凤冈锌硒绿茶中7种儿茶素及咖啡因含量特征

王兰兰+向丽萍+李霞+张俊英+冯发青+王奥

摘要：采用HPLC方法同时测定了26个凤冈锌硒绿茶样品中7种儿茶素儿茶素（+C）、没食子儿茶素（GC）、没食子儿茶素没食子酸酯（GCG）、表儿茶素（EC）、表没食子儿茶素（EGC）、表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）、表儿茶素没食子酸酯（ECG））和咖啡因（CAF）的含量。结果表明，凤冈锌硒绿茶中儿茶素总含量平均值为20.08%，其中EGCG含量最高；儿茶素平均品质指数为556；咖啡因的含量平均值为3.9%。该研究可为凤冈锌硒绿茶品质的进一步研究提供依据。

关键词：凤冈锌硒绿茶；儿茶素；咖啡因

中图分类号：O657.7+2 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2014）19-4692-02

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2014.19.048

Contents of Seven Types of Catechins and Caffeine in Zinc

and Selenium Tea of Fenggang

WANG Lan-lan， XIANG Li-ping， LI Xia， ZHANG Jun-ying， FENG Fa-qing， WANG Ao

（Institute of Product Quality Inspection & Testing of Zunyi， Zunyi 563000， Guizhou， China）

Abstract： HPLC method was used in simultaneous determination of seven types of catechin （+C）， （-）-gallocatechin （GC）， （-）-gallocatechin gallate （GCG）， L-epicatechin （EC）， （-）-epigallocatechin （EGC）， epigallocatechin gallate （EGCG）， （-）-epicatechin gallate （ECG）， and caffeine in zinc and selenium tea of Fenggang. The results showed that the percentage of average mean of catechins contents were 20.08% in samples， in which EGCG content was the highest. The percentage of average mean of caffeine content was 3.9%， and the average quality index of catechin was 556. It will provide the basic data for evaluating the quality of zinc and selenium tea of Fenggang.

Key words： zinc and selenium tea of Fenggang； catechins； caffeine

儿茶素类化合物是茶叶中一类含量较丰富的功能性活性成分，在新茶中的质量分数（以干叶计）为10%～20%。儿茶素类化合物具有较强的抗氧化特性，是决定茶叶品质的关键因子，也是当前食品、医药领域研究的热点。咖啡因具有适度祛除疲劳、兴奋神经的作用，一直以来都备受关注。

凤冈锌硒茶不但口感醇爽、浓厚，产地环境条件优越，是贵州重要的有机茶叶产品，现有研究已证实其茶叶产品同时含有较高的锌、硒[1，2]。2006年，凤冈锌硒茶被国家质检总局列为贵州第4个国家地理标志保护产品。现有研究对凤冈锌硒绿茶中的儿茶素类品质成分关注较少，这不利于地理标志保护产品-凤冈锌硒茶的系统研究。因此，本研究拟通过高效液相色谱法（HPLC）对凤冈锌硒绿茶的儿茶素类物质、咖啡因进行分析，以期了解凤冈锌硒绿茶中儿茶素等品质成分的特征，为茶叶产品的生产加工提供技术支撑。

1 材料与方法

1.1 试验材料

于2012-2013年，依据凤冈富锌富硒茶地理标志产地保护所界定的地域范围，在贵州省遵义市凤冈县田坝随机抽取了26个凤冈锌硒绿茶样品。所有样品均为独芽、依照凤冈富锌富硒茶加工工艺进行制作，样品经粉碎机粉碎、过20目筛后密封备用。

1.2 试验方法

1.2.1 样品前处理 依据GB/T 8313-2008《茶叶中茶多酚和儿茶素类含量的测定方法》对样品进行处理。

1.2.2 标准溶液配制 将25 mL EDTA溶液（10 g/L）、25 mL抗坏血酸溶液（10 g/L）、50 mL乙腈、以去离子水定容至500 mL，制得混合溶液。

分别准确称取各标准品适量，以上述混合溶液配制标准储备液，其浓度分别为：0.484 6 mg/mL（GC）、2.450 0 mg/mL（EGC）、1.098 0 mg/mL（+C）、2.014 0 mg/mL（CAF）、2.008 0 mg/mL（EGCG）、1.019 0 mg/mL（EC）、0.441 1 mg/mL（GCG）、2.002 0 mg/mL（ECG）。

取上述储备液GC、GCG各1.00 mL，EGC、CAF、EC、ECG各0.50 mL，EGCG 0.20 mL，+C 0.35 mL，以混合溶液溶解并定容至10 mL，即得混合标准溶液。

1.2.3 检测条件 e2695高效液相色谱仪（美国Waters公司），流动相A：90 mL乙腈、20 mL乙酸、2 mL EDTA，以去离子水定容至1 L；流动相B：800 mL乙腈、20 mL乙酸、2 mL EDTA，以去离子水定容至1 L。

色谱柱为Kromasil 100-5 C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），梯度洗脱条件为：0～10 min（100%A），10～32 min，（100%～80% A）；流量为1.0 mL/min；柱温为35 ℃，检测波长为278 nm；进样体积为10 μL。

1.3 结果计算

试验数据均采用SPSS13.0进行统计分析，用Excel 2003作图。

2 结果与分析

2.1 总儿茶素含量

如图1所示，对26个样品的儿茶素含量进行测定，结果表明，样品中8种儿茶素总含量为12.17%～26.47%，儿茶素总含量平均值为20.08%。

2.2 儿茶素分布情况

凤冈锌硒绿茶中各类儿茶素的平均含量范围及其各自所占比例如表1所示。凤冈锌硒绿茶的儿茶素类化合物的含量大小为EGCG>EGC>ECG>EC>+C>GCG>GC，其中EGCG的含量最高，占65%左右。除了EGC和ECG所占比例在14%左右外，其余5种儿茶素所占的比例都在3%及以下。

2.3 品质指数

根据阮玉成等[3]提出的“儿茶素品质指数”的经验公式：

儿茶素品质指数=■ ×100%

由上式可计算出，凤冈锌硒茶的儿茶素品质指数为400～765，平均值为556。

2.4 咖啡因含量

所测样品中最低咖啡因含量为3.3%，最高咖啡因含量为4.5%，平均含量为3.9%。

3 小结与讨论

相关研究指出，儿茶素类化合物具有抗氧化、抗菌、扩张血管等功能，茶叶中儿茶素类化合物含量的高低也是茶叶对应功能特性的体现。有研究表明茶叶中儿茶素含量一般在10%～20%[4]，而凤冈锌20%，可见其具有较高的品质。但也有部分样品中的儿茶素总量偏低，这可能与茶叶生产加工以及原料品质有关。

在凤冈锌硒绿茶中EGCG、ECG和EGC等3种儿茶素的含量最高，占总儿茶素含量的90%以上，在GB/T 8313-2008《茶叶中茶多酚和儿茶素类含量的测定方法》中未包含的GCG和GC儿茶素的含量比例均在2%以下。EGCG是绿茶中具有清除自由基和抗氧化能力最强的一种儿茶素，研究表明，EGCG的浓度为0.006 mg/mL时对氧自由基消除率为98%，浓度为0.1 mg/mL时，对羟自由基清除率为99.9%[4]。EGCG主要是从茶叶中提取、纯化获得。本研究发现凤冈锌硒茶中的EGCG含量平均值在13.46%，可作为EGCG提取的重要原料，也为凤冈锌硒茶的深加工提供了依据。

参考文献

[1] 刘 义，邵树勋. 凤冈富锌富硒茶园中的锌及其形态分析[J]. 地球与环境，2010，38（3）：328-332.

[2] 刘 义，徐一帆，邵树勋.贵州省凤冈县田坝村茶园土壤硒的含量及评价[J].贵州地质，2012，29（1）：72-76。

[3] 阮玉成，程启坤.茶儿茶素的组成与绿茶品质的关系[J].园艺学报，1964，3（3）：278-300.

[4] 尤 新.绿茶提取物儿茶素及EGCG功能和发展状况[J].食品与生物技术学报，2010，29（3）：321-325.

色谱柱为Kromasil 100-5 C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），梯度洗脱条件为：0～10 min（100%A），10～32 min，（100%～80% A）；流量为1.0 mL/min；柱温为35 ℃，检测波长为278 nm；进样体积为10 μL。

1.3 结果计算

试验数据均采用SPSS13.0进行统计分析，用Excel 2003作图。

2 结果与分析

2.1 总儿茶素含量

如图1所示，对26个样品的儿茶素含量进行测定，结果表明，样品中8种儿茶素总含量为12.17%～26.47%，儿茶素总含量平均值为20.08%。

2.2 儿茶素分布情况

凤冈锌硒绿茶中各类儿茶素的平均含量范围及其各自所占比例如表1所示。凤冈锌硒绿茶的儿茶素类化合物的含量大小为EGCG>EGC>ECG>EC>+C>GCG>GC，其中EGCG的含量最高，占65%左右。除了EGC和ECG所占比例在14%左右外，其余5种儿茶素所占的比例都在3%及以下。

2.3 品质指数

根据阮玉成等[3]提出的“儿茶素品质指数”的经验公式：

儿茶素品质指数=■ ×100%

由上式可计算出，凤冈锌硒茶的儿茶素品质指数为400～765，平均值为556。

2.4 咖啡因含量

所测样品中最低咖啡因含量为3.3%，最高咖啡因含量为4.5%，平均含量为3.9%。

3 小结与讨论

相关研究指出，儿茶素类化合物具有抗氧化、抗菌、扩张血管等功能，茶叶中儿茶素类化合物含量的高低也是茶叶对应功能特性的体现。有研究表明茶叶中儿茶素含量一般在10%～20%[4]，而凤冈锌20%，可见其具有较高的品质。但也有部分样品中的儿茶素总量偏低，这可能与茶叶生产加工以及原料品质有关。

在凤冈锌硒绿茶中EGCG、ECG和EGC等3种儿茶素的含量最高，占总儿茶素含量的90%以上，在GB/T 8313-2008《茶叶中茶多酚和儿茶素类含量的测定方法》中未包含的GCG和GC儿茶素的含量比例均在2%以下。EGCG是绿茶中具有清除自由基和抗氧化能力最强的一种儿茶素，研究表明，EGCG的浓度为0.006 mg/mL时对氧自由基消除率为98%，浓度为0.1 mg/mL时，对羟自由基清除率为99.9%[4]。EGCG主要是从茶叶中提取、纯化获得。本研究发现凤冈锌硒茶中的EGCG含量平均值在13.46%，可作为EGCG提取的重要原料，也为凤冈锌硒茶的深加工提供了依据。

参考文献

[1] 刘 义，邵树勋. 凤冈富锌富硒茶园中的锌及其形态分析[J]. 地球与环境，2010，38（3）：328-332.

[2] 刘 义，徐一帆，邵树勋.贵州省凤冈县田坝村茶园土壤硒的含量及评价[J].贵州地质，2012，29（1）：72-76。

[3] 阮玉成，程启坤.茶儿茶素的组成与绿茶品质的关系[J].园艺学报，1964，3（3）：278-300.

[4] 尤 新.绿茶提取物儿茶素及EGCG功能和发展状况[J].食品与生物技术学报，2010，29（3）：321-325.

色谱柱为Kromasil 100-5 C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），梯度洗脱条件为：0～10 min（100%A），10～32 min，（100%～80% A）；流量为1.0 mL/min；柱温为35 ℃，检测波长为278 nm；进样体积为10 μL。

1.3 结果计算

试验数据均采用SPSS13.0进行统计分析，用Excel 2003作图。

2 结果与分析

2.1 总儿茶素含量

如图1所示，对26个样品的儿茶素含量进行测定，结果表明，样品中8种儿茶素总含量为12.17%～26.47%，儿茶素总含量平均值为20.08%。

2.2 儿茶素分布情况

凤冈锌硒绿茶中各类儿茶素的平均含量范围及其各自所占比例如表1所示。凤冈锌硒绿茶的儿茶素类化合物的含量大小为EGCG>EGC>ECG>EC>+C>GCG>GC，其中EGCG的含量最高，占65%左右。除了EGC和ECG所占比例在14%左右外，其余5种儿茶素所占的比例都在3%及以下。

2.3 品质指数

根据阮玉成等[3]提出的“儿茶素品质指数”的经验公式：

儿茶素品质指数=■ ×100%

由上式可计算出，凤冈锌硒茶的儿茶素品质指数为400～765，平均值为556。

2.4 咖啡因含量

所测样品中最低咖啡因含量为3.3%，最高咖啡因含量为4.5%，平均含量为3.9%。

3 小结与讨论

相关研究指出，儿茶素类化合物具有抗氧化、抗菌、扩张血管等功能，茶叶中儿茶素类化合物含量的高低也是茶叶对应功能特性的体现。有研究表明茶叶中儿茶素含量一般在10%～20%[4]，而凤冈锌20%，可见其具有较高的品质。但也有部分样品中的儿茶素总量偏低，这可能与茶叶生产加工以及原料品质有关。

在凤冈锌硒绿茶中EGCG、ECG和EGC等3种儿茶素的含量最高，占总儿茶素含量的90%以上，在GB/T 8313-2008《茶叶中茶多酚和儿茶素类含量的测定方法》中未包含的GCG和GC儿茶素的含量比例均在2%以下。EGCG是绿茶中具有清除自由基和抗氧化能力最强的一种儿茶素，研究表明，EGCG的浓度为0.006 mg/mL时对氧自由基消除率为98%，浓度为0.1 mg/mL时，对羟自由基清除率为99.9%[4]。EGCG主要是从茶叶中提取、纯化获得。本研究发现凤冈锌硒茶中的EGCG含量平均值在13.46%，可作为EGCG提取的重要原料，也为凤冈锌硒茶的深加工提供了依据。

参考文献

[1] 刘 义，邵树勋. 凤冈富锌富硒茶园中的锌及其形态分析[J]. 地球与环境，2010，38（3）：328-332.

[2] 刘 义，徐一帆，邵树勋.贵州省凤冈县田坝村茶园土壤硒的含量及评价[J].贵州地质，2012，29（1）：72-76。

[3] 阮玉成，程启坤.茶儿茶素的组成与绿茶品质的关系[J].园艺学报，1964，3（3）：278-300.

[4] 尤 新.绿茶提取物儿茶素及EGCG功能和发展状况[J].食品与生物技术学报，2010，29（3）：321-325.