免疫固定电泳对多发性骨髓瘤的诊断价值＊

廖君群，杨清秀，毕小云（.重庆医科大学附属第一医院检验科，重庆 40006；.重庆医科大学，重庆 40006）

多发性骨髓瘤（MM）是一种骨髓浆细胞恶性增殖性疾病，又称骨髓瘤、浆细胞骨髓瘤或Kahler病，它的特征是单克隆浆细胞恶性增殖并分泌大量单克隆免疫球蛋白（Ig），以中老年人发病为主。中国MM年发病率约为1／10万，占所有恶性肿瘤的1%，在恶性血液系统疾病中占10%左右，而目前随着人口老龄化以及检测技术的不断提高，MM 的发病率不断增加［1］。由于该病起病隐匿，临床表现复杂多样，常伴贫血、骨折、感染、肾功能不全等症状，极易漏诊或误诊，以致许多患者错过最佳治疗时期。因此，对MM 的早期诊断和鉴别显得极其重要。免疫固定电泳（IFE）具有周期短、敏感性高、特异性强和分辨率高的优点，主要用于M 蛋白的鉴定以明确诊断MM。本文收集本院2011年4月至2012年10月经IFE 检测的患者标本，分析其电泳特征，旨在探讨其在MM 临床诊断、鉴别诊断及分型中的临床价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料选择2011年4月至2012年10月本院经IFE检测的患者155例，年龄19～90岁，平均60.8岁。所有病例均经临床确诊，其中MM 患者73人，均符合临床MM 诊断标准。MM 患者中男41例（56.16%），女32例（43.84%）；年龄42～78岁，平均59.7岁。73例MM 患者中，IFE 检测阳性51例。

1.2 仪器与试剂仪器为法国Sebia公司生产的Hydarsys 2琼脂糖凝胶电泳仪；试剂为法国Sebia公司生产的Hydarsys 2琼脂糖凝胶电泳仪配套试剂。

1.3 方法采集空腹（8～12h）静脉血4mL，3000r／min离心5～10min。采用IFE的方法（包括琼脂糖凝胶蛋白电泳和免疫沉淀两个过程），对患者血清的M 蛋白进行分型，即先对血清蛋白进行电泳分离，然后应用固定剂和各型Ig及其轻链的抗血清，加入凝胶道，与对应抗原结合，从而对各类Ig及其轻链进行分型。具体方法：（1）取患者血清用A、B稀释液分别按1∶2（血清30μL＋稀释液60μL）、1∶5（血清20μL＋稀释液100μL）倍稀释，其中A 液用于血清和IgA、IgM、κ、λ，B 液用于IgG；（2）稀释后点样10μL（1、8、15号位不加，3、10号位加B液，其余各孔加A 液）；（3）加抗血清（ELP加固定液8μL，其余各孔加8μL抗血清，依次为IgG、IgA、IgM、κ、λ；（4）吸液、烘干；（5）染色、脱色、烘干；（6）扫描并观察结果。

1.4 统计学处理所有数据应用Microsoft Excel 2003版进行处理。

2 结果

2.1 血清IFE结果155例患者的血清IFE 检测结果中，67例阳性，其中MM 51例。电泳阳性结果及免疫分型结果见表1、2，由表1可得出IFE对MM 诊断的灵敏度和特异度分别为69.9%，80.5%。

表1 155例患者血清IFE四格表分析结果

表2 51例MM 患者血清IFE分型结果［n（%）］

2.2 相关实验室检查结果73例MM 患者相关实验室检查结果见表3。

表3 73例MM 患者相关实验室检查结果

表4 42例IFE阳性患者初诊断及入住科室分布

2.3 51例IFE阳性MM 患者初诊断及入院科室情况对51例IFE阳性MM 患者病例资料的进行回顾性分析，由于这51例IFE阳性的MM 患者中，有9例患者入院前已确诊为MM，无法确定患者初诊断及入住科室，因此只做其余42例MM 患者的初诊断及入住科室分析。见表4。

3 讨论

MM 是恶性浆细胞病中最常见的一种类型，是一种进行性的肿瘤性疾病。其特征为骨髓浆细胞瘤和一株完整性的单克隆免疫球蛋白（IgG，IgA，IgD 或IgE）或Bence Jones蛋白质（游离的单克隆性κ或γ轻链）过度增生。MM 早期症状不明显，有的甚至无自觉症状，当出现症状时，其临床表现也是多种多样，常伴有多发性溶骨性损害、高钙血症、贫血、肾脏损害，而且对细菌性感染的易感性增高，正常Ig的生成受抑。但这些异常检查结果缺乏特异性，需要与其他浆细胞疾病和实体瘤骨侵犯鉴别。IFE是一种免疫沉淀反应的混合技术，将区带电泳和免疫扩散结合起来，是一种灵敏度很高的分离及鉴定M 蛋白的方法，具有很强的特异性［2－3］。本文中IFE 对MM 诊断的灵敏度和特异度，分别为69.9%和80.5%，与临床报道有一定差异［3］，可能与研究病例较少有关。IFE 可对M 蛋白进行免疫分型，MM 的每一型都有自己的特点，临床可根据分型结果，采取个体化治疗，选择适合患者的治疗方法，以达到缓解病情和治愈疾病的目的。

按照国内MM 的诊断标准［4］，67例IFE 阳性患者中，51例被确诊为MM，IFE的阳性预测值达76.1%，说明IFE 阳性患者被诊断为MM 的可能性很大，但本次阳性预测值低于以往的报道［5］，可能与病例数较少有关。22例IFE 阴性的MM患者中，大部分患者入院前已被确诊为MM，经过治疗后，病情有所改善，以致血清中M 蛋白水平降低；另有少部分患者为低分泌型或未分泌型，因此出现IFE 检测为阴性的情况。16例IFE阳性的非MM 患者中，有2例巨球蛋白血症，2例浆细胞病，3例淋巴系统肿瘤，1例POEMS综合征，这些疾病都会引起血清中Ig不同程度的升高，从而造成假阳性的出现。因此，可以通过IFE对血清M 蛋白进行分离及鉴定，对MM 进行诊断，疗效监测，指导临床治疗。

本研究中，73例MM 患者中，男41例（56.16%），女32例（43.84%），男女患病比例约为1.28∶1，说明男性发病率高于女性。

MM 患者的临床表现多种多样，出现不同程度的贫血、骨痛、蛋白尿、感染、高钙血症、肾功能不全等症状。由于MM 患者临床表现的多样化，极易被漏诊、误诊。据不同医院的统计资料分析，MM 误诊率可达54.00%～69.11%［6］，许多MM 患者因此错过了最佳治疗时期。本研究中初诊为骨痛骨折的有11例，肾病、肾功能不全5例，冠心病、心绞痛2例，贫血待查者9例，色素性紫癜性皮肤病2例，发热1例，其他12例。由于原发疾病被掩盖，患者常会就诊于其他科室。因此，对于40岁以上的患者，若出现不明原因的腰痛、骨关节痛、病理性骨折、不明原因的蛋白尿、贫血、高钙血症、感染等，均应考虑MM的可能［7］。IFE结合了蛋白质电泳的高分辨率和抗原抗体反应的特异性，结果判断简易，大大降低了MM 的误诊率。有报道指出，IFE 可对MM 患者进行早期诊断［8］，与本研究相符。本研究中，有2例初诊断为色素性紫癜性皮肤病，1例发热患者，骨髓瘤病变还没累及肾脏，还没造成严重的溶骨性损伤，但IFE已能对血清M 蛋白进行检测，对MM 进行早期诊断，为临床医生提供可靠的诊断依据。

本研究中51例IFE阳性MM 患者IgG型最常见，与文献［9－10］报道相符，有24例，占47.06%；IgA型15例，占29.41%；轻链型11例，占21.57%，其中游离轻链κ型7例，占13.73%；游离轻链λ型4例，占7.84%，而IgM型λ只有1例，占1.96%。各型别的κ∶λ比例不同，IgG 中κ∶λ为1∶1.4，IgA型中κ∶λ为1.5∶1，轻链型中κ∶λ为1.75∶1。在16例IFE阳性的非MM 患者中IgM 4例，占25.00%；IgG 3例，占18.75%；IgA 4例，占25.00%；游离轻链λ型5例，占31.25%。4例IgM 为巨球蛋白血症或淋巴系统瘤。在MM患者中，IgM型所占比例很小，因此，当IFE检测结果出现IgM时，要特别注意MM 与其他浆细胞病如巨球蛋白血症和淋巴系统瘤的鉴别，减少误诊率。

综上所述，IFE是一种特异性、灵敏度及准确度很高的能快速分离及鉴别单克隆M 蛋白的方法。在MM 的鉴别诊断、指导治疗、疗效监测、预后判断都有重要的临床意义。随着MM 发病率的提高，临床表现的多样化，IFE 已成为诊断MM必不可少的实验室常规检查项目，为临床医生的诊断、治疗提供可靠的依据。另外，还应加强多学科、多领域的合作研究，寻找新的快速准确诊断MM 的方法，进一步提高对MM 的诊断正确率。

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