露糖、木糖、鼠李糖6 种单糖成分组成。经研究表明，枸杞多糖是枸杞子调节免疫、延缓衰老的主要活性成分，可改善老年人易疲劳、食欲不振和视力模糊等症状，并具有降血脂、抗脂肪肝、抗衰老等作用。[5]

一、材料和方法

1.试剂和仪器

干枸杞购买于吉林长春当地药店(长春，中国)。DPPH 和BHT 从Sigma 公司购买。邻苯三酚、三羟甲基氨基甲烷、盐酸、等其他的化学试剂均为分析纯。

2.枸杞多糖制备

利用煎煮法提取枸杞多糖，称取干枸杞，加水于80℃水浴中浸泡2.5 小时，然后加热，煮沸1.5 小时，然后冷却，收集滤液；沉淀加水再加热煮沸1 小时，冷却过滤，收集滤液。将滤液合并，浓缩备用。

3.测定枸杞多糖的抗氧化活性

（1）枸杞多糖对DPPH 自由基清除能力的测定

将枸杞多糖配成不同浓度的待测液，另外配置DPPH溶液，称取DPPH25mg，用乙醇配置成0.16mmol/mL的溶液，在试管中依次加入2mL 的DPPH 溶液和1mL 不同浓度待测液，室温放置反应20min，然后在525nm处测定吸光度，以乙醇加入到2mL 的DPPH 溶液中做空白对照。以二叔丁基对甲酚（BHT）作为参照物。每个样品做三个平行样，取其平均值，清除率（SA）计算公式如下:

（2）枸杞多糖对超氧阴离子自由基清除能力的测定

将枸杞多糖配成不同浓度的待测液，取1mL 的NTB 溶液，1mL 的NADH 溶液和1mL 不同浓度的白术多糖待测液，混匀后，加入100 L的PMS溶液，混匀后置于25℃水浴中反应5min，然后在560nm处测定吸光度，以空白样品作为对照。以二叔丁基对甲酚（BHT）作为参照。每个样品做三个平行样，取其平均值，清除率计算公式如下：清除率（SA）计算公式如下：

二、结果与讨论

1.枸杞多糖对DPPH 自由基的清除能力

如图1 所示，在0-0.15mg/mL 的浓度范围内枸杞多糖清除DPPH 自由基的能力比二叔丁基对甲酚清除清除DPPH 自由基的能力弱，但是随着浓度的升高，枸杞多糖清除DPPH 自由基的能力赶上并且超过了二叔丁基对甲酚清除DPPH 自由基的能力，在浓度为0.20mg/mL 之后，枸杞多糖清除DPPH 自由基的能力都高于二叔丁基对甲酚清除DPPH 自由基的能力。结果表明，枸杞多糖具有清除DPPH 自由基的活性。

图1 枸杞多糖对DPPH 自由基的清除能力检测

图2 枸杞多糖对超氧阴离子自由基清除能力检测

2.枸杞多糖对超氧阴离子自由基清除能力

如图2 所示，枸杞多糖清除超氧阴离子自由基的能力比二叔丁基对甲酚清除超氧阴离子自由基的能力弱，但是随着浓度的升高，枸杞多糖清除超氧阴离子自由基的能力也在升高。但是从图中可以看出虽然枸杞多糖清除超氧阴离子自由基的能力比二叔丁基对甲酚清除超氧阴离子自由基的能力弱，但是二者的活性相差不大，可以说枸杞多糖与二叔丁基对甲酚清除超氧阴离子自由基的能力相当。结果表明，枸杞多糖具有清除超氧阴离子自由基的活性。

三、小结

通过超氧阴离子自由基体系和DPPH体系对枸杞多糖的抗氧化活性的研究表明，枸杞多糖具有清除DPPH自由基和超氧阴离子自由基的抗氧化活性，枸杞多糖的抗氧化活性和抗氧化机制期待进一步的研究。

[1]王艳丽，张静，孙润广，等.超声参数对枸杞多糖抗氧化活性的影响[J].生物加工过程，2012，（1）：7-12.

[2]陈文，何鸽飞，姜曼花，等．近10年枸杞的研究进展[J]．时珍国医国药，2008，19（2）：338-342．

[3]季宇彬，于蕾.中药多糖的化学及药理[M].北京：人民卫生出版社，2005.

[4]Y.L.Yan，C.HYu，J.Chen，X.X.Li，W.WangandS.Q.Li：CarbohydrPolymVol.83（2011），p.217.

[5]刘军海.响应面分析法优化枸杞多糖提取工艺[J].中成药，2008，（5）：48-51.