血清HE4CA125和T 淋巴细胞亚群联合检测在早期卵巢癌中的诊断价值

陈丽艳（湖北省恩施自治州中心医院临床检验中心 445000）

卵巢癌是妇科临床常见的恶性肿瘤，其发病率仅次于宫颈癌和子宫体癌，而且病死率极高，已经严重危及到女性的生命健康［1］。由于卵巢癌临床无典型的症状表现，而且难以区分良恶性肿瘤，因此临床诊断和治疗十分困难［2－4］。本研究旨在分析血清人附睾上皮分泌蛋白4（HE4）、糖链抗原125（CA125）和T 淋巴细胞亚群联合检测在鉴别恶性肿瘤、良性肿瘤的临床效果，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取2011年6月至2013年9月本院接受治疗的60例卵巢恶性肿瘤患者为观察组，60例卵巢良性肿瘤患者对照组，同时选取自愿参与本次研究的60例健康女性为健康对照组，所有病例均经病理确诊。观察组患者年龄为37～74岁，平均年龄（51.1±3.6）岁；依据临床分期FIGO 标准：Ⅰ～Ⅱ期23例，Ⅲ～Ⅳ期37例。对照组患者年龄为38～74岁，平均年龄（52.1±6.1）岁。观察组患者年龄为38～74岁，平均年龄（52.4±6.2）岁。3组患者一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），组间具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 仪器和试剂的选用 HE4酶联免疫分析选用Fujirebio人HE4测定试剂盒96T（瑞典CanAg公司）；CA125电化学发光免疫分析选用罗氏E170全自动电化学发光试剂盒和发光仪（德国罗氏公司）；T 淋巴细胞群检测仪选用FACSCalibur型流式细胞仪（美国BD 公司）。

1.2.2 血清HE4、CA125的检测血清HE4检测采用酶联免疫分析试剂盒，CA125检测采用电化学发光免疫分析法。使用罗氏E170全自动电化学发光仪，所有试剂盒及仪器的使用均遵照使用说明书进行，阳性标准为HE4＞150pmol／L，CA125＞35U／mL。

1.2.3 外周血T 淋巴细胞亚群的检测将抗凝的静脉血2 mL缓慢注入2mL 的淋巴细胞分离液中，采用半径为19cm的离心机以1500r／min离心10min，提取分离后的淋巴细胞层，使用磷酸缓冲盐溶液（PBS）2mL 漂洗、离心2次后，调整细胞数106个／mL，放置备用。取淋巴细胞液100μL、三色鼠抗人CD4－FITC、CD8－PE、CD3－PE－CY5抗体液10μL，采用半径为19cm 的离心机以1500r／min离心15min，使用PBS 2 mL漂洗后，再离心1次，加入PBS 500μL 进行流式细胞仪检测，在上机前调整变异系数，并将系数稳定在2%以内，上机后收集104个细胞，测试完成后，使用Cell Quest Plot软件计算和分析数据［5］。阳性标准为CD4／CD8≤1.2。

1.3 观察指标观察记录3组患者血清HE4、CA125变化和外周血T 淋巴细胞亚群CD3、CD4、CD8的分布；记录观察组患者不同分期患者血清HE4、CA125和T 淋巴细胞亚群水平及阳性率。

1.4 统计学处理采用SPSS19.0软件对数据进行统计学分析，计量资料采用表示，组间比较采用t检验；计数资料采用百分率表示，组间比较采用χ2检验。以α＝0.05为检验水准，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3组患者血清HE4、CA125水平的比较观察组患者血清HE4、CA125水平明显高于其他两组，差异具有统计学意义（P＜0.05）；对照组血清HE4假阳性率明显低于血清CA125，差异具有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 3组患者血清HE4、CA125水平比较

2.2 3组患者外周血T 淋巴细胞亚群分布观察组与其他两组比较，外周血T 淋巴细胞CD4亚群减少，CD8亚群增加，CD4／CD8比值显著下降，差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 3组患者外周血T 淋巴细胞亚群检测结果比较

2.3 血清HE4、CA125和T 淋巴细胞亚群对卵巢癌的诊断意义血清HE4、CA125和T 淋巴细胞亚群联合检测敏感性及特异性均高于其他检测，而且约登指数大，差异具有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

表3 HE4、CA125和T 淋巴细胞亚群联合检测与单独检测比较

2.4 观察组不同分期患者血清HE4、CA125和T 淋巴细胞亚群水平及阳性率Ⅰ～Ⅱ期卵巢癌患者血清HE4、CA125及T 淋巴细胞亚群阳性率低于Ⅲ～Ⅳ期患者患者，差异有统计学意义（P＜0.05）。Ⅰ～Ⅱ期卵巢癌患者的T 淋巴细胞亚群阳性率低于Ⅲ～Ⅳ期卵巢癌患者，而CD4／CD8比值高于Ⅲ～Ⅳ期患者，差异具有统计学意义（P＜0.05）。见表4。

表4 不同分期患者的血清HE4、CA125和T 淋巴细胞亚群水平及阳性率比较

3 讨论

早期卵巢癌患者无明显的临床特征和表现，不易被发现［6－8］，而卵巢癌的预后很大程度上取决于临床诊断分期。因此，卵巢癌早期诊断需要一种高灵敏性、高特异性的方法［9－10］。近年来，临床常用的卵巢癌肿瘤标记物为血清CA125［11－12］。本研究结果显示，CA125的敏感性为73.1%，特异性为86.4%，可见CA125的敏感性和特异性均较低。张霞等［13］的研究结果显示，CA125诊断卵巢癌的敏感性仅为73.1%，诊断Ⅰ～Ⅱ期卵巢癌敏感性为60.0%，诊断Ⅲ～Ⅳ期卵巢癌的敏感性为80.0%，与本研究结果相一致。此外，一些良性疾病中CA125也有一定的异常表达。HE4检测早期卵巢癌虽然具有较高的敏感性，但在其他恶性肿瘤，如子宫内膜癌、肺癌等［14］中也有表达，具有一定的局限性。本研究结果显示，观察组血清HE4、CA125水平明显高于对照组和健康对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），而CA125在对照组的假阳性较高，单独检测HE4特异性大于CA125，而两者的敏感性差异无统计学意义（P＞0.05）。

综上所述，采用血清HE4、CA125和T 淋巴细胞亚群联合检测诊断卵巢癌，具有极高的敏感性和特异性，值得临床推广应用。

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