圣肤霜中地塞米松稳定性的影响因素及处方工艺优化

赵维娟，张 梅，王金萍（北京军区总医院药理科，北京 100700）

圣肤霜是在传统验方基础上研制的医院制剂，由连翘、白鲜皮、大黄等多味中药的含水乙醇提取物和一个化学药品以适量辅料配伍而成的水包油型乳膏剂，外用治疗急性和慢性湿疹。院内制剂由于保存期限较短，成品质量控制大多不进行长期考察，随着现代制剂科学规范化的管理，除对本品中药的主要活性成分进行考察外，地塞米松作为本方的主要成分，也应对其进行含量测定及稳定性的考察。本研究发现，不同批次制备的乳膏含量差异较大；稳定性实验随时间延长地塞米松含量有所下降。为了剔除影响因素，采用拆方实验组合，对多种因素进行快速筛选，该方法简捷、数据准确。

1 仪器与试药

HP-1050型高效液相色谱仪（包括79852型-四元泵、79853型-VWD检测器、79855A型自动进样器），HP-3395B型化学工作站（美国惠普公司）；DT-100型分析天平（北京光学仪器厂）；DHG-9240A型恒温干燥箱(上海益恒实验仪器有限公司)；KQ-100型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。

圣肤霜（由北京军区总医院制剂室提供，10 g/支，批号090106、090107、090108）；地塞米松对照品（中国药品生物制品检定所，批号100122-200804）；甲醇、乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯；新鲜重蒸馏水。

2 方法与结果

2.1 分散均匀性考察

多批次制备的乳剂中地塞米松含量差异较大，因此，采用多点取样方法考察地塞米松在基质中的含量均匀性及制备工艺中药物的溶解状态[1]。结果表明，以适量促渗剂氮酮为溶媒溶解地塞米松可以达到溶解完全和均匀分散的目的。地塞米松在氮酮中的溶解率大于30%，因此，采用氮酮-地塞米松以10∶1的比例溶解，搅拌下与油相同时缓缓加入到含有中药成分的混合溶液中进行乳化，经放大工艺考察，方法重复性良好。

2.2 含量测定

2.2.1 色谱条件 HP-1050色谱仪，ZORBAX SBC18色谱柱（4.6 mm × 250 mm，5 μm）；流速为1.0 mL·min-1；流动相为乙腈-水（52∶48），检测波长为240 nm；理论塔板数不低于3000。

2.2.2 溶液制备 （1）对照品溶液：精密称取地塞米松对照品10 mg，置100 mL容量瓶中，加甲醇溶解至刻度，摇匀，制成含量为100 μg·mL-1的对照品溶液，作为对照品储备液。取该液一定量用甲醇制成16 μg·mL-1溶液，作为对照品溶液。（2）供试品溶液：精密称取本品1 g（相当于地塞米松0.4 mg），置于具塞烧瓶中，精密加入甲醇25 mL，密塞，称定重量，振摇混合，超声提取20 min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，吸取上清液，过0.45 μm微孔滤膜，取续滤液作为供试品溶液。（3）阴性对照溶液：另取依工艺制备而成的不含地塞米松的空白乳膏1 g，按照供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。

2.2.3 专属性实验 精密吸取上述对照品溶液、供试品溶液及阴性对照溶液各10 μL，按“2.2.1”项下色谱条件进样分析。结果显示，阴性对照样品色谱峰中，在地塞米松相应保留时间位置上没有干扰峰，各样品中主要成分与其他组分可以达到基线分离[2]，检测方法专属性好（见图1）。

图1 圣肤霜中地塞米松色谱图A – 对照品，B – 供试品，C – 阴性对照；1 – 地塞米松Fig 1 HPLC chromatograms of dexamethasone in Shengfu frostA – reference substance, B – sample, C – negative reference substance;1 – dexamethasone

2.2.4 方法学考察 地塞米松在5 ～ 80 μg·mL-1范围内线性关系良好，以峰面积为纵坐标（Y），进样量为横坐标（X），进行线性回归，得回归方程Y = 1.480 0X+ 17.949，r = 0.999 8。精密度实验测得地塞米松峰面积RSD为0.13%；样品溶液在8 h内稳定性良好，峰面积RSD为1.17%；重复性实验测得含量为104.21%，RSD为 0.70%，结果表明方法重复性良好。

2.2.5 加样回收率实验 取已知含量的圣肤霜乳膏约1.0 g（每克含地塞米松0.409 3 mg），共9份，精密称定重量，分别加入编号1 ～ 9的具塞锥形瓶中，分别精密加入地塞米松对照品0.300 0、0.400 0、0.500 0 mg，按照“2.2.2”项下供试品溶液制备方法制得样品溶液，进样10 μL，分别测定含量，平均回收率为100.70%，RSD为1.57%，详见表1。

表1 加样回收率实验结果. n = 6Tab 1 Results of recovery experiment. n = 6

2.3 影响因素考察

以正交表L9（34）设计拆方组合，60 ℃高温破坏10 d，考察各组方中地塞米松的稳定性，结果见表2、3。

表2 拆方组合实验的影响因素Tab 2 Influence factors of the formulation separation and reorganization experiment

结果显示，影响乳剂pH值的因素C ＞ D ＞ B ＞ A，碱性强度C1 ＞ C2 ＞ C3；影响地塞米松含量的因素C ＞A ＞ D ＞ B，含量稳定性C3 ＞ C2 ＞ C1。即乳剂pH环境是影响地塞米松稳定性的关键因素，随着碱性强度的增加地塞米松稳定性下降。剔除影响因素C（三乙醇胺），调整处方制备工艺，改善地塞米松溶解状态并对制剂进行稳定性实验考察。

表3 拆方组合实验结果Tab 3 Results of the formulation separation and reorganization experiment

2.4 稳定性实验

取3批制剂（优化处方B，批号090106-B1、090107-B2、090108-B3）在40 ℃条件下加速实验6个月，对比优化前后处方中地塞米松的稳定性，考察结果见表4。A方优化前pH ＞ 8.7（含三乙醇胺）；B方优化后pH = 6.1 ± 0.13，乳化剂为十二烷基硫酸钠。

表4 加速实验及处方pH值对地塞米松含量的影响. n = 3Tab 4 Accelerated stability test and effect of the pH level on content of dexamethasone in the formulation. n = 3

3 讨论

3.1 溶媒对药物分散均匀性的影响

圣肤霜是由多味中药的含水乙醇提取物和地塞米松配伍而成的水包油型乳膏剂。研究发现，地塞米松具有较强亲脂性，由于中药提取液在提取、浓缩过程中对乙醇含量的影响较大，以此作为主要溶媒是导致批次之间地塞米松分散不均匀的关键因素[3-4]。结果表明，以适量促渗剂氮酮溶解地塞米松，再依工艺制备成乳膏可达到均匀分散的效果。

3.2 pH值对药物稳定性的影响

加速实验结果显示，处方pH ＞ 7.3时，地塞米松含量显著下降（P ＜ 0.001）。原处方中三乙醇胺为有机碱化剂，能与游离脂肪酸形成具有类似清洁剂、乳化剂的优良特性，基质pH 8.0（为弱碱性基质），对皮肤无刺激，故广泛用于药剂、日用化工品的制造。由于地塞米松的稳定性受乳膏pH的影响，因此改变乳化条件，剔除影响因素三乙醇胺，将乳剂pH值调整在5.5 ～ 6.5之间，可使地塞米松的含量保持稳定。

3.3 拆方实验快速筛查优化处方

6个月的加速实验结果显示，本品中地塞米松的含量有下降趋势，为了快速剔除影响制剂稳定性的因素，对复杂成分进行拆方组合，采用60 ℃高温破坏实验考察10 d，从中药组份、基质组份、稳定剂组份等方面进行筛查，并结合乳剂pH对含量测定数据的影响综合分析，可以快速优化处方。本实验结果准确，考察周期短，与文献[5-7]方法比较，简单实用，适用于处方工艺的快速筛查和优化。