西宁地区健康人群血清总胆红素参考区间的调查

刘淑敏，黎明

(1、青海红十字医院检验科，青海 西宁810000；2、青海省人民医院检验科，青海 西宁810002)

生物参考区间是解释检验结果、分析检验信息的一个基本尺度和依据[1]。临床检验对象由于性别、年龄、居住地区、季节、种族等不同，其生物参考区间存在差异[2]。实验室为临床提供检验项目可靠的生物参考区间，才能使临床对患者或健康体检者的诊断治疗有明确的指引[3]。根据ISO15189《医学实验室-质量和能力的专用要求》[4]的要求，建立或引用适合本实验室的生物参考区间，为临床提供准确的诊断依据。为了解本地区健康人群的总胆红素水平，并建立适合本地区的参考区间，现对230例体检者进行调查如下。

1 材料与方法

1.1 随机抽取2012年6月-12月在本院进行体检的健康者380例，年龄 14～75岁，平均 36.5岁，选择其中240例，其调查问卷内容符合要求，相关检查均无疾病。

1.2 仪器和试剂 (1)仪器：OLYMPUS AU-2700全自动生化分析仪。(2)试剂：奥林巴斯原装试剂，试剂批号：BIL-D10511标准品：BECKMAN COULTER SYSTEM CALIBRATOR 批 号 ：BIL-T10511 BIL-D10511质控品：中值 BECKMAN COULTER CONTROL SERUM 1批号：0029A-2013/4/1高值：BECKMAN COULTER CONTROL SERUM 2批号：0030A-2013/5/1。

1.3 方法 (1)早晨空腹采静脉血于血清管。严格按照本室SOP上机操作。选择健康个体的具体条件[5]：没有任何影响检测结果的生理特征；未服用药物或进行饮食治疗；发育、精神正常，无心血管、肺肾肝胆胰等器质性疾病；三个月内无输血史和手术史；一月内未患任何疾病；妇女不在月经期、妊娠期和哺乳期；无酗酒史。

1.4 统计学方法 使用统计软件SPSS13.0进行运算和统计分析。

2 结果

2.1 240例健康参考个体总胆红素测定结果。见表1。按照NCCLSC28-A2文件推荐方法,取20例健康参考个体对 《全国临床检验操作规程》(第三版)推荐的总胆红素参考区间 3.4～17.1μmol/L进行验证,参考区间验证不通过，需建立适应本实验室的生物参考区间。同时,查阅资料文献显示,总胆红素存在性别生物差异,按照NCCLSC28-A2文件要求,建立区间时分组,每组收集120健康参考个体.数据从小到大排列,判断剔除离群值,实验数据不成高斯分布，采用百分位法确定2.5%和97.5%位数的参考限确定参考区间。

2.2 离群值结果判断 剔除异常值和错误数值，回收有效问卷380份,选择其中240例(男120例女120例)健康人群进行分析。离群值的处理：数据从小到大排列后判断是否有离群点：数据中疑似离群点可通过1/3规则进行判断，D是一个极端观测值(大的或小的值)和紧接着的极端观测值(第二大或第二小的值)之间的绝对差值，R是所有观测值的全距，即最大极值和最小极值的差值。差值D和数据全距R相除。求D/R比值，D/R=1/3为临界值，如果某个观测值的D值等于或大于1/3R值，则该极端值应予删除。男性：(26.09～25.9)/(26.09～6.2)=0.010，D/R≤1/3。 女性：(23.74～23.40)/(23.74～4.30)=0.017，D/R≤1/3，2组数据不存在离群点，所以保留所有数据。

2.3 作Z检验，确定检验项目是否存在生物差异，存在差异进行分组。将数据代入Z检验公式得Z=4.097。Z*=3(naverage/120)1/2=3[(n1+n2)/240]1/2=3[(120+120)/240]1/2=3。计算Z判断限值判断是否需要分组：Z=4.097>Z*=3,所以总胆红素要按性别分组分别统计。

2.4 总胆红素生物参考区间的确定 分析两组实验数据，若呈高斯正态分布可按x±1.96s表示95%数据分布范围，若数据不呈高斯正态分布则用百分位数法确定2.5%和97.5%位数的参考限，以此确定参考区间。两组实验数据分布都不成高斯正态分布，可按用百分位数法确定2.5%～97.5%位数的参考限，以确定参考区间。本研究总胆红素生物参考区间为男性 6.6～25.7μmol/L、女性 4.9～22.5μmol/L。

表1 240例健康参考个体总胆红素测定结果

3 讨论

本调查结果显示，西宁地区健康人群血清总胆红素参考区间比《全国临床检验操作规程》(第3版)[6]推荐的高。胆红素在体内有两个来源，一是衰老红细胞，被肝、脾、骨髓的单核-巨噬细胞分解，释放血红蛋白，后者在限速酶血红素氧合酶-1的催化下分解为胆绿素、一氧化碳、二价铁离子，胆绿素在胆绿素转化酶作用下还原为胆红素，这种方式生成占胆红素的80%以上，称主流胆红素。另外20%的胆红素来源于骨髓幼稚细胞的血红蛋白(无效造血)和体内含有亚铁血红素的蛋白质(如过氧化氢酶、过氧化物酶及细胞色素氧化酶与肌红蛋白等)，称分流胆红素。由此可知，血清胆红素与血红蛋白存在一定的相关性，提示西宁地区血清总胆红素较平原地区高，原因可能是地处高原，造成缺氧，Hb相对升高，进而胆红素的来源也相对升高，导致本地区总胆红素偏高。

因此，我们应建立适合本地区总胆红素的生物参考区间。国际化学委员会提出的方法[7]，每个实验室均应建立适用于本实验室的临床检测项目的生物参考区间，在引用试剂说明书或其它书刊文献提供的或转移其它实验室的生物参考区间之前，必须对其进行验证，以确保适用于本实验室。西宁地区为高原地区，《全国临床检验操作规程》(第3版)推荐的血清总胆红素的参考区间经验证不适用本地区，我们通过对健康体检人群的调查分析，采用适合本地区的血清总胆红素的参考区间，为临床提供可靠的参考区间。实验室为临床提供检验项目可靠的生物参考区间，才能使临床对患者或健康体检者的诊断治疗有明确的指引[2]。

本文通过收集240例健康参考个体，建立本地区总胆红素生物参考区间，考虑存在性别差异，需分组建立。实验数据经Z检验，Z=4.097，Z*=3，Z>Z*,分组后的均值间差异有统计学意义，需分2组统计，分别确定总本地区总胆红素生物参考区间为男性 6.6～25.7μmol/L、女性 4.9～22.5μmol/L。且男性高于女性，与国内文献报道[8，9]相符。可能与男、女的内分泌水平、劳动强度等存在差异有关。

检测项目因不同的实验方法等因素，参考区间存在差异。建立的参考区间应定期邀请临床医师参加实验室生物参考区间的评审可以弥补信息开源的不足，获取本地区人群生命体变化的资料、疾病诊治的新进展，以保证生物参考区间的适用性。

[1]魏有仁.参考值的几个基本问题[J].中国实验诊断学，1997，1(1)：44-46.

[2]海滨,张岩,徐玉秀,等.阜新地区健康人群血清总胆红素和直接胆红素参考范围调查[J].实验与检验医学,2010,28(6):610.

[3]冯仁峰.临床检验质量管理技术基础[M].上海：上海科技文献出版社，2004：136.

[4]Medical laboratories particular requirements for quality and competence[S].ISO15189,2007.

[5]王治国.临床检验方法确认与性能验证[M].北京:人民卫生出版社,2009:259.

[6]叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程[M].第3版.南京:东南大学出版社,2006:121-141.

[7]Solberg HE,Stamm D. International Federation of Clinical Chemistry IFCC.IFCCrecommendation-theroy of reference values.Part 4.Control of analytical variation in the production,transfer and application of reference values[J].Clin Chim Acta,1991,202(122):S5-S11.

[8]Dufour DR.Diagnosis and monitoring of hepatic injury[J].Clin Chem,2000,46(12):2027-2049.

[9]施志农.芜湖地区部分人群肝功血清酶两项参考值调查[J].检验医学与临床，2007,5(1)：29-49.